用去污剂反复处理线粒体内膜,可将呼吸链分离得到四种具有电子传递功能的复合体。复合体Ⅰ即NADH-CoQ还原酶,含有黄素蛋白和铁硫蛋白;复合体Ⅱ为琥珀酸-CoQ还原酶,含有黄素蛋白、铁硫蛋白和细胞色素(Cyt)b450;复合体Ⅲ为CoQ-Cytc还原酶,由Cytb、Cytc1和铁硫蛋白组成;复合体Ⅳ为Cytc氧化酶,是由Cyta和Cyta3组成,由于Cyta和Cyta3结合紧密,不易分开,故被称为Cytaa3。在呼吸链中只有Cytaa3可直接将电子传递给氧,使氧激活为O2-,所以Cytaa3又被称为细胞色素氧化酶。
组成呼吸链的递氢体和递电子体,主要分为五类:
(一)NAD+和NADP+
NAD+和NADP+是许多不需氧脱氢酶的辅酶。在生理情况下,NAD+或NADP+分子中尼克酰胺的氮为五价,能接受电子变为三价,此反应是可逆的;另外,其对侧的碳原子也比较活泼,能可逆的加氢和脱氢。NAD+和NADP+在呼吸链中一般被称为递氢体。实际上,在加氢反应时,尼克酰胺只接受一个氢原子和一个电子,将另一个H+留在介质中。所以,NAD+或NADP+可接受一个氢原子和一个电子被还原,其还原型分别写作NADH+H+和NADPH+H+。
(二)黄素蛋白
线粒体中的黄素蛋白属于黄酶中的一类,其辅基为FMN或FAD。FMN、FAD中含有核黄素(维生素B2),其异咯嗪结构环上第1位和第10位的两个氮原子能可逆地接受氢和脱去氢,因此在呼吸链中起传递氢的作用,是递氢体。FMN和FAD接受代谢物脱下的2H可还原为FMNH2和FADH2。其传递氢的过程如下:
线粒体中的黄素蛋白有两种:即黄素蛋白1(FP1)和黄素蛋白2(FP2)。FP1的辅基是FMN,催化NADH脱氢,故又称NADH脱氢酶;FP2的辅基是FAD,催化琥珀酸、脂酰辅酶A等代谢物脱氢。
(三)铁硫蛋白
铁硫蛋白(Fe-S)的特征是含有铁-硫中心,其分子中因含有非血红素的铁和对酸不稳定的硫而得名。在动物细胞的线粒体内膜上铁硫蛋白常与黄素蛋白、细胞色素b偶联成复合物,作为呼吸链的一个组成部分。铁硫蛋白中铁硫部分的结构如下:
铁硫蛋白中的铁原子可通过Fe3+和Fe2+的相互转变来传递电子,所以它在呼吸链中的主要功能是传递电子,是递电子体。
(四)辅酶Q
辅酶Q(coenzyme Q,CoQ)又叫泛醌,是一种脂溶性醌类化合物,广泛存在于自然界。CoQ分子中的苯醌结构能可逆地加氢和脱氢,起传递氢的作用,是递氢体。其作用机制如下:
(五)细胞色素
细胞色素(Cytochrome,Cyt)是以铁卟啉为辅基的色蛋白,均有特殊的吸收光谱。根据其吸收光谱的不同,呼吸链中的细胞色素分为三大类:即Cyta、Cytb、Cytc,每一类又因其最大吸收峰的微小差别分为几种亚类。其中Cyta、Cyta3、Cytb、Cytc、Cytc1作为呼吸链的组成成分,分布于线粒体的内膜上。
在呼吸链中,细胞色素辅基中的铁能可逆地进行氧化还原反应。即Fe3+可接受电子还原为Fe2+,Fe2+再失去电子氧化为Fe3+,因此细胞色素在呼吸链中可传递电子,是递电子体。
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