慢性乙肝病毒携带者肝脏病理与病毒学指标的相关性分析

慢性乙肝病毒携带者肝脏病理与病毒学指标的相关性分析_提升创新能力加

慢性乙肝病毒携带者肝脏病理与病毒学指标的相关性分析

刘大凤　王　林　刘亚玲　陈　红　高　峰　张　鸿　黄　勃

（成都市传染病医院，四川，成都，610000）

目的：分析慢性乙肝病毒携带者肝组织病理与年龄、病程、血清学及肝脏免疫组化指标的相关性，以确定孰是对病理进程影响最主要的指标。

方法：对134例临床诊断的慢性乙肝病毒携带者进行乙肝血清学标志物、肝功能、肝活组织病理及免疫组化的检查。

结果：①HBeAg阴性、阳性两组和HBV-DNA≥10⁵亚组分析均显示：病理表现为不典型增生者HBeAg阴性组少于HBeAg阳性组，病理表现为慢性肝炎者HBeAg阴性组多于HBeAg阳性组，差异均有显著性，而HBV-DNA＜10⁵亚组分析两组病理表现无统计学差异；病理表现为不典型增生及慢性肝炎者年龄18～40岁组及年龄大于40岁组明显多于年龄小于18岁，差异均有显著性；病理表现为不典型增生及慢性肝炎者免疫组化双阳性组均多于单阳性组及全阴性组，但无统计学差异。②在炎症及纤维化早期（G_0-1和S_0-1），HBeAg阳性组多于HBeAg阴性组，HBV-DNA≥10⁵组多于HBV-DNA＜10⁵组；而在炎症及纤维化明显期（G₂、G_3-4和S₂ 、S_3-4），结果却相反，但无统计学差异。③年龄、病程及乙肝病毒血清学指标与肝脏炎症及纤维化级别的相关性分析表明，肝脏炎症及纤维化级别与患者年龄、病程及乙肝病毒血清学指标有一定的相关性；当分别校正了年龄和病程后，仅纤维化级别分别与抗-HBs和年龄呈正相关；当同时校正了年龄和病程后，肝脏炎症及纤维化级别与病毒血清学指标的相关性均消失。④分别以年龄、病程及乙肝病毒各血清学指标为自变量，以肝脏炎症及纤维化级别为因变量进行的多元逐步回归分析表明，年龄、病程、表面抗原、E抗原、表面抗体和E抗体均是影响肝脏炎症和纤维化级别的重要因素，而HBV-DNA似乎对肝脏炎症活动度及纤维化程度无明显影响。

结论：①血清HBeAg阳性与否及HBV-DNA滴度高低对肝脏病理进程以及炎症活动度、纤维化级别本身无明显影响；但年龄却对肝脏病理进程有影响，年龄为18～40岁及年龄大于40岁者肝脏病理改变较年龄小于18岁者更明显。②乙肝病毒对肝脏炎症活动度和纤维化的影响尚取决于患者年龄和病程。③年龄、病程、表面抗原、E抗原、表面抗体和E抗体均是影响肝脏炎症和纤维化级别的重要因素，而HBV-DNA似乎对肝脏炎症活动度及纤维化程度无明显影响。

我国有1.2亿左右慢性乙肝病毒携带者（chronic HBV carrier），其中每年约有0.25％～0.4％的慢性乙肝病毒携带者会转变成乙型肝炎，部分隐匿进展甚至转变成肝硬化、肝细胞癌^[1]。以往认为乙肝病毒本身在慢性肝炎病理进程中起了非常重要的作用。国内学者及我们之前的研究表明，E抗原阳性与否、HBV-DNA滴度高低以及肝组织免疫组化似乎对慢性乙肝患者肝脏病理无明显影响。慢性乙肝病毒携带者是慢性乙肝患者中的特殊人群，它的肝脏病理进程与血清及肝组织中病毒水平有无相关性？基于此，作者对四川地区134例慢性乙肝病毒携带者进行了肝穿病理检查、血清学指标和肝脏免疫组化的检测，并对肝脏病理与乙肝病毒各指标的关系进行分析，现将结果报道如下。

