第二节 透明叶制作方法
透明叶对研究叶结构是十分有用的。它能除去叶绿素颜色,保持叶片组织透明,染色后能清晰地呈现出叶脉的走向和各级叶脉的分布,还可以观察到叶表层和组织内的一些特殊结构,如毛、腺点、油点、鞣质块、晶体、石细胞(群)等。这个方法适用于整体的叶片或较大的残碎叶片。
透明叶的制作:
1.将干叶片放入培养皿中,注入5%的氢氧化钠(NaOH)溶液,使叶片沉入溶液中,溶液不久转为茶色,每天更换一次溶液,直到由浓茶色变为浅、淡茶色为止。这个过程一般需4~6天。质薄的叶片天数可略少,质厚的叶片天数可能略多;
2.在流水中冲洗半小时(注意水流不可直接冲击叶片);
3.将叶片浸入冰醋酸中约15分钟(不能超过30分钟);
4.倒去冰醋酸,加入5%次氯酸钠(NaHClO2)直到叶片变成白色或无色;
(3、4两项工作应置于通风橱中进行)
5.在流水中冲洗半小时(水流仍不可直接冲击叶片);
6.将叶浸入过饱和的水合氯醛[CCl3CH(OH)2]水溶液中12小时(此溶液可回收反复使用);
7.在流水中冲洗半小时;
8.依次用10%、25%、50%的酒精脱水;(脱水时为防止叶片翘曲需用纱网之类物品将叶片压住)
9.去掉网纱,用50%酒精配制的1%番红溶液染色,1~2小时;
10.染色后的叶片放入50%、70%、85%、95%、无水酒精、无水酒精和二甲苯各占一半的溶液中依次脱水透明,以使叶脉和叶肉组织颜色深浅分明;
11.置入纯二甲苯溶液中透明;
12.装片。将叶片放入两载玻片之中,介质为冷杉胶或中性树胶,令其逐渐干燥(约需4周时间)。
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