衣原体是人类疾病最常见病原体群之一,主要有沙眼衣原体(Chlamydia trachomarls,Ct)、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)和鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)等。由于衣原体在专性细胞内寄生,在无生命培养基中不能生长,因此对衣原体感染的病原学诊断有一定的难度。
(一)传染检查方法
衣原体感染传统检查方法存在着其优缺点。
1.分离培养法 鸡胚和传代肿瘤细胞株(如McCoy、Hep-2、Hela229、H292等)分离培养衣原体可获得较高的特异性,因此分离培养法曾被认为是诊断衣原体感染的“金标准”。尽管人们不断改良分离培养条件,如变换不同的细胞株、细胞株经放线菌处理、标本接种后离心等等,但在实际工作中分离培养法的灵敏度仍显不足,且由于各实验室采用不同的细胞株、不同的步骤,因而该法所得的结果缺乏横向比较价值。当前,分离培养不适用于临床,而多用于科研。
2.酶标检测法 操作简单且易于自动化,但衣原体的免疫原性差,以免疫反应为基础的检测技术优势无法体现。1999年,美国CDC系统评价了各厂商生产的Ct免疫检测试剂盒的特异度和灵敏度,与培养法相比,尽管特异度在99.6%~99.8%,但灵敏度Syva DFA为74.5%、Syva EIA为71.7%、Sanofi EIA为66.8%、Abbott EIA为61.9%,即衣原体感染的免疫法检测灵敏度仅在61.9%~74.5%。
(二)分子诊断方法
近年来,人们一直在探索灵敏、特异和简便的衣原体感染检查技术,其中分析衣原体DNA的方法正在建立。
衣原体感染的分子诊断技术中已有基因探针杂交、PCR、巢式PCR、LCR、TMA等方法。其中基因探针杂交和连接酶链反应(ligase chain reaction,LCR)单独使用灵敏度不足,宜与PCR联合应用。巢式PCR不仅特异性与灵敏度均占优势,而且由于无须增添任何设备,能开展PCR检测的单位均可实施,是较为适合的方法。
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