一、对象与方法

1．一般资料

134例慢性乙肝病毒携带者为成都市传染病医院2006年1月至2008年5月门诊或住院患者，男108例，女26例，年龄15～54岁，平均28.67±9.84岁。发现乙肝病毒阳性年限0.1～20.5年，平均7.02±5.62年。慢性乙肝病毒携带者诊断标准符合2005年中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的诊断标准。

2．乙肝血清学指标及HBV-DNA的检测

乙肝病毒血清学检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），按试剂盒说明书操作；HBV-DNA定量测定采用全自动荧光定量PCR检测仪测定，试剂盒为广州达安基因股份有限公司提供的荧光定量PCR试剂。

3．病理组织检查

肝活检采用1秒钟快速穿刺活检术，穿刺包含3个以上完整汇管区肝组织。病理标本用4％甲醛溶液固定，酒精脱水，石蜡包埋，常规组织切片，HE和网织纤维染色，光学显微镜多视野观察，按病理标准分级（G）和分期（S），病理诊断标准参照文献，病理分型：正常（G_0-1S₀）；不典型改变（G₁S₀）；慢性肝炎（G_1-4S_1-3）；肝硬化（G_3-4S₄）。同时全部病例标本肝组织作HBsAg 、HBcAg免疫组织化学检测。

4．统计学方法

使用SPSS 12.0软件对研究对象资料进行统计分析。计量资料用均值±标准差表示。组间的比较采用Χ2检验，两因素相关分析采用Pearson相关分析及偏相关分析法，多因素分析采用多元逐步回归法。P<0.05被认为具有统计学意义。

二、结果

1．病人的一般资料

病人的一般资料，如表1所示。

表1　134例病人的一般资料

2．肝脏病理

134例慢性乙肝病毒携带者肝组织病理分型，如表2所示。

表2　134例慢性乙肝病毒携带者肝组织病理分型

3．乙肝病毒指标与肝脏病理分型

（1）乙肝病毒血清学指标与肝脏病理分型

乙肝病毒血清学指标与肝脏病理分型结果，如表3、表4所示。可看出，病理表现为不典型增生者小三阳组少于大三阳组，病理表现为慢性肝炎者小三阳组多于大三阳组，差异有显著性； HBV-DNA≥10⁵亚组分析仍是病理表现为不典型增生者小三阳组少于大三阳组，病理表现为慢性肝炎者小三阳组多于大三阳组，差异有显著性；而HBV-DNA＜10⁵亚组分析无论是病理表现为不典型增生者还是病理表现为慢性肝炎者，小三阳组与大三阳组间均无显著性差异。

表3　血清HBeAg阳性组与HBeAg阴性组及HBV-DNA亚组肝脏病理分型比较（n=96）

两组本身及HBV-DNA≥10⁵亚组不典型改变和慢性肝炎比较，P＜0.05。

（2）肝组织免疫组化与肝脏病理分型

134例慢性乙肝病毒携带者中有117例行肝组织免疫组化HBsAg与HBcAg检测，结果表明，如表4所示，无论是病理表现为不典型改变，还是表现为慢性肝炎者，在免疫组化双阳性组（HBsAg⁺、HBcAg⁺）均多于单阳性组（HBsAg⁺、HBcAg^-）及全阴性组（HBsAg^-、HBcAg^-），但无统计学差异。

