生物制剂和疫苗的使用

一、生物制剂

生物制剂是指用微生物(细菌、病毒等)及其代谢产物、动物毒素、水生动物组织加工制成的产品，可用来预防、治疗和诊断特定的水生动物疾病。

生物制剂是一类商品渔药制剂。作为商品生物制剂，必须标明批准文号、注册商标、产品质量标准、生产厂家和出厂日期。同时应按药物规定列出主要成份、性状、作用与用途、用法与用量、注意事项、规格、有效期和休药期等内容和详细说明，以方便消费者正确使用。

目前我国生产的商品生物制剂主要有用于改良养殖环境的微生物制剂，诊断特定疾病的诊断试剂(诊断盒)，抗毒、抗菌、抗病毒的抗病血清，预防传染性疾病的疫(菌)苗（如草鱼出血病疫苗、嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗）等。

二、疫苗的使用方法

免疫预防是通过刺激鱼类免疫系统产生非特异性和特异性免疫来增强鱼体的抗病能力,从而降低由疾病引起的经济损失。由于鱼类是水生温变动物，免疫应答受许多因素的影响。在预防接种时，要考虑水温、季节和水域的生态环境，以及鱼的年龄和健康状况。生产中应用较多的有浸泡法、注射法和口服法3种接种方式。浸泡法一般就用于鱼苗免疫，经济价值较高，体形较大的鱼类，主要采用注射法，对大规模的鱼群免疫接种可采用口服法。

1.浸泡免疫

通过疫苗浸泡可使草鱼苗（种）产生抗体，增强苗种的免疫功能。特点是操作简单，适宜于生产过程中大批量鱼种的免疫，也可在鱼苗（种）运输过程中进行。

浸泡免疫法适宜不同规格的鱼苗（种），特别是1龄以内的小规格的鱼苗（种）。浸泡免疫时间，以每年秋末至次年初春，水温稳定在10～15℃时最为适宜。经免疫后的鱼苗（种）在12～18℃水温中连续饲养 20天以上（时间越长越好），可有效提高接种率。

2.注射免疫法

注射免疫就是通过人工对大规格鱼种注射疫苗，使鱼获得免疫力的过程。注射免疫法防病虽然操作繁琐、劳动强度大，但安全、可靠、效果好。采用注射免疫时，一般要求养殖动物体重50克/尾或体长10厘米/尾以上，过小不便操作。

注射采用普通医用或鱼用连续注射器。注射部位主要是胸鳍基部和背鳍基部。注射深度0.2～0.5 厘米为宜，原则上以疫苗注射入身体内而不伤及内脏为准。注射剂量根据鱼体大小而定，通常250克以下的鱼种注射0.2～0.3毫升/尾，250克以上的鱼种注射0.3～0.5毫升/尾。

三、常用疫苗和使用注意事项

1.草鱼出血病疫苗

草鱼出血病为病毒性疾病，疫苗是预防该病的有效方法之一。应用较多的主要有组织疫苗、细胞疫苗和弱毒活疫苗。

组织疫苗 采用具典型症状病鱼的肝、脾、肾和肌肉组织，经匀浆、离心、灭活后，制成的疫苗。4℃可保存半年以上。生产上采用肌肉或腹腔注射免疫草鱼，免疫保护率可达70%以上。

细胞疫苗 通过把病毒接种到细胞中，出现病变后收获病毒，再灭活而成的疫苗。适合实验室进行疫苗制备，培养成本较高，数量上不能满足生产需要。

弱毒活疫苗 利用草鱼细胞体外培养病毒后，经过减毒处理、冷冻干燥等一系列生产工艺制备。我国目前批准使用的弱毒疫苗主要为草鱼出血病弱毒疫苗，对预防草鱼呼肠孤病毒引起的草鱼出血病有良好的免疫效果。草鱼出血病弱毒疫苗较好地保留了病毒的免疫原性，注射免疫的有效率为85%，免疫期12个月。

2.嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗

主要针对淡水鱼类细菌性败血症而制备的灭活疫苗。制备工艺采用气升式发酵罐的大规模培养技术，并采用福尔马林灭活含有菌体和上清的全培养物。灭活疫苗的缺点是免疫时疫苗使用量较大，另外由于不同的气单胞菌血清型较多，因此仅能适用于象鱼类细菌性败血症这样流行株已较为明确的疾病，而对其它气单胞菌病很难产生交叉保护。

主要采用浸浴免疫的方式。在鱼种放养前1∶500稀释疫苗，浸浴60分钟；或1∶100稀释疫苗，浸浴5～10分钟。添加1%食盐和1～5毫克/升的山茛菪碱作为增效剂，可促进鱼类对疫苗的吸收效率。可获得对嗜水气单胞菌稳定的免疫力，免疫保护力达70%以上，其中188天的免疫保护力最高可达100%。采用间接血凝法可测出免疫鱼的抗体，是目前生产上应用最为普遍的疫苗之一。

3.传染性胰脏坏死病毒疫苗

传染性胰脏坏死病毒的疫苗研制是鱼类病毒中最为详尽的一种，已在欧洲获得生产许可，主要有病毒灭活疫苗和基因工程重组疫苗。基因工程重组疫苗主要用VP2基因，在大肠杆菌或酵母菌中表达，以100微克/尾腹腔注射免疫，8～14周可产生较好的ELISA抗体滴度，并产生较高的中和抗体，对传染性胰脏坏死病毒强毒株获得较好的免疫保护。

4.弧菌疫苗

弧菌疫苗是目前研制最成功的鱼用疫苗之一，商品性弧菌苗均为多价疫苗，近年来使用较为普遍。弧菌疫苗有鳗弧菌疫苗、杀鲑弧菌疫苗、鳗弧菌和海鱼弧菌二价疫苗、鳗弧菌和杀鲑弧菌二价疫苗、鳗弧菌+杀鲑弧菌+杀鲑气单胞菌三价疫苗，鳗弧菌+杀鲑弧菌+鲁氏耶尔森氏菌三价疫苗。

免疫方法采用注射、浸浴、喷雾与口服，均能取得较好的效果。效应期为10～15天，免疫期一般可达6个月以上。浸泡法一般10倍稀释疫苗，浸泡鱼体2分钟。或100倍稀释疫苗液，浸泡鱼体10分钟。

5.疫苗的使用注意事项

（1）免疫接种的对象是摄食活动正常、体质健康养殖动物。凡鱼体瘦弱、鱼池出现死鱼或有寄生虫、病毒或细菌感染的养殖动物，不能接种疫苗。

（2）注射疫苗前10天要彻底消毒杀菌，杀死鱼体及养殖水体病原菌。使免疫过的鱼种在新的环境中不再受新病原的感染，

（3）选择在晴天的清晨，气温最好在10～15℃进行免疫。需严格按照疫苗产品使用说明的适用对象、免疫施用途径、剂量和注意事项等要求操作。整个操作过程要轻、快、稳，尽量减少鱼体的损伤，免疫后需加强综合管理。

（4）选择高质量疫苗，核查疫苗的名称、批准文号、生产批号、出厂日期、保存期、使用方法、保管容器，询问运输方法等。保存方法是否在低温下保管。同时还要逐瓶检查瓶子有无破损、瓶盖是否松动、瓶内容物的性状是否有异常，瓶内容物颜色与标签上的说明是否一致等。若不符合上述要求，均不能用。