二、淡水养殖动物疾病的目检与镜检
淡水养殖动物疾病诊断所取的样本动物通常有三种,即正常的淡水养殖动物、刚刚病死的淡水养殖动物与具有明显症状濒死的淡水养殖动物。
用肉眼诊断淡水养殖动物疾病时,常常采用先外后内地观察及解剖检查方式,而且诊断时要密切关注水生动物器官及组织的病理症状。同时每一部位的检查,都是先用肉眼检查(简称目检),然后再用显微镜检查(简称镜检)。
肉眼检查是用眼睛仔细观察淡水养殖动物各部位或各组织与器官有无病变发生如充血、溃烂、变色、肿胀、粘液增多、粗糙、畸形等及肉眼可见的大型寄生虫。
采用显微镜检查发生病变的组织与器官时,通常情况下是根据不同的水生动物易患疾病而取相应的病变组织,当然具体检查时多是通过肉眼观察到的病变部位,取相应的组织进行检查。显微镜检查时先用低倍镜然后再用高倍镜观察。一般解剖镜或放大镜观察大型寄生虫如绦虫、线虫、棘头虫等;使用显微镜检查时,通用的方法是:4(物镜)×10(目镜)用于观察寄生虫的形态;10×10用于观察浮游生物或真菌形态;40×10用于观察寄生虫、浮游生物或真菌的结构; 100×10用于观察细菌的形态。病毒必须用电子显微镜才能观察。
1.目检
通过目检,找出患病部位的各种症状或一些肉眼可见的病原体,为诊断淡水养殖动物疾病提供依据。检查部位主要采取由表及里的方法,即先检查外部,再检查内部。每一部位的检查,都是先用肉眼检查,然后用显微镜检查。对养殖鱼类而言,重点检查病鱼三个部位即体表、鳃、体腔。
(1)查体表。观察淡水养殖动物体色是否正常,体表有无发红、充血现象以及是否有红点(斑)、白点(斑)、黑点(斑);体表、鳍(附肢)有无异常,鳍(附肢)是否完整;是否掉鳞、腐烂、溃疡;有无突起、囊肿、包囊;口腔内有无溃疡或异常;眼睛是否正常,有无浑浊、瞎眼、突出;肛门是否红肿或脱肛等。
患病淡水养殖动物的体色,一般都不正常,有的淡水养殖动物体型也会发生明显变化。多数情况下,患烂鳃病时体色就发黑,特别是头部在水中看得更为明显;患肝损伤综合症时鳍条的未端常发白;患竖鳞病时鳞片竖立;鲤鱼患白云病体表被覆一层薄膜式或瓦状的白膜;病鱼体表充血、发炎、鳞片脱落是赤皮病;若草鱼鳃盖或鳍基部充血,肌肉呈点状充血或块状淤血是病毒性出血病;病鱼腹部膨大,肛门红肿呈紫红色,轻压腹部有乳黄色液体流出是肠炎病;白鲢尾柄及腹部两侧有火烙样的红斑或表皮腐烂是打印病;生有棉絮状的白色物是水霉病;体表黏液较多有小米粒大小、且形似臭虫的虫体是鱼鲺病;体表有白色亮点,离水2h亮点消失是小瓜虫病;体表有白色斑点,白点之间有出血或红色斑点是卵甲藻病;体表有红点并伴有针状虫体寄生是锚头鳋病;病鱼尾柄表皮发白是白皮病;病鱼在水中头部或嘴部明显发白,离水后不明显是白头白嘴病;鱼下唇突出呈簸箕口状,则是因时常缺氧浮头引起;罗非鱼眼球突出、鳃盖充血可能是链球菌引起;常规养殖鱼类的眼球突出与暴发性鱼病相关联;还有跑马病、气泡病等等用肉眼一看就能初步确诊。
