三疣梭子蟹个野生群体线粒体基因片段的比较分析

三疣梭子蟹（P.trituberculatus）大规模人工养殖已经在我国沿海地区广泛展开，这不仅增加了个体间的基因交流，而且随着养殖规模的发展和环境恶化，对野生资源的影响越来越大，造成了种质退化和遗传多样性降低等问题。因此对三疣梭子蟹种质资源保护和种群遗传结构的研究逐渐深入，国内海洋生物工作者完成了许多关于三疣梭子蟹遗传多样性的研究工作（高保全等2007；郭天慧等2004；冯冰冰等2008；王敏强等2008）。由于我国三疣梭子蟹人工养殖亲本主要为天然海捕亲蟹，因此尽可能避免野生群体遗传多样性降低方面的研究显得十分重要。本研究利用线粒体16S rRNA 和COI基因2个基因片段，对采自我国即墨市会场村、日本北海道和韩国东海岸的三疣梭子蟹野生群体进行了遗传分析。目的是搞清不同地区三疣梭子蟹的DNA变异水平，探明会场村三疣梭子蟹的遗传多样性水平，为确定会场村三疣梭子蟹的分类地位、进而对其进行资源保护提供基础资料。

试验用三疣梭子蟹系2007年分别取自我国即墨市会场村、日本北海道以及韩国东海岸，带回实验室后-80℃保存。提取肌肉基因组DNA。用DNA定量仪测定样品DNA的浓度和纯度，-20℃保存备用。16S rRNA 基因片段扩增的引物为：16S AR：59-CGCCTGTTTATCAAAAACAT-39，16S BR：59-CCGGTCTGAACTCAGATCACG-39；COI基因片段扩增的引物为： COIL1490：59-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-39，COIH2198：59-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-39。