微生物的培养特征

时间：2023-03-08 理论教育版权反馈

【摘要】：不同的微生物有其固有的培养特征，这些特征一般用固体、半固体和液体培养基来进行检测。微生物培养特征还包括菌苔的颜色、表面光滑程度、基质是否产生水溶性色素等。培养特征可以作为微生物分类鉴定的指征之一，并能为识别纯培养是否被污染作为参考。检测微生物的培养特征时，接种和培养过程中必须保证不被其他微生物所污染，因此，除工作环境要求尽可能地避免或减少杂菌污染外，熟练地掌握各种无菌操作接种技术是很重要的。

实验四　微生物的培养特征

一、目的要求

1.了解不同的微生物在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征。

2.进一步熟练掌握微生物无菌操作技术。

二、基本原理

微生物的培养特征是指微生物在固体培养基上、半固体和液体培养基中生长后所表现出的群体形态特征。不同的微生物有其固有的培养特征，这些特征一般用固体、半固体和液体培养基来进行检测。固体培养基又分平板与斜面两种形式。在平板上主要观察菌落表面结构、形态及边缘等状况；它们培养在斜面培养基上，可以呈丝线状、刺毛状、念珠状、舒展状、树枝状或假根状；生长在液体培养基内，可以呈混浊、絮状、黏液状，形成菌膜，上层清晰而底部显沉淀状；穿刺培养在半固体培养基中，可以沿接种线向四周蔓延或仅沿线生长；也可上层生长很好，甚至连成一片，底部很少生长或底部长得好，上层甚至不生长。微生物培养特征还包括菌苔的颜色、表面光滑程度、基质是否产生水溶性色素等。培养特征可以作为微生物分类鉴定的指征之一，并能为识别纯培养是否被污染作为参考。检测微生物的培养特征时，接种和培养过程中必须保证不被其他微生物所污染，因此，除工作环境要求尽可能地避免或减少杂菌污染外，熟练地掌握各种无菌操作接种技术是很重要的。本实验采用斜面、半固体和液体培养基检测不同微生物的培养特征，如图2-2、图2-3所示。

图2-2　液体培养特征

图2-3　各种微生物的菌落特征

三、器材

1.菌种:枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球，白地霉（Geotrichum candidum），蕈状芽孢杆菌（Bacillus mycoides），黏质沙雷氏菌（Serratia marcescens）。

2.培养基:牛肉膏蛋白胨培养基（斜面、液体、半固体）。

3.仪器或其他用具:接种环，接种针，无菌吸管，酒精灯等（图2-4）。

图2-4　常用的接种工具

四、操作步骤

1.斜面接种

（1）在牛肉膏蛋白胨斜面试管上，用记号笔标明待接种的菌种名称、株号、日期和接种者。

（2）点燃酒精灯或煤气灯。

（3）将菌种试管和待接种的斜面试管，用大拇指和食指、中指、无名指握在左手中，试管底部放在手掌内并将中指夹在两试管之间，使斜面向上呈水平状态，在火焰边用右手松动试管塞以利于接种时拔出。

（4）右手拿接种环通过火焰烧灼灭菌，在火焰边用右手的手掌边缘和小指，小指和无名指分别夹持试管帽将其取出，并迅速烧灼管口。取试管帽时要缓慢拔出，不宜用力过猛。

（5）将灭菌的接种环伸入菌种试管内，先将环接触试管内壁或未长菌的培养基，使接种环的温度下降达到冷却的目的，然后再挑取少许菌苔。将接种环退出菌种试管，迅速伸入待接种的斜面试管，用环在斜面上自试管底部向上端轻轻地划一直线。所划直线尽可能的直，切莫划几条线或蛇形，不要将培养基划破，也不要使接种环接触壁或管口（图2-5、图2-6）。

（6）接种环退出斜面试管，再用火焰烧灼管口，并在火焰边将试管塞上。将接种环逐渐接近火焰再烧灼，如果接种环上沾的菌体较多时，应先将环在火焰边烤干，然后烧灼，以免未烧死的菌种溅出污染环境，接种病原菌时更要注意此点，如图2-5、图2-6所示。

2.液体培养基接种

向牛肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时，其操作步骤基本与斜面接种法相同，不同之处是挑取菌苔的接种环放入液体培养基试管后，应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦，使菌体分散从环上脱开，进入液体培养基，塞好试管塞后摇动试管，使菌体在培养液中分布均匀，或用试管振荡器混匀。若向液体培养基中接种量大或要求定量接种时，可先将无菌水或液体培养基加入菌种试管，用接种环将菌苔刮下制成菌悬液（刮菌苔时要逐步从上向下将菌苔洗下，用手或振荡器振匀），再将菌悬液用塞有过滤棉花的无菌吸管定量吸出后加入，或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物，则可用无菌吸管定量吸出后加入或直接倒入液体（图2-7）培养基。整个接种过程都要求无菌操作。