分离原理:固定相为固体吸附剂的液相色谱柱称为液-固吸附色谱法。吸附指的是溶质在吸附剂表面的集中浓缩现象。吸附剂一般是多孔性微粒状的物质,通常具有较大的比表面积,在其表面有许多吸附中心。这些吸附中心的多少及其吸附能力的强弱直接影响吸附剂的性能。吸附剂对于极性不同的物质具有不同的吸附能力。通常极性强的组分在固定相易被吸附剂所吸附,随着流动相向前移行的速度小,保留时间长。根据组分的官能团对吸附剂表面亲和力的大小,决定了它的保留程度大小。官能团与吸附能力大小可见表8-1。
表8-1 官能团与吸附强度的关系
吸附剂表面和溶质之间的相互作用有几种力,包括氢键力、静电力和色散力等。硅胶和氧化铝的保留作用主要受与溶质极性官能团的相互作用所控制。吸附剂与碳氢部分的弱弥散相互作用,对于同系物或其他脂肪族取代物的混合物之间只有很小的差别,甚至无法区别。一般来说,最适合用吸附色谱分离的是那些溶于有机溶剂的非离子性化合物,对于极性大的化合物,会引起拖尾和分离不好。
吸附剂表面与溶质之间的作用力有氢键力、静电力和色散力等。硅胶和氧化铝的保留作用主要受与溶质极性官能团的相互作用所控制。吸附剂与碳氢部分的弱弥散相互作用,对于同系物或其他脂肪族取代物的混合物之间只有很小的差别,甚至无法区别。一般来说,最适合用吸附色谱分离的是那些溶于有机溶剂的非离子性化合物,对于极性大的化合物,会引起拖尾或分离不好。
吸附柱色谱通常采用的吸附剂有硅胶、氧化铝和聚酰胺等。其中硅胶是最常见的吸附剂,具有硅氧交联结构、表面有许多硅羟基的多孔性微粒。硅羟基是硅胶具有吸附力的活性基团,由于能与极性化合物或不饱和化合物形成氢键而具有吸附性。硅胶具有微酸性,适用于分离酸性和中性物质,如有机酸、氨基酸、甾体等。氧化铝有碱性、中性和酸性3种。中性氧化铝使用较多,用于分离生物碱、挥发油、萜类、甾体以及在酸、碱中不稳定的苷类、酯、内酯等;碱性氧化铝适用于碱性和中性化合物的分离,对于酸性化合物则无法分离。
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