表4　117例慢性乙肝病毒携带者肝组织免疫组化HBsAg与HBcAg检测与病理分型

两组不典型改变和慢性肝炎比较，P＞0.05。

4．年龄与病理分型

不同年龄组肝脏病理类型比较，如表5所示。

表5　不同年龄组肝脏病理类型比较

后两组与第一组不典型改变和慢性肝炎比较，P＜0.005；后两组之间比较，P＞0.05。

5．乙肝病毒血清学指标与肝脏炎症及纤维化级别

乙肝病毒血清学指标、肝脏免疫组化指标与肝脏炎症及纤维化级别结果，如表6、表7、表8所示。

表6　HBeAg+组与HBeAg-组肝组织炎症分级及纤维化分期比较（例数％）

两组G_0-1与G₂、S_0-1与S₂、S₂与S_3-4比较，P＞0.05；G_0-1与G_3-4、G₂与G_3-4、S_0-1与S_3-4比较，P＜0.05。

表7　血清HBV-DNA≥105组与HBV-DNA＜105组肝组织炎症分级及纤维化分期比较（n=96）

两组炎症活动度及纤维化程度比较，P＞0.05。

表8　肝组织HBsAg+ + HBcAg+组、HBsAg++HBcAg-与HBsAg-+HBcAg-组肝组织炎症分级及纤维化分期比较（n=117）

两组炎症活动度及纤维化程度比较，P＞0.05。

6．肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的相关性分析

（1）肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的Pearson相关分析

肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的关系的Pearson相关分析结果，如表9所示。可以看出，肝脏炎症及纤维级别均与年龄呈正相关；炎症级别尚与病程呈正相关，与HBeAg呈负相关；纤维级别尚与HBsAg及Anti-HBs呈正相关，与HBVDNA呈负相关。

表9　肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的关系

（2）肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的偏相关分析

当校正了年龄后，偏相关分析结果表明，肝脏炎症级别与病程及HBsAg的相关性以及纤维化级别与HBsAg及HBV-DNA的相关性均消失，仅纤维化级别与Anti-HBs仍呈正相关（r=0.462，P=0.005）。

当校正了病程后，偏相关分析结果表明，肝脏炎症级别与年龄及HBsAg的相关性以及纤维化级别与HBsAg、HBV-DNA及Anti-HBs的相关性均消失，但纤维化级别仍与年龄呈正相关（r=0.396，P=0.030）。

当校正了年龄和病程后，偏相关分析结果表明，肝脏炎症级别及纤维化级别与血清病毒学指标的相关性均消失。

（3）肝脏炎症及纤维级别与病程、年龄及乙肝血清学指标的多元逐步回归分析

分别以肝脏炎症级别和纤维化级别为因变量，以各血清病毒学指标为自变量进行多元逐步回归分析，如表10所示。结果表明，病程、年龄、表面抗原、E抗原、表面抗体及E抗体均是肝脏炎症级别和纤维化级别的重要影响因素。

表10　肝脏炎症及纤维化级别与血清病毒学指标的多元逐步回归分析

三、讨论

本组资料显示，病理表现为不典型增生者HBeAg阴性组少于HBeAg阳性组（9.09％ VS 19.48％，P＜0.05），而病理表现为慢性肝炎者HBeAg阴性组多于HBeAg阳性组（40.26％ VS 18.18％, P＜0.05），HBV-DNA≥10⁵亚组分析结果亦然，HBV-DNA＜10⁵亚组分析显示两组间病理改变无差异，与以往报道基本一致^[2]。

病理表现为不典型增生及慢性肝炎者在年龄为18～40岁组多于年龄小于18岁组（分别是16.42％ VS 7.46％，44.03％ VS 2.24％，P＜0.005），病理表现为慢性肝炎者年龄大于40岁组明显多于年龄小于18岁组（14.92％ VS 2.24％，P＜0.005），表明年龄对肝脏病理进程有影响，年龄为18～40岁者和年龄大于40岁者肝脏病理改变较年龄小于18岁者更明显，与以往报道有所不同^[3]。

