②微量元素母液的配制：可配成浓度100倍母液。用感量0．0001g分析天平按表6．2准确称取药品后，分别溶解，混合后加水定容至1000mL。
③铁盐母液的配制：可配成100倍的母液。按表6．2称取药品，可加热溶解，混合后加水定容至1000mL。
④有机物母液的配制：可配成50倍的母液。按表6．2分别称取药品，溶解，混合后加水定容至500mL。
⑤激素母液的配制：每种激素必须单独配成母液，浓度一般配成1mg/mL，用时根据需要取用。因为激素母液用量较少，一次可配成50mL或100mL。另外，多数激素难溶于水，要先溶于可溶物质，然后才能加水定容。可采取以下方法配制：
a．将NAA，IAA，IBA称取量，先溶于少量的95%的酒精中，再加水定容至一定浓度。
b．将6唱BA，KT，ZT称取量，先溶于少量1mol/L的HCL中，再加水定容。
c．2，4唱D可用少量1mol/LNaOH溶解后，再加水定容到一定浓度。
配制好的母液瓶上应分别贴上标签，注明母液名称、配制倍数、日期及配1L培养基时应取的量。将各母液瓶放入普通冰箱内临时保存，或置于低温（1～5℃）冰箱内长期保存备用。
（3）培养基的配制 配制1L培养基，按表6．2用量筒移取大量元素母液100mL，用专一对应的移液管分别吸取微量元素母液10mL、铁盐母液10mL、有机物母液10mL，按配方移取一定浓度的激素母液形成药剂混合液。将不锈钢锅加入一定量水，加入琼脂7g加热溶解，边加热边搅拌，防止糊底，旺火煮开，再用文火加热，直至琼脂全部融化。加入30g蔗糖溶解后，加入药剂混合液，再加蒸馏水定容至刻度。立即用0．1mol/L的NaOH或HCl调节pH值，然后分装于容器中。
（4）培养基的分装与灭菌 配制的培养基要趁热分装，100mL的容器装入30～40mL培养基，即1L培养基分装35瓶左右。分装时不要把培养基弄到瓶壁上，以免落菌污染。装后封口准备灭菌。灭菌时打开锅盖，加水至水位线，把已装好培养基的三角瓶，连同蒸馏水及接种用具等放入高压灭菌锅内。放入时不要过分倾斜培养基，以免弄到瓶口上或流出。然后盖上锅盖，对角旋紧螺丝，接通电源加热。当温度上升至121℃时，维持20min。
（5）培养基保存
培养基从高压灭菌锅中取出后，应立即平放在平整的桌面或斜面架上，直至培养基冷却凝固后再将它们转移。已经配制好的培养基最好经过3天的预培养，防止灭菌不彻底的培养基在接种后被菌类污染而造成不必要的损失。
①防尘：对于中小规模的生产者来说，通常将培养基存放于普通的房间里。此时要特别注意防尘工作，且在使用前要进行表面消毒。
②避光：备用的培养基应贮藏于暗处，特别是在培养基中含有易于光解的吲哚乙酸等物质时更要注意。此外，在光照条件下，培养基的某些添加成分如椰乳会发生变化，不能达到预期的培养效果。
③恒温：当培养基冷却后，可于4℃左右的温度条件下贮藏3～6周。在贮藏过程中应避免环境温度大幅度的变化。因气温骤升或骤降会使培养容器内的空气随之热胀冷缩，加大菌类进入培养基的机会。
④定期更新：由于培养基的水分散失、某些培养基成分光解变质的必然性，即使所贮存的培养基从外观上看不出什么变化，也必须定期更新，不宜长期贮藏。
6．1．4 植物组织培养操作过程
1）外植体获取与消毒
（1）外植体的获取 从田间采回的准备接种用的材料，称为外植体。对外植体进行表面消毒，获得无菌材料，是组织培养成功的重要环节。
组织培养所选用的外植体，可为植物的茎尖、侧芽、叶片、叶柄、花瓣、花萼、胚轴、鳞茎、根茎、花粉粒、花药等器官。以快繁为主要目的时，大多采用茎尖、侧芽等。一般情况下，生长期较幼嫩的材料茎尖、嫩叶、花蕾等部位更容易分化，培养效果较好。到田间取材时，一般应准备塑料袋、锋利的刀剪、标签、笔等。取材时间应选在晴天上午10：00左右，阴雨天不宜。同时应尽量选择离开地表、老嫩适中的材料，要从健壮无病的植株上选取外植体。
从田间植株上采取的外植体比从温室植株上采到的外植体更易受感染。如果我们必须从田间植株上采取外植体，最好先把这个植株种在室内的容器内，让其在室内发育新的嫩芽，然后用新发育成的嫩芽进行培养。在室内种植时，采用无土栽培，基质灌溉，保持36～38℃的温度条件下生长几天或几个月，在这种条件下长出来的新梢不易造成污染。
（2）外植体的消毒 外植体在进行表面消毒前需先预处理。对于从温室中采集的外植体，可置于烧杯中，放在水龙头下，用流动的自来水冲洗20～60min（大田中采集的外植体要冲洗2 h以上），而后再用无菌水漂洗1～3次。不同外植体的处理方法不同，经预处理的外植体一般按表6．3的顺序进行消毒。
表6．3 植物不同外植体的消毒程序
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