【目的与要求】
（1）掌握疏松结缔组织的结构。
（2）了解致密结缔组织的结构。
（3）掌握人外周血涂片中红细胞及各类白细胞的形态结构及正常值。
（4）熟悉透明软骨和骨的微细结构。
（5）掌握各种血细胞的形态结构及正常值。
【教学重点】
（1）疏松结缔组织的结构。
（2）透明软骨的微细结构。
（3）各类血细胞的形态。
【教学难点】
（1）成纤维细胞和巨噬细胞的区别。
（2）掌握骨密质的结构特点，各种骨板和骨细胞的排列方式。
（3）嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的辨认。
【预习提要】
1．疏松结缔组织
（1）特点：①细胞少，但种类多；②细胞外基质多，纤维排列稀疏，；③无极性。
（2）组成：由七种细胞（成纤维细胞、巨噬细胞、浆细胞、肥大细胞、脂肪细胞、未分化的间充质细胞及白细胞）、三种纤维（胶原纤维、弹性纤维、网状纤维）和基质组成。
（3）分布：广泛分布于器官之间、组织之间以及细胞之间。
（4）功能：连接、防御、保护、营养和修复等功能。
2．致密结缔组织
细胞种类少，主要为成纤维细胞；基质少，纤维成分多，排列紧密，依据纤维排列规则与否分为规则致密结缔组织和不规则致密结缔组织；具有支持、连接和保护等功能。
3．软骨组织
软骨组织由软骨细胞和软骨基质构成，无血管，营养由软骨膜的血管供给。软骨由软骨组织和软骨膜构成，由依据软骨基质中所含纤维种类不同，软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨。
4．骨组织
骨组织是骨的主要结构，由细胞和钙化的细胞外基质构成；骨组织的细胞包括骨祖细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。长骨由骨松质、骨密质、骨膜等结构组成。
5．血液
（1）组成：由血浆和血细胞组成，血细胞分红细胞、白细胞和血小板。
（2）血细胞的正常值：红细胞 男性：（4．0～5．5）×1012/L（400万～550万/mm3），女性：（3．5～5．0）×1012/L（350万～500万/mm3）；白细胞（4～10）×109/L（4千～1万/mm3）；血小板（100～300）×109/L（10万～30万/mm3）。
（3）血细胞的形态结构及功能：①红细胞：呈双凹圆盘状，无细胞核和细胞器，胞质内充满血红蛋白。其主要功能是运输O2和CO2；②中性粒细胞：呈圆球形，直径10－12 μm，核杆状或分2－5叶。胞质含许多细小颗粒。主要功能是有很强的吞噬作用；③嗜酸性粒细胞：直径12－14μm，呈八字形分2叶，胞质充满粗大、分布均匀的嗜酸性颗粒。其主要功能是抑制变态（过敏）反应，杀灭寄生虫；④嗜碱性粒细胞：直径10－12μm，核分叶或S形。胞质内含有大、小不等，分布不均的嗜碱性颗粒。主要功能是参与变态反应；⑤单核细胞：直径14－20μm，核呈肾形、马蹄形或扭曲不规则形，着色较浅。具有强大的吞噬功能。⑥淋巴细胞：直径6～16μm，胞质少，强嗜碱性，核圆染色深。其主要功能是参与免疫应答；⑦血小板：呈双凸圆盘状结构，中央部（紫蓝色）为颗粒区；周边部（浅蓝色）为透明区。其主要功能是参与止血和凝血。
【实验内容】
（一）疏松结缔组织（铺片）
【取材】 兔皮下组织。
