实训项目一 香菇菌丝体培养
一、目的要求
了解香菇菌丝体培养的重要作用，掌握香菇菌丝体的培养方法及应用。
二、实训原理
食用菌不仅营养丰富，味道鲜美，有较高的营养价值，而且对人体的某些疾病有特殊疗效，人工培养的食用菌菌丝体可以研制成饮料、药物、营养保健品等。
三、实训器材
（1）材料：香菇试管母种、液体培养基。
（2）仪器及用具：振荡培养箱、发酵罐、接种箱、高压灭菌锅、酒精灯、酒精棉球、玻璃球、接种铲、恒温箱等。
四、实训内容
（一）小规模菌丝体培养
1.液体培养基的配方
（1）土豆100g、玉米粉或麸皮20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、维生素B110mg、水1000mL。
（2）玉米粉50g、黄豆粉50g、麸皮20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、维生素B110 mg、水1000mL。
（3）土豆100g、蛋白胨或酵母膏10g、玉米粉或麸皮20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5 g、维生素B110mg、水1000mL。
2.主要配制步骤
称量→煮溶→过滤→分装→灭菌。
3.接种
将香菇试管母种接于液体培养基中，每100mL培养基接种3～4块母种，无菌操作。
4.培养
（1）静置培养：将接种后的液体培养瓶静置于恒温箱中48h，温度25℃。
（2）振荡培养：待气生菌丝延伸到培养液中时，置于振荡箱里进行振荡，培养3～5天，菌丝球数目增多且均匀分布于液体中即可；香菇培养液呈红棕色，并有香菇味。
（二）大规模菌丝体培养
利用液体发酵罐进行菌丝体扩大培养。利用液体菌种生产线可达到大规模菌丝体培养。其制作的主要工艺如下：
斜面菌种制备→摇瓶菌种制备→发酵罐菌丝体扩大培养。
（1）斜面菌种制备。
制备方法（培养基配方和操作步骤）同试管斜面母种的制备。
（2）摇瓶菌种制备。
主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡培养管理。
（3）发酵罐菌丝体扩大培养。
主要操作步骤：称量→煮制→分装→种子罐或发酵罐灭菌→无菌检验→接种→供氧搅拌培养管理。
大规模培养菌丝体时通过感官指标鉴别、仪表指示，控制其制作的主要参数：①菌龄；②菌种纯度检验；③接种量；④温度；⑤通气量；⑥搅拌速度；⑦酸碱度；⑧罐压；⑨泡沫控制；⑩发酵终点（菌丝球含量的抽样检测）。
生产上是使菌丝体大量生长繁殖，形成足够数量的、健壮的、高纯度的菌丝体。
五、思考题
（1）在香菇菌丝体的培养过程中应注意些什么？
（2）大规模菌丝体培养应控制哪些指标？怎样控制杂菌污染？
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