席夫试剂无水乙醇乙醇乙醇石蜡固定液配方

三、实验材料、设备和试剂

黑麦(2n=2x=14)，玉米(2n=2x=20)，蚕豆(2n=2x=12)。显微镜，酒精灯，镜头纸，培养皿，材料瓶，载玻片，盖玻片，镊子，解剖针，刀片，吸水纸，标签。甲醇－冰醋酸固定液(3∶1)，FAA固定液;甘油蛋白，1mol/L HCl，45%醋酸;1%醋酸洋红或醋酸地衣红，改良苯酚品红，醋酸－铁矾－苏木精等染液，席夫试剂;无水乙醇，95%乙醇，80%乙醇，70%乙醇;石蜡。

FAA固定液配方:

福尔马林(38%甲醛)5ml，冰醋酸5ml，70%乙醇90ml。

醋酸洋红:

45%醋酸100ml，加洋红1g，煮沸(不超过30秒)，冷却后过滤即成。

改良苯酚品红:

原液A:取3g碱性品红溶于100ml的70%乙醇中(可长期保存)。

原液B:取原液A 10ml，加入90ml的5%石炭酸水溶液(限2周内使用)。

原液C:取原液B 45ml，加冰醋酸和福尔马林(37%甲醛)各6ml(可长期保存)。

染色液:取原液C 10～20ml，加45%(体积比)的醋酸80～90ml，再加山梨醇1．8g，配成10%～20%的石炭酸品红液，一般两周以后使用着色能力显著加强。

铁矾－苏木精:

分别配制A、B两液，染色前配合使用。

A液［4%硫酸铁铵(铁明矾)水溶液］:4g铁明矾，溶于100ml水中(现配现用，保持新鲜，铁明矾为紫色结晶，若为黄色则不能用)。

B液(0．5%苏木精水溶液)(用前6周配制):取0．5g苏木精溶于5ml 95%乙醇中，充分溶解，制成10%苏木精乙醇溶液，贮藏于阴凉处，可保存3～6个月，使用时再加蒸馏水至100ml。

A液、B液不能混合，须分别使用。

席夫试剂:

在100ml煮沸的蒸馏水中缓慢加入0．5g碱性品红，待充分溶解后冷至50℃，加入1mol/L盐酸10 ml。冷至25℃左右再加入1g偏重亚硫酸钠(或偏重亚硫酸钾)，充分振荡，然后加入1g活性炭，搅动1min，过滤并密封于细口瓶中，置于黑暗阴凉处或放入4℃～8℃冰箱中保存。配好后的染色液应为无色或淡茶色。

0．1%～0．4%秋水仙素的配制:

取秋水仙素1g(先用少许95%酒精助溶)，溶于250～1000ml蒸馏水中，配成0．1%～0．4%秋水仙素溶液。亦可制成较高浓度的母液，放入棕色玻璃瓶内，用时再稀释到所需的浓度。