【摘要】：它们都是脂肪代谢的中间产物,当大量脂肪分解而导致这些物质氧化不全时,可使血中浓度增高而由尿排出,称为酮尿。根据颜色产生的时间,可作粗定量判断:立即出现深紫红色环(+++)、逐渐出现紫红色环(++)、10min内出现淡紫色环(+)、10min后不显色(-)。5min后仍不显色者为阴性。根据显色快慢与色泽深浅亦可用号表示。
一、内容
羊酮尿病的检验。
二、资源
盆、酮尿、pH试纸、石蕊试纸、冰醋酸、亚硝基铁氰化钠、浓氨水(28%)。
三、方法及操作步骤
1.尿的物理性质检查
盛被检尿于容器中,用手扇气嗅闻。羊患酮尿病时,尿呈丙酸酮臭味。
2.尿中酮体的检验
酮体是β-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酸的总称。它们都是脂肪代谢的中间产物,当大量脂肪分解而导致这些物质氧化不全时,可使血中浓度增高而由尿排出,称为酮尿。
(1)郎(Lange)氏法
①原理:丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠作用后,再与氨液接触可产生紫红色化合物。冰醋酸可抑制肌酐产生类似的反应,又叫接触环法。
②试剂:亚硝基铁氰化钠、冰醋酸、浓氨水(28%)。
③方法:取被检尿约2mL于小试管内,加入亚硝基铁氰化钠结晶数小粒,振荡使其溶解,再加冰醋酸0.2mL(3～4滴),混匀后,将试管倾斜,沿管壁缓缓加入浓氨水0.5～1mL,在两液交界处呈现紫红色环即为阳性。根据颜色产生的时间,可作粗定量判断:立即出现深紫红色环(+++)、逐渐出现紫红色环(++)、10min内出现淡紫色环(+)、10min后不显色(-)。
(2)改良罗特拉(Rothera)氏法
①原理:丙酮和乙酰乙酸在一定的pH环境中,与亚硝基铁氰化钠及硫酸铵作用,形成紫色化合物。
②试剂:亚硝基铁氰化钠0.5g、无水碳酸钠、10g、硫酸铵、20g。
将上述3种药物研磨均匀(不宜太细),贮于棕色瓶中备用。若放置过久变黄,说明失效。
③方法:取粉剂约0.1g于载玻片上或反应盘内,加新鲜尿2～3滴使粉剂完全被尿液浸透。
④结果判定:粉剂呈紫红色为阳性反应。5min后仍不显色者为阴性。根据显色快慢与色泽深浅亦可用(+→+++)号表示。
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