(2)查鳃。打开鱼类的鳃盖,检查鳃丝上有无包囊和囊肿,鳃丝有无褪色和腐烂。正常的鳃丝整齐、紧密,呈红色。鳃丝腐烂、尖端软骨外露,并有污泥多是烂鳃病;部分鳃丝发白呈花斑鳃状,很可能是鳃霉病或病毒病;鱼鳃发紫且有大包囊或小包囊多半是孢子虫病;口咽腔上壁或左或右有明显肿大是孢子虫病;鳃丝末端挂着像蝇蛆一样的白色小虫是中华鳋病;鳃部浮肿,鳃盖张开不能闭合,鳃丝呈暗淡色是指环虫病。
(3)查体腔。打开病鱼腹部,首先观察淡水养殖动物的腹腔内是否有腹水和肉眼可见寄生虫,同时观察腹腔内各器官与组织是否正常,再检查肠道或胃是否正常。
草鱼肠道全部或部分充血发红,且肠道内无食物,也没有脓液是病毒性出血病。鳜鱼胃壁呈斑块充血,肠道充血发红或呈环状充血,肠内容物充塞黄色琉晶样物质是鳜鱼的病毒病。肠道内发炎且伴有大量乳黄色黏液是肠炎病。肠道呈白色且前段肿大,肠内壁有许多白色絮状小结节为球虫病或孢子虫病。其次检查鱼的肝脏、胆囊颜色有无异常,是否肿大,正常的鱼肝脏不易破碎,胆囊颜色为浅绿色,如果肝脏明显肿大,颜色变成土黄色或花斑易碎,胆囊明显肿大或萎缩、颜色加深为墨绿色是典型的肝损伤综合症;而肝脏里有白色或黄色结节,解剖结节后有白色或略带红色的脓汁是诺卡菌病。然后检查鱼的鳔,正常的鱼鳔呈银白色,鳔充血或肿大,说明鱼生病了,不同品种鱼病也不一样,例如鳊鱼的鳔中室典型充血,初步可以判断为鳊鱼的暴发性出血病,鳗鱼的鳔充血肿大多半是鳗居线虫病。最后检查肾脏是否变色或肿大,正常鱼的肾脏鲜红;乌鳢的肾脏上有白色栗状结节,有时肝脏、心脏上也可见白色栗状结节,多因诺卡氏菌引起。
根据“三查”所掌握的有关情况,再结合发病季节进行综合分析,就可以比较准确地诊断鱼病,从而做到对症下药。
2.镜检
显微镜检查是诊断鱼病的重要方法之一。有些鱼类病原体肉眼看不清或根本看不见,必须借助于显微镜、解剖镜或放大镜来诊断。如白头白嘴病是由细菌引起的,其症状是头和嘴发白,但又常与车轮虫病并发。而患车轮虫病的病鱼,有时也会在头部或嘴部出现轻微的灰白现象,容易被误认为是白头白嘴病。通过镜检,就能作出正确的诊断。
镜检时取样要有代表性,镜检的顺序和目检相一致也是先外后里,一般体表粘液取胸鳍后面的粘液,鳃取由外到里第二鳃片中间鳃丝末端,肠取前肠和后肠。取下各器官、组织置于不同的器皿中,从患病个体病变处刮取粘液或取部分组织,制成水浸片后用光学显微镜检查,对可疑的病变组织或难以辨认的病原体,要用相应的固定液或保存液固定或保存,以供进一步观察和鉴定。
镜检的方法是将从病变部位取少量的组织或粘液置于载玻片上,如是体表和鳃的组织或粘液,应加上少量普通水;是内脏组织则用生理盐水,然后盖上盖玻片,并稍加压平,于显微镜下进行观察,一般需制2~3块玻片,先用低倍镜检查,当发现有虫体但结构看不准时,再换中倍镜或高倍镜检查。玻片从左到右,移下一小格,再从右往左,自上而下周而复始地移动,直至整个玻片看完,记下寄生虫的种类和数量。一般几十微米大小的寄生虫如鞭毛虫等用高倍记数,几百微米的寄生虫如车轮虫等用低倍记数。
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