【染色】 HE方法染色（活体注射苔盼蓝入腹腔）
1．肉眼观察
标本形状不规则。由于标本的不同部位厚薄不匀，故颜色深浅不一。
2．低倍镜观察
将标本仔细浏览一遍，可见各处均有染成红色的纤维，吻合成网状。各种细胞在低倍镜下不易分辩，仅见大小不等，染色深浅不一的细胞核。间隙为基质所在部位。选择组织铺展薄的部位观察纤维成分，厚的部位观察细胞成分。
3．高倍镜观察
注意分辨两种纤维和两种细胞，见图3－1、图3－2。
（1）胶原纤维：数量多，染成粉红色，呈波浪状。
图3－1 高倍镜下疏松结缔组织铺片
（2）弹性纤维：数量少，细而有分支，染成亮红色。
（3）成纤维细胞：细胞体大有突起，细胞边缘不清楚，胞质弱嗜碱性，核较大呈卵圆形，染色浅。
（4）巨噬细胞：细胞呈圆形、卵圆形或不规则形，边界较清楚，胞质嗜酸性，内含大小不等的蓝色苔盼蓝颗粒和空泡。核较小、染色较深。
（5）基质：纤维和细胞之间充满基质（已溶解）。
（二）肥大细胞（示教）
【取材】 兔皮下组织铺片。
【染色】 乙醇硫堇法。
图3－2 高倍镜下结缔组织中的细胞
E嗜酸性粒细胞，F成纤维细胞，L淋巴细胞， M巨噬细胞，P浆细胞
高倍镜观察：细胞成群分布于小血管附近，呈圆形或卵圆形；核小，圆或卵圆形，居中，着色浅，胞质内充满了粗大的嗜碱性颗粒，呈紫蓝色。
（三）不规则的致密结缔组织
【取材】 人体的掌皮。
【染色】 HE方法染色。
1．肉眼观察
染成紫红色的为复层鳞状上皮，其深面着红色是致密结缔组织，为皮肤的真皮。
2．低倍镜观察
纤维被染成红色，排列紧密，细胞少，纤维与细胞之间的空隙也少。
3．高倍镜观察
大量的胶原纤维，粗而密，排列方向不一，故有横切、纵切和斜切等断面，其间弹性纤维不易区分。细胞少，散在于纤维之间，核染色深，胞质甚少，细胞类型难以分辨（图3－3）。
图3－3 高倍镜下真皮结构
L疏松结缔组织；D不规则致密结缔组织
（四）透明软骨
【取材】 人气管横切面。
【染色】 HE方法染色。
1．肉眼观察
标本为气管横切面，管壁内呈浅蓝色“C”形或半弧形结构是透明软骨。
2．低倍镜观察（从软骨周围向中间进行观察）
（1）软骨膜：包在软骨周围，为致密结缔组织（图3－4三角形所示）。
（2）软骨细胞：位于软骨陷窝内。边缘的细胞小，较幼稚，呈扁椭圆形，渐向中央逐步变大成熟，呈圆形或椭圆形，并常见2～4个软骨细胞成群分布，即同源群细胞。
（3）软骨间质：呈均质状，其间的胶原原纤维较细，且与基质折光率相同，故在切片中不易显示。基质染色视含硫酸软骨素的多少而异含量越多，嗜碱性越强，含量越少，染色越浅，甚至为嗜酸性。
3．高倍镜观察
将软骨中央部至高倍镜下观察，软骨细胞在生活状态下充满于陷窝内，切片中软骨细胞常因固定后收缩，其周围显一透亮间隙（图3－4箭头所示）。陷窝周围的基质染色较深，呈强嗜碱性，称软骨囊。被包埋在基质中的胶原纤维细而少，折光率与基质相同，故纤维成分分辨不出来。
图3－4 人气管横切面结构图
↑ 陷窝；△ 软骨膜
（五）骨磨片
【取材】 兔长骨。
【染色】 硫堇染色。
1．肉眼观察
标本为淡黄色四方形小块。
2．低倍镜观察
（1）外环骨板：位于骨干表面，为数层或十数层排列整齐的骨板（有的磨片没有）。
（2）内环骨板：位于骨髓腔面．为数层与骨髓腔面平行排列不完整的骨板（图3－5白色三角形所示）。