本组资料中有117例进行了肝组织免疫组化HBsAg与HBcAg检测，结果表明，无论是病理表现为不典型改变，还是表现为慢性肝炎者，在免疫组化双阳性组（HBsAg⁺、HBcAg⁺）均多于单阳性组（HBsAg⁺、HBcAg⁻）及全阴性组（HBsAg⁻、HBcAg⁻），但无统计学差异。说明肝组织免疫组化指标可能对肝脏病理进程有一定影响，与以往报道基本一致^[4]。

乙肝病毒血清学指标与肝脏炎症及纤维化级别的分析结果表明，在炎症及纤维化早期（G_0-1和S_0-1），HBeAg阳性组多于HBeAg阴性组（分别是54.17％ VS 32.56％，72.92％ VS 46.51％，P＜0.01）；而在炎症及纤维化明显期（G₂、G_3-4和S₂ 、S_3-4），HBeAg阳性组却少于HBeAg阴性组（分别是37.50％ VS 38.37％，8.33％ VS 29.07％，18.17％ VS 23.26％，8.33％ VS 30.23％，P＜0.01），有统计学差异；同样，在炎症及纤维化早期（G_0-1和S_0-1），HBV-DNA≥10⁵组多于HBV-DNA＜10⁵组（分别是46.77％ VS 35.29％，67.74％ VS 47.06％，P＞0.05）；而在炎症及纤维化明显期（G₂、G_3-4和S₂ 、S_3-4），HBV-DNA≥10⁵组却少于HBV-DNA＜10⁵组（分别是37.10％ VS 44.12％，16.13％ VS 20.59％，16.13％ VS 32.35％，16.13％ VS 20.59％，P＞0.05），但无统计学差异，说明血清HBeAg阳性与否及HBV-DNA滴度高低似乎对肝脏炎症活动度及纤维化级别无明显影响。

年龄、病程及乙肝病毒血清学指标与肝脏炎症及纤维化级别的相关性分析表明，肝脏炎症及纤维化级别与患者年龄、病程及乙肝病毒血清学指标有一定的相关性；当分别校正了年龄和病程后，仅纤维化级别分别与表面抗体和年龄呈正相关；当同时校正了年龄和病程后，肝脏炎症及纤维化级别与病毒血清学指标的相关性均消失。说明乙肝病毒对肝脏炎症活动度和纤维化的影响尚取决于患者年龄和病程。

分别以年龄、病程及乙肝病毒各血清学指标为自变量，以肝脏炎症及纤维化级别为因变量进行的多元逐步回归分析表明，年龄、病程、表面抗原、E抗原、表面抗体和E抗体均是影响肝脏炎症和纤维化级别的重要因素，而HBV-DNA似乎对肝脏炎症活动度及纤维化程度无明显影响。

由上可见，无论是年龄与肝脏病理类型的分析结果，还是年龄与肝脏炎症及纤维化级别的相关性分析结果，均表明年龄在其中起重要作用；而乙肝病毒载量及血清学指标似乎对肝脏炎症活动度和纤维化进程无明显影响；可能与乙肝病毒基因型有关^[5]。但是我们知道，胰岛素抵抗的程度随着年龄的增加而增加，由此设想，胰岛素抵抗及代谢参数可能在乙肝患者肝脏炎症活动度及纤维化进程中起了一定的作用。当然这还需要我们今后的研究加以证实。

【注释】

[1] 刘金定. 拉米夫定、博尔泰立及左旋咪唑治疗慢性乙肝病毒携带者的临床观察. 临床医药实践杂志，2003（12）.

[2] 王敏，乐晓华，王辉等. HBVDNA定量与HBVM及病理关系的探讨. 临床医学，2004，24（4）.

[3] 中华医学会肝病学分会、感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南. 中华肝脏病杂志，2005，13.

[4] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案. 中华肝脏病杂志，2000，8（6）.

[5] 钟崇芳，郝娃，李卓等. 乙肝病毒基因型与肝脏病理改变的关系. 世界华人消化杂志，2007；15（16）.