实训一 植物组织培养室参观与设计
一、目的和要求
通过参观,使学生掌握如何组建植物组织培养实验室;同时,熟悉组培中涉及的各种仪器设备和器皿用具。
二、仪器与用具
仪器:超净工作台、空调机、蒸馏水发生器或纯水发生器、高压灭菌锅、普通冰箱、电炉、显微镜、天平、恒温培养箱、烘箱等设备。
用具:各种培养皿、各种实验器皿和各种器械用具。
三、方法步骤
(一)实验室组成
1.指导老师集中介绍组织培养实验室守则及有关注意事项
2.指导老师讲解本次实验的目的、仪器设备和器皿用具的名称及实验步骤
3.指导老师逐一讲解组培实验室的构建情况
包括准备室(又称化学实验室)、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室、温室等使用的各种仪器设备和器皿用具的名称、用途。
(1)准备室(化学实验室)。面积:20m2左右。用途:器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌、植物材料的预处理、重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析,试管苗出瓶,清洗及整理工作。要求:明亮、通风。设备:工作台、橱柜、水池、仪器、药品等。
(2)缓冲室。面积:3~5m2。用途:进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋,戴上口罩。设备:1盏紫外灯、1个配电板、时控器等。
(3)无菌操作室(无菌室,接种室)。面积:10~20m2,视生产规模和超净工作台数量而定。用途:材料的灭菌接种,无菌材料的继代,丛生菌的增殖或切割,嫩枝扦插生根等,是关键的部分,关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。要求:干爽安静、清洁明亮,墙壁光滑平整不易积染灰尘,地面平坦无缝便于清洗和灭菌。门窗要密闭,一般用移动门窗。设备:超净工作台、空调机、医用小平车、操作台、搁架等。
(4)培养室。面积:视培养架多少及培养物数量而定。用途:将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。设备:①培养架与灯光。培养架数目多少视生产规模而定,年产4万~10万苗需4~6个培养架;年产10万~20万苗需8~10个培养架。每个培养架一般6层,总高度2m,每0.3m为一层,最下一层距离地面0.2m;架宽以0.6m为好;架长以40 W日光灯的长度来决定,即约1.26m。每层架子安装2盏日光灯。②通风设备在稍高处设置进风气窗,在其对侧近天花板处设置排风窗。③边台、空调机、加湿器(除湿器)、各类显微镜、温湿度计。
(5)驯化室。面积:视生产规模而定。用途:组培苗(试管苗)移栽前进行炼苗。要求:清洁无菌。设备:空调机、加湿器、恒温恒湿控制仪、喷雾器。
(6)温室。面积:视生产规模而定。用途:保证试管苗不分季节地常年生产。设备:温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药物。
(二)实验室设计
常见实验室设计,如下图。
四、实训报告
1.每个人设计一个植物组织培养实验室的组建方案(可用CAD软件或WORD软件)。
2.将本次实训内容整理成实训报告。
3.实验中的问题及解决方法。
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