卵磷脂的提取及鉴定

实验二　卵磷脂的提取及鉴定

【实验目的】

1．加深了解磷脂类物质的结构和性质。

2．掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。

【实验原理】

磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开。此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

【实验材料】

鸡蛋黄。

【实验器材】

小烧杯、试管等。

【药品试剂】

1．红色石蕊试纸。

2．95%乙醇。

3．10%氢氧化钠溶液。

4．钼酸铵试剂:将6 g钼酸铵溶于15 ml蒸馏水中，加入5 ml浓氨水，另外将24 ml浓硝酸溶于46 ml的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。

5．丙酮。

6．乙醚。

7．3%溴的四氯化碳溶液。

8．硫酸氢钾。

【实验方法】

1．卵磷脂的提取:称取约10 g蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30 ml，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干燥后的物质即为卵磷脂粗提取物。

2．卵磷脂的溶解性:取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5 ml乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5 ml，观察实验现象。

3．卵磷脂的鉴定:

(1)三甲胺的检验:取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5 ml氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15分钟，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。

(2)不饱和性检验:取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3%溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察有何现象产生。

(3)磷酸的检验:取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5～10滴钼酸铵试剂，观察现象，最后将试管放入热水浴中加热5～10分钟，观察有何变化。

(4)甘油的检验:取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0．2 g硫酸氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。

【思考题】

1．写出卵磷脂的化学结构，为什么卵磷脂是一种良好的乳化剂?

2．怎样分离卵磷脂和中性脂肪?怎样分离卵磷脂和脑磷脂?