鉴别试验的项目

药物的鉴别试验（identification test）是根据药物的分子结构、理化性质采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪。它是药品质量检验工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义。《中国药典》和世界各国药典所收载的药品项下的鉴别试验方法，均为用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而不是对未知物进行定性分析。这些试验方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构，因此不能赖以鉴别未知物。如《中国药典》凡例中对药物鉴别的定义为：鉴别项下规定的实验方法，仅反映该药品某些物理、化学或生物学等性质的特征，不完全代表对该药品化学结构的确证。

（一）性状

药物的性状（description）反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度和物理常数等。

1.外观 外观是指药品的外表感观和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。如《中国药典》对维生素B1的描述为“本品为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅速吸收约4%的水分”。

2.溶解度 溶解度是药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药品的纯度。《中国药典》采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药品在不同溶剂中的溶解性能。方法：称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于（25±2）℃一定容量的溶剂中，每隔5min强力振摇30 s；观察30min内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。如尼莫地平“在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酷中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶”。

3.物理常数 物理常数是评价药品质量的主要指标之一。其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯净程度。《中国药典》收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数等。

（1）熔点：系指一种物质按规定方法测定，由固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。是多数固体有机药物的重要物理常数。《中国药典》收载有3种测定方法，其中最常用的方法为测定易粉碎固体药品的“第一法”，此外还有少数品种采用的“第二法”和“第三法”，一般未注明者均指“第一法”。测定时根据供试品熔融时同时分解与否，调节传温液的升温速度为2.5～3.0℃ /min或1.0～1.5℃/min。要求报告“初熔”（供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴时的温度）和“全熔”（供试品全部液化时的温度）。如醋酸地塞米松：“本品的熔点为223～233 ℃，熔融时同时分解”。

（2）比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长1 dm且每1 ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度称为比旋度。它是反映手性药物特性及其纯度的主要指标，可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。如维生素C的比旋度测定：“取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1 ml中约含0.10 g的溶液，依法测定，比旋度为+20.5。～+21.5°。”

（二）一般鉴别试验

一般鉴别试验（general identification test）是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。对无机药物是根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应；对有机药物则大都采用典型的官能团反应。因此，一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。

通常一般鉴别试验仅供确认药物质量标准中单一的化学药物，若为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，一般是不适用的。《中国药典》通则项下的一般鉴别试验所包括的项目有：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、镁盐、钙盐、钡盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸椽酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）。现以几个典型的无机离子及有机物官能团为例来阐明鉴别试验原理。

1.有机氟化物

（1）鉴别方法：取供试品约7 mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，以用水20 ml与0.01 mol/L氢氧化钠溶液6.5 ml为吸收液，待燃烧完全后，充分振摇，取吸收液2 ml，加茜素氟蓝试液0.5 ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2 ml，用水稀释至4 ml，加硝酸亚铈试液0.5 ml，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。

（2）反应原理：有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH=4.3的溶液中形成蓝紫色络合物，反应式如下：

2.有机酸盐（如酒石酸盐）

（1）鉴别方法：取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银游离并附在试管内壁成银镜。

（2）反应原理

3.芳香第一胺类

（1）鉴别方法：取供试品约50 mg，加稀盐酸1 ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1 mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成橙黄色至猩红色沉淀。

（2）反应原理

4.托烷生物碱类

（1）鉴别方法：取供试品约10 mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2～3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。

（2）反应原理：托烷生物碱类均具有茛菪酸结构，可发生Vitali反应，水解后生成茛菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾醇溶液作用，转变成醌型产物而显深紫色。后马托品具茛菪醇结构而不具茛菪酸结构，不能发生此反应，可以此区别。

5.无机金属盐

（1）钠盐、钾盐、钙盐、钡盐的焰色反应

1）鉴别方法：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显各离子的特征颜色。如钠离子显鲜黄色；钾离子显紫色；钙离子显砖红色。

2）测定原理：钠的火焰光谱的主要谱线有589.0 nm、 589.6 nm，显黄色。钾的火焰光谱的主要谱线有766.49 nm、 769.90 nm等，由于人眼在此波长附近敏感度较差，故显紫色。如有钠盐混存，因钠焰灵敏度很高，遮盖了钾焰的紫色，需透过蓝色钻玻璃将钠焰的黄色滤去，此时火焰显粉红色。钙的火焰光谱的主要谱线有622 nm、 554 nm、 442.67 nm与602nm，其中622 nm的谱线最强，显砖红色。

（2）铵盐

1）鉴别方法：取供试品，加过量氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇用水湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。

2）测定原理

6.无机酸根

（1）氯化物

1）鉴别一：取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。

2）鉴别二：取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。

（2）硫酸盐

1）鉴别一：取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

2）鉴别二：取供试品溶液，滴加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。

3）鉴别三：取供试品溶液，加盐酸，不生成白色沉淀（与硫代硫酸盐区别）。

（3）硝酸盐

1）鉴别一：取供试品溶液，置试管中，加等量的硫酸，小心混合，冷后，沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两液层，接界面显棕色。

2）鉴别二：取供试品溶液，加硫酸与铜丝（或铜屑），加热，即产生红棕色的蒸气。

3）鉴别三：取供试品溶液，滴加高锰酸钾试液，紫色不褪去（与亚硝酸盐区别）。

（三）专属鉴别试验

药物的专属鉴别试验（specific identification test）是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的、灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。如巴比妥类药物中含有丙二酰脲母核，主要的区别在于5，5-位取代基和2-位取代基的不同：苯巴比妥含有苯环，司可巴比妥含有双键，硫喷妥钠含有硫原子，可根据这些取代基的性质，采用各自的专属反应进行鉴别。又如甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要的结构差别在A环和D环的取代基不同，可利用这些结构特征进行鉴别确证。以上详细内容可见有关章节。

一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。而专属鉴别试验，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。