血清钙定量（滴定法）

【实验目的】

1．掌握EDTA滴定法测定血清钙的原理和方法。

2．了解血清钙测定的临床意义。

【实验原理】

在碱性溶液中，钙红呈蓝色，与钙结合生成络合物呈紫红色。但加入与钙结合力更强的EDTA时，则可与之夺取钙形成无色的EDTA钙盐，同时使钙红游离，则溶液颜色由紫红色变蓝。

血清加碱加指示剂钙红后，因钙红与血清钙结合，故溶液呈紫红色；然后用EDTA滴定，可用标准钙液滴定测知。本法较灵敏，须作空白滴定消除试剂本身之影响。

【实验器材】

烤箱；分析天平；吸量管；锥形瓶；血清。

【实验试剂】

1．1．25mol／L KOH液　使用新配者较好。

2．钙指示剂　0．1%钙红液，冰箱中保存可用1个月。用新配者效力更好。

3．EDTA液

（1）储存液：乙二胺四乙酸二钠盐（EDTANa2）450mg，用蒸馏水溶成100ml。

（2）应用液：储存液用蒸馏水稀释10倍。

4．10mg%钙标准液　称取分析纯的CaCO3先在110℃烘箱中干燥到恒重、约需12h，精确称量124．8mg，加水约20ml及0．5NHCl　3ml，徐徐加温到60℃使之溶解。冷却后加水成500ml混匀。

【实验方法】

1．空白滴定　水1．1ml加1．25NKOH　0．5ml，再加钙红液一滴混匀，立即用EDTA滴定恰到紫红色变蓝色为止。记下所用EDTA的ml数（B）。

2．标准滴定　钙标准液0．1ml，水1ml，加KOH以下等操作同上。记滴定毫升数（S）。

3．检品滴定　血清0．10ml，水1ml，其他操作同上。记滴定毫升数（U）。

4．计算

血清总钙mg%＝（U－B）×0．01／（S－B）×100／0．1＝（U－B）／（S－B）×10

血清总钙mEq／L＝血清总钙（mg%）×0．5

【注意事项】

1．钙红在强碱溶液中不稳定，故应在加碱、加指示剂后，立即进行滴定。时间过长则显著影响滴定终点的观察。

2．滴定所用刻度吸管应准确。最好用微量滴定法。滴定接近终末点时，要每次加半滴或更少量，并要及时切实摇匀。力求精确掌握终点、避免滴过。

3．应用新鲜血清，否则终点不明显。

4．本试验中要切实注意器材干净，配制试剂及试验中应用双蒸馏水或无离子水。

5．电解质浓度常用两种表示方法：mg／dl及mEq／L。换算关系如下：

mEq／L＝mg／dl×10÷当量＝（mg／dl×10×原子价）／原子量

mg／dl＝mEq／L÷10×当量＝（mEq／L×原子量）÷（10×原子价）

例如钙的换算：mEq／L＝mg／dl×10×2÷40＝mg／dl×0．5

mg／dl＝mEq／L×40÷10÷2＝mEq／L×2

【临床意义】

正常参考值：成人血清总钙浓度为9～11mg／dl或4．5～5．5mEq／L，小儿略高于成人为10～12mg／dl。

1．血钙降低　常见于钙及维生素D吸收不良、甲状旁腺功能减低。

2．血钙增高　见于甲状旁腺增生或肿瘤、服用多量维生素D等。

（石少慧）