猪肉中瘦肉精的快速检测_砺行生命科学

猪肉中瘦肉精的快速检测_砺行生命科学

实验一　猪肉中瘦肉精的快速检测

一、“瘦肉精”简介

盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CL），化学结构式C12H18Cl2N2O-HCl，又名克伦特罗，它是人工合成的β-肾上腺素受体激动剂之一，有松弛支气管平滑肌的作用，最早用来治疗人的哮喘病；由于能促进畜禽的生长，而后曾用于畜禽饲料添加剂，因为畜禽食用后在代谢过程中能够促进蛋白质的合成以及脂肪的降解，提高畜禽的瘦肉率。20世纪90年代，我国错误地将其作为科研成果开始以饲料添加剂引入并推广，俗称为“瘦肉精”。该药易在畜禽体内特别是内脏中残留，特别是肺、肝、肾等内脏里，并通过食物链进入人体，其累积性残留随剂量和时间而增大；而且化学性质稳定，加热到172℃时才分解。因此，一般的烹调加热方法不能将其破坏。人食用含“瘦肉精”残留量高的肉制品和内脏后，就会引起中毒，出现全身肌肉颤抖、头晕、呕吐等中毒症状，严重危害人类健康，特别对于患有高血压、心脏病的人来说危险性就更大，直接危及生命安全。

二、肉食品中瘦肉精残留现状十分严峻

近十年，国内外发生的多起瘦肉精中毒事件触目惊心。1996年意大利Caserta市发生62例因食用含瘦肉精残留的牛肉引起的中毒事件；2006年，一批来自浙江海盐县瘦肉精超标猪肉和内脏导致上海9个区336人次中毒。据不完全统计，1998年以来，我国相继发生18起瘦肉精中毒事件，中毒人数达1 700多人，死亡1人。这些案例说明，瘦肉精滥用已经成为重大的危害食品安全问题。(www.guayunfan.com)

三、我国瘦肉精管理法规

我国农业部于1997年就发文明令禁止。我国及其他一些国家的相关具体法律或规定如下:中华人民共和国农业部第193号公告中将瘦肉精列为违禁药品，规定其及盐、酯及制剂在所有食品动物的可食用组织中不得检出，并将其从《中国兽药典》中删除。

四、瘦肉精快速检测技术

瘦肉精易被胃肠道吸收，人或动物服用15～20min即起作用，且作用时间持久，药理作用较强，因此一般情况下进食20μg瘦肉精就可出现中毒症状。瘦肉精主要作为饲料的添加剂使用，在经济利益的驱使下，违法滥用现象仍较为普遍，我国各地中毒事件仍然频繁发生。因此，需要利用快速检测的方法在很短的时间内可以确定食品的安全性。

目前国内应用最广泛的快速方法主要是免疫金标速测法，可对尿、猪肉等样品进行快速筛检。

五、实验部分

1.实验目的

学习并了解猪肉中瘦肉精快速检测的技术方法和操作步骤。

2.实验原理

如果猪肉样本中的瘦肉精含量大于5ng/mL，检测线不显颜色，结果为阳性；反之，检测线显红色，结果为阴性。

3.所需试剂、器材

不需要任何特殊仪器设备，仅需要微量移液器、小型离心机、水浴锅、电子天平、剪刀、镊子常规实验器具，瘦肉精速测卡（上海捷门保林迈生物工程有限公司提供）。

4.操作步骤

（1）测试前将未开封的检测卡恢复至室温。

（2）将肉及内脏样本4g剪碎，装入5mL的离心管中，盖紧管盖。

（3）90℃以上水浴锅中加热10min，取出冷却至室温。

（4）吸取100μL煮出的样品渗出液到1.5mL的小离心管中，加入100μL的缓冲液。

（5）从原包装铝箔袋中取出检测卡，在1h内使用。

（6）将检测卡平放，用微量移液器垂直滴加100μL无气泡冷却样本渗出液于加样孔，并开始计时。

（7）反应10min，根据示意图判定结果。

（8）若质控线不显色或只有检测线显色，说明不正确的操作过程或检测卡失效（图4-1）。

图4-1　瘦肉精速测卡检测示意图

5.储存及有效期

原包装在4～30℃阴凉避光干燥处储存，有效期为12个月，批号和有效期见包装盒。

6.注意事项

（1）检测卡在室温下一次性使用。

（2）肉及内脏中固体颗粒会导致假阳性结果，取样时弃去肉眼可见的颗粒部分。有条件时请离心后取上清液作检测。

（3）检测时避免阳光直射和电风扇、空气调节器风直吹。

（4）自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。

（5）由于肉样的差异，有的检测线可能偏淡或颜色偏灰，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。

（6）出现阳性结果，建议用本卡复查一次。气质联用法是瘦肉精检测的确证方法。