【摘要】：植物组织培养要求严格的无菌条件和无菌操作技术。无菌操作是植物组织培养的关键技术，因为培养基含有丰富的营养物质，不仅适宜培养材料的生长发育，更适合微生物的滋生。一旦微生物接触到培养基，就会迅速生长和繁殖，不仅大量消耗营养物质，其繁殖过程中还会形成有毒有害物质直接危害植物组织，甚至直接利用和消耗植物材料，导致组织坏死直至失去培养价值。每人要求接种5瓶。
一、实验实训目的
通过在超净工作台上进行无菌操作训练，使学生初步掌握组织培养的无菌操作技术。
二、实验实训原理
植物组织培养要求严格的无菌条件和无菌操作技术。无菌操作是植物组织培养的关键技术，因为培养基含有丰富的营养物质，不仅适宜培养材料的生长发育，更适合微生物的滋生。一旦微生物接触到培养基，就会迅速生长和繁殖，不仅大量消耗营养物质，其繁殖过程中还会形成有毒有害物质直接危害植物组织，甚至直接利用和消耗植物材料，导致组织坏死直至失去培养价值。
三、实验实训材料与用具
（一）材 料
学生自行选取的外植体。
（二）实验仪器、器皿及用具
超净工作台、接种工具（主要是剪刀、镊子、解剖刀等）、植物材料（已灭过菌）、已配制好的培养基、酒精灯（或干热灭菌器）、酒精喷壶、天平、脱脂棉、记号笔、白大褂、工作帽、拖鞋等。
（三）试 剂
70%的酒精、95%的酒精、无菌水、2%的次氯酸钠。
四、实验实训操作步骤
（一）无菌操作前的准备工作
（1）培养室、无菌操作室的清扫和灭菌（参照实验实训二）。
（2）配制培养基（参照实验实训四）。
（3）培养基、接种工具等灭菌（参照实验实训二）。
（4）外植体的选取及消毒（参照实验实训五）。
（二）外植体的接种
（1）左手将培养瓶水平拿着，右手拿镊子夹一块植物材料（灭过菌的）送入瓶内，轻轻插入培养基上，再将瓶口置酒精灯火焰区烘烤数秒钟后，迅速盖上封口膜，绑好瓶口。每人要求接种5瓶。
（2）在培养瓶外标清培养基编号、培养材料、接种日期，送入培养室。
（3）接种结束后，清理和关闭超净工作台。
五、作 业
将本次实验实训内容整理成实验实训报告。
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