细胞有丝分裂的观察

实验实训三　细胞有丝分裂的观察

一、实训目标

（1）观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。

（2）初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。

（3）初步掌握绘制生物图的方法。

二、实训原理

在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂间期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色。

三、实训材料、试剂与仪器

1．材料

洋葱（可以用蒜、葱代替）。

2．试剂

15%（g/mL）的盐酸、95%（mL/mL）的酒精、0．01g/mL或0．02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）。

3．仪器

显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿（3个）、剪刀、镊子、滴管。

四、操作要点

1．洋葱根尖的培养

在上实验课之前的3～4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。

2．装片的制作

（1）解离　上午10时至下午2时是洋葱根尖细胞有丝分裂的活跃期，可在这个时间范围内剪取洋葱的根尖2～3mm，立即放入盛有15%（g/mL）的盐酸和95%（mL/mL）的酒精的混合液（1∶1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min后取出根尖。

（2）漂洗　待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。

（3）染色　把洋葱根尖放进盛有0．01g/mL或0．02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中，染色3～5min。

（4）制片　用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后用拇指轻轻地压载玻片，这样可以使细胞分散开来。

3．洋葱根尖细胞有丝分裂的观察

（1）低倍镜观察　把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生区细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。

（2）高倍镜观察　找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。

如果自制装片效果不太理想，可以观察教师演示的洋葱根尖细胞有丝分裂的固定装片。

五、绘图

在观察清楚有丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图。要求绘植物细胞有丝分裂中期图。

六、问题与讨论

制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？