激素的测定方法及影响因素

健康人血液中激素的含量甚微,一般化学方法难以准确测定,临床多采用免疫分析法。1959年Yallow等建立了放射免疫分析(RIA),是激素等超微量物质测定的重大突破。1975年Kohler等创建了单克隆抗体技术,大大提高了免疫分析的灵敏度和特异性。随着免疫学测定技术的发展,比RIA更快的免疫分析法,如时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)、化学发光免疫分析(CLIA)和电化学发光免疫分析(ECLIA)相继诞生,能敏感、特异、快速、准确地测定血液中各种激素含量。免疫分析法避免了放射性污染,其标记物制备简易、有效期长,实现了自动化分析,已广泛用于激素、药物和特种蛋白的测定。

激素测定易受性别和年龄影响,某些项目还受采血时间、姿势、状态、食物和药物的影响。

1.采血时间 一般空腹采血,禁食相关药物3d后采血为宜。但生长激素及皮质醇激素等因日内波动范围较大,或动态观察疗效,最好固定采血时间。

2.采血体位 与血压有关的激素,如肾素、血管紧张素、醛固酮等,其浓度随立位、卧位的变化差异较大,应在静息状态下采取规定的体位。

3.食物及药物 高脂饮食易干扰免疫化学测定,且餐后胰岛素等激素水平也发生明显变化;抗精神、神经疾病药物可影响催乳素分泌,服用荧光性药物如维生素B12影响比色或荧光测定结果,应予以注意。

4.标本保存 某些激素,如促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、儿茶酚胺、肾素等,随标本存放时间的延长,易发生分解代谢而失活,应尽快分离血浆,及时测定。可于-20℃保存,避免反复冻融。肝素抗凝血对免疫分析有干扰,多采用EDTA抗凝。