排卵控制技术

图2.2.3　精液的分类标记

(4)精液的降温与平衡

降温是指精液稀释后由30℃以上的温度,经1～2h缓慢降至5～0℃,以防止低温打击。平衡是指降温后,继续在0～5℃的环境中停留2～4h。使甘油充分深入精子内部,起到抗冻作用。在生产中降温和平衡可同时进行。将分装好的细管码排在细管盘中,直接放入0～5℃环境中停留4h左右。

(5)精液的冷冻

目前在冷冻精液生产单位多使用全自动冷冻机进行精液的冷冻。使用时首先在电脑中设计好冷冻的最佳温度曲线,冷冻仪与低温柜应尽量靠近,开启液氮灌阀门把冷冻仪降温至4℃,关闭风扇电源,待风扇完全停止后把已排满待冻细管的架子迅速放入冷冻仪,盖严盖子按预先设定好的程序自动完成冷冻过程。

(6)冷冻精液的剂型

目前羊的冷冻精液以细管型为主。

(7)冷冻精液的解冻

冷冻精液的解冻是验证精液冷冻效果的一个必要环节,也是输精前检查冷冻精液是否达到输精要求的一项必要工作。在生产中羊冷冻精液一般用38～40℃温水解冻效果最好。

五、新鲜精液的运输

用内径0.3cm、长20cm的灭菌软塑料管作为运输精液的细管,每管装稀释精液0.4～ 0.5mL,在酒精灯上将细管两端加热,待管端融化时,用镊子夹一下,将两端密封。运输距离为1～2h,可用干净的毛巾或软纸将精液细管包起来,装在运输人衣袋内带走。输精时,将精液细管一端的封口剪开,沿阴道上壁插入母羊阴道底部,再将另一端剪开,精液就会流入发情母羊的阴道内,保持1～2min后放开母羊。应注意的是,不能沿母羊阴道下壁插入,否则有可能将细管插入尿道。运输距离为4～6h或6h以上时,须将装有精液的细管放入装有凉水和冰块的保温瓶中运输,到达目的地后,从保温瓶中取出细管,使温度回升至40℃,进行输精,从而避免精子遭受冷应激而死亡。

新鲜精液运输时应注意以下事宜:盛装精液的器具要安放稳妥,做到避光、防湿、防震、防撞;运输途中,必须保证保存精液的温度恒定,切忌温度变化;运输精液时应附有精液运输单,其内容主要包括发放的站名、公羊品种和编号、采精日期、精液剂量、稀释液种类、稀释倍数、精子活率和精子密度等。

六、冷冻精液的保存和运输

1.保存

冷冻精液保存在液氮中。对于抽检合格的冷冻精液,在做好标记后,应按品种不同进行分类保存。在精液的保存过程中,应定期检查液氮的消耗情况,并定期补充液氮,以免精液升温造成大的损失。

(1)保存方法

液氮保存法是目前冷冻精液常用的保存方法,液氮的温度为-196℃,与精子的危险温区温差大,冷冻及贮存精液安全可靠。另外,液氮为液态,可使液氮容器中的温度恒定,也可使冷冻精液完全浸没在液氮中。在液氮中保存的精液,其活率下降极为缓慢。

(2)冷冻精液保存室的管理

由于液氮有挥发性,如果冷冻精液保存室通风不良,可使室内的氧气由21%下降至16%以下。环境温度升高会增加液氮挥发量,因此冷冻精液保存室一般不应安装取暖设备。总之,冷冻精液保存室应清爽、干燥、通风、安全。

2.保存容器

冷冻精液一般用液氮罐保存,如图2.2.4所示。目前专门用于保存冷冻精液用的液氮罐型号很多,但其基本结构相同。液氮罐是比较精密的容器,它主要靠保持真空和减少导热来维持超低温冷藏功能。液氮罐分为贮存罐和运输罐,检查液氮罐是否完好无损最简单方法是触摸盛有液氮的容器盖,感觉其温度是否低于室温,是否有水蒸气或霜生成。若温度与室温接近,说明质量良好;若低于室温或出现凝结水蒸气,则质量下降;若出现结霜,则说明该容器已损坏,必须立即更换,以免导致液氮快速蒸发,使储存的精液报废。