(一)PCR仪的质检与保养
PCR仪是临床核酸检测的基本仪器，其孔间温度的稳定性和均一性对扩增实验有着直接的影响，因此需要定期对PCR仪的孔间温度的重复性和均一性进行监测。一种方法是使用一种由热电偶探针、微伏转换器和自动图示记录仪组成的扩增加热模块孔内温度监测记录系统，可检测出孔间温差超过1℃的变异。具体做法是将装有TE缓冲液(上层用一层石蜡油覆盖)的扩增反应管放置于扩增仪各孔中，将热电偶探针透过扩增反应管盖插至缓冲液中，然后按程序进行一个常规的PCR扩增，加热模块如为96孔，则至少要测定12孔不同位置孔内的温度，在整个扩增过程中可移动热电偶探针至上述不同孔中监测温度，但每一孔内温度监测至少要有一个扩增周期。第二种方法并非直接测定孔内温度，而是通过扩增功能来间接获知孔间的均一性，即将加有一已知的含一定浓度的阳性质控样本的扩增反应管置于扩增仪各孔中按常规进行扩增检测，观察结果的一致性程度，如果有某一个或几个结果偏差较大，则应确定这一个或几个孔是否会重复性地得到假阴性结果，如果是，则表明相应孔的热传导有损坏。
(二)微量移液枪的正确使用
首先按照实际吸取液体的体积，选择合适量程的微量移液器。一个完整的移液循环包括容量设定——吸头安装——吸液——放液——卸去吸头等5个步骤，每一个步骤都有需要遵循的操作规范。使用完毕，将其竖直挂在移液枪架上，当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。同时为了保证加样的准确性，加样器应定期校准和维护以保持良好的准确度和精密度。另外用于转移高黏液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体时，最好采用反向移液法，就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体，先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点，接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点(切记不能再往下按)。
(三)带滤塞吸头的使用及质检
首先制备一个含1%～2%甘油及色素(如甲基橙)的水溶液，如果吸头的最大体积为100μl，则将加样器吸取体积调至110～120μl，套上待检吸头吸取上述有色液体，有色液体不应透过滤塞，否则说明滤塞滤过效能不佳。也可模拟PCR实验操作来检验带滤塞吸头的质量：先纯化制备数份强阳性和数份阴性核酸标本，然后将加样器吸取量设至扩增加样所需的体积，使用待评价吸头对一份强阳性样本来回吸取10次(模拟10份阳性样本的吸取)，将最后一次的吸取液加至一含扩增反应液的管中，之后换一个新吸头，连续吸取10份阴性样本分别至10个扩增反应管中，此过程重复3～5次，最后对每一管按所用试剂方法进行扩增检测。所有强阳性样本检测结果应为强阳性，如为弱阳性或阴性则说明吸头可能含有扩增抑制物；所有阴性样本检测结果应为阴性，如出现弱阳性或阳性则表明吸头不能有效地防止气溶胶对加样器的污染。基因扩增相关设备的质检要求见表12-2，临床基因扩增实验室日常工作核查表见表12-3。
表12-2 基因扩增相关设备的质检要求
表12-3 临床基因扩增实验室日常工作核查表
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