三、显微镜检查
镜检一般是根据肉眼检查时所确定下来的病变部位进行的,在这个基础上,再进一步作全面检查。
1.镜检的方法
(1)玻片压展法。取被检动物器官或组织的一小部分,或一滴黏液、或一滴肠内容物等,置于载玻片上,滴少许清水或生理盐水,用另一载玻片压片,然后置解剖镜或低倍显微镜下观察,辨认病原体。检查后用镊子或解剖针或微吸管吸出寄生虫或可疑的病象组织,分别放入清水或生理盐水的培养皿中,以待作进一步的处理。
(2)载玻片法。此法适用于低倍或高倍显微镜检查。取要检查的小块组织或小滴内含物置于载玻片上,滴入少许清水或生理盐水,盖上盖玻片,轻轻压平(避免产生空气泡),先置于低倍镜下检查,寻找目标,然后再用高倍镜观察,以确定病原体。如果是细菌引起的疾病,制片时还要染色。
由于镜检只能检查很小的部分组织,为了避免遗漏,每一个病变部位至少要制三个片子,检查不同点的组织。
(3)病理切片检查。取小块患病组织或器官,经固定、脱水、包埋等程序处理后,将样品切成极薄的小片,再用相应的染色方法染色,以显示不同细胞和细胞的变化,然后进行光学显微镜检查(进一步观察需用电子显微镜)。
2.各器官的镜检
(1)黏液。用解剖刀刮取水产动物体表黏液,制成玻片,用显微镜或解剖镜检查,可发现鱼波豆虫、隐鞭虫、黏孢子虫、小瓜虫、车轮虫及吸虫囊蚴等病原体。
(2)鳃。取小块腮组织制成玻片,在显微镜下检查,可发现鳃隐鞭虫、波豆虫、车轮虫、黏孢子虫、肤孢虫、斜管虫、小瓜虫子、半眉虫、杯体虫、毛管虫、指环虫、双身虫和复殖吸虫囊蚴等寄生性病原体;微生物病原体有细菌、水霉和鳃霉等。
(3)胃肠。将肠分前、中、后三段,分别取胃肠内含物一小滴置于载玻片上,滴一小滴生理盐水,压片镜检,可发现鞭毛虫、变形虫、黏孢子虫、微孢子虫、球虫和纤毛虫等原生动物。六鞭毛虫、变形虫和肠袋虫等一般寄生在后肠近肛门3~7cm处,而复殖吸虫、绦虫、线虫和棘头虫等通常在胃、前肠或中肠寄生。
(4)肝。剪开肝叶,用载玻片蘸切口内含物,再用瑞氏染色法染色,油镜下可观察到细菌;取肝少许组织,压片镜检,可发现黏孢子虫、微孢子虫的孢子和胞囊。
(5)血液。从鳃动脉或心脏取血。如从鳃动脉取血,先剪去一侧鳃盖,然后左手用镊子将鳃瓣掀起,右手用微吸管插入鳃动脉或腹大动脉吸取血液。吸起的少许血液可直接放在载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下检查;吸起较多的血液,可放入培养皿内,然后再取一小滴制成玻片,在显微镜下检查。如从心脏取血,除去鱼体腹面两侧鳃盖内之间最狭处的鳞片,用尖的微吸管插入心脏,吸取血液。血液镜检可发现锥体虫、拟锥体虫等原生动物。培养皿内的血液可用生理盐水稀释后,在解剖镜下检查,可发现线虫和血居吸虫。
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