实训项目五 杂菌识别观察
一、目的要求
理解杂菌的种类及特性,掌握其观察方法。
二、实训原理
对食用菌有害的其他微生物统称为杂菌,主要有细菌、放线菌、真菌等,对子实体危害较重的是真菌原菌和细菌。杂菌主要是指与食用菌争夺营养,污染菌种、培养料等的有害微生物(不包括病毒、线虫)。常见的食用菌病害症状有变色、斑点、凹陷、软腐、萎缩、畸形等。
三、实训器材
放大镜、显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、消毒剂、染色液(美兰染色液或结晶紫)、超净工作台或无菌室、接种环、解剖针,被杂菌污染的试管母种、菌袋。
四、实训内容
1.感官观察识别
挑选被杂菌污染的试管母种、菌袋,依据外观颜色、生长状态、菌袋气味、分泌汁液等感官性状,识别观察霉菌、细菌、放线菌、酵母菌的污染状态。
2.载玻片压片观察法
在超净工作台无菌条件下,在载玻片上滴加一滴无菌水或生理盐水,用接种环挑取杂菌的菌丝或孢子,在载玻片上均匀混合接种,迅速盖上无菌盖玻片压紧。置于显微镜或解剖镜下观察霉菌、细菌、放线菌的菌丝,酵母菌的孢子污染状态。杂菌主要是霉菌(木霉、青霉、黑曲霉、黄曲霉、链孢霉、石膏霉等),它们最显著的特征是有特殊的颜色。
3.利用放大镜观察
利用放大镜观察所收集的杂菌,感官鉴别不同杂菌的孢子或菌丝体的颜色、形状。
4.制作水装片染色观察
用美兰染色液或结晶紫对菌丝体或孢子水装片染色,然后置于显微镜或解剖镜下观察,识别不同杂菌的菌丝体或孢子形态,鉴别它们与食用菌菌丝体或孢子的不同。
五、思考题
(1)分析杂菌污染的主要来源。
(2)杂菌与食用菌的菌丝体或孢子有什么不同?
(3)绘出你所观察到的杂菌孢子形态。
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