（3）骨单位（Osteon）：位于内外环骨板之间，由中央管（哈佛氏管，图3－5箭头所示）和同心圆排列的哈佛氏骨板组成，在中央管之间的横行管道即为穿通管（福克曼氏管）。
（4）间骨板：在哈佛氏系统之间，可以看到一些排列不规则的骨板即间骨板，由骨单位被吸收后残留的骨板构成（图3－6星号所示）。
图3－5 长骨干横切面
↑中央管，▲穿通管，△内环骨板
图3－6 骨单位
↑中央管，★间骨板
3．高倍镜观察
在图3－7所示骨板之间，可见黑色小点（磨片留下的沉渣）即骨陷窝，为骨细胞所在位置，从骨陷窝发出许多放射状微细突起（黑色细线状），即骨小管，为骨细胞突起所在部位，相邻骨陷窝之间骨小管彼此相互连通。
图3－7 高倍镜下骨单位横切面结构图
（六）血涂片的观察
【取材】 人类外周血液涂片。
【染色】 Giemsa或Wright染色。
1．肉眼观察
标本的血涂片呈一很薄的“血膜”，一端平直（后端），另一端呈圆弧形（前端）故整体呈舌形。将血膜面朝上置于低倍镜下观察。
2．低倍镜观察
移动玻片，找到涂片较薄处观察，可见大量圆形的血细胞，红细胞数量最多，布满整个视野，分散或成串分布，染成浅红色；染成紫蓝色小点为白细胞的细胞胞核，白细胞数量较少。选择血膜较薄、细胞分布均匀且白细胞相对较多处，转换高倍镜进一步观察。
3．高倍镜观察
通过图3－8，图3－9所示，经微调节器确认低倍镜下看到的细胞（以白细胞为佳），以保证血涂片的血膜面朝上。仔细观察各类血细胞在高倍镜下的形态特点。
（1）红细胞：细胞小而圆，无核，胞质由于含有血红蛋白而呈嗜酸性（橘红色，图3－8），细胞中央着色较浅是因为红细胞为双面凹的圆盘形，中央部较薄之故（注意红细胞有叠链现象）。
（2）中性粒细胞：细胞圆形或卵圆形，比红细胞大，胞质呈淡红色，其中可见淡紫红色的细小颗粒。细胞核形态多样，核分2－5叶不等，不分叶的核称杆状核（核分叶多少能说明什么？）
（3）嗜酸性粒细胞：数量较少，较中性粒细胞大，胞质内充满粗大、分布均匀的鲜红或橘红色颗粒。核形态较饱满，以2～3叶多见，染成蓝色。
图3－8 人类外周血涂片图像
（Wright染色）
（4）嗜碱性粒细胞：数量少不易找到，细胞大小与中性粒细胞相近。胞质内可见分布不均、形态不规则、大小不等的蓝色颗粒。核分叶呈“S”形或不规则形，着色浅。
（5）淋巴细胞：胞体大小不等，以小淋巴细胞为多，其直径与红细胞相似。核呈圆形，染成深蓝色。胞质少，呈一窄带围绕核，染成蔚蓝色，有时含少量紫红色的嗜天青颗粒。
（6）单核细胞：体积大，圆或卵圆形；核呈肾形、马蹄铁形或不规则形，染色质颗粒细而松散，故染色较浅；胞质较多，染成灰蓝色，内含较多细小的嗜天青颗粒。
（7）血小板：体积最小，成群分布于血细胞之间，呈不规则形，中央含紫色颗粒。
图3－9 五种白细胞的形态结构比较
（Wright染色）
【实验报告】
绘出疏松结缔组织和各种血细胞的形态结构图。
【思考题】
（1）与上皮组织比较，疏松结缔组织有哪些共同结构特点？
（2）光镜下分辨疏松结缔组织和致密结缔组织的主要区别点是什么？
（3）试述透明软骨的组织结构，为什么在此片中看不到纤维？
（4）血液有形成分包括哪些？
（5）试述各类血细胞的数量、大小、形态结构及功能。
作业栏
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