骨组织及钙化的病变组织必须进行脱钙处理。脱钙最好是在固定后进行或脱钙固定同时进行。脱钙剂的种类很多，但以有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（ethlene diamine tetraacetic acid，EDTA）等为主，此外还有电解脱钙法等。常用的酸性脱钙液有硝酸和盐酸溶液，它们属于强酸，适用于致密的皮质骨脱钙，其特点是在短时间内可以脱掉大量的钙，但缺点是这些强酸会导致组织形态的损伤，因此，应用此类脱钙液切记浓度不可过高、时间不宜过长，一定勤观察脱钙骨的硬度，适时终止脱钙。骨髓等细软的组织不建议使用强酸脱钙液。另外，为克服酸性脱钙液的缺点可以使用一些保护组织的附加剂，如用缓冲液配制脱钙液，这样可以保护组织，但可减慢脱钙速度。在有机酸中常用的脱钙剂是醋酸和甲酸，它们比较适合骨髓等较小的细软组织的脱钙，因其作用弱，脱钙速度慢，不适合致密皮质骨的脱钙。
（一）硝酸水溶液
【试剂】 浓硝酸5～10ml，蒸馏水加至100ml。
【方法】 厚度0．5cm的骨组织块脱钙12～24h。
【优点】
（1）硝酸水溶液是一种迅速的脱钙液。
（2）对组织损害较少，细胞核着色比甲醛－硝酸液要好。
（3）组织可直接通过70%乙醇去除酸。
【缺点】 脱钙时间必须仔细控制，防止过度脱钙损害组织。
（二）甲醛－硝酸液
【试剂】 40%甲醛5ml，浓硝酸10ml，蒸馏水85ml。
【方法】 厚度0．5cm的骨组织块脱钙时间需要1～3d。
【优点】
（1）甲醛－硝酸液是一种迅速的脱钙液，可作为活检小组织紧急脱钙用。
（2）与5%～10%硝酸水溶液一样对组织几乎没有损害。
【缺点】
（1）对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。
（2）脱钙后最好用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗12h。
（三）硝酸－间苯三酚液
【试剂】 浓硝酸，10ml，间苯三酚1．0g。
【方法】 通风橱内混合。混合时会产生浓棕黄色双硫磷烟雾。然后加10%硝酸100ml。厚度0．5cm的骨组织块脱钙时间12～24h。
【优点】 该液脱钙速度非常快，大概是所有脱钙液中速度最快的一种脱钙液。
【缺点】
（1）细胞核染色很差。
（2）如果脱钙时间太长对组织有较大的损害。
（3）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少24h。
（4）用化学方法测试不能测定脱钙的终点。
（四）Perenyi液
【试剂】 10%硝酸4份，0．5%铬酸3份，无水乙醇3份。
【方法】 厚度0．5cm的骨组织块脱钙时间需要2～7d。
【优点】
（1）该液是一种温和的脱钙液，可能由于铬酸的存在有校正抑制作用。
（2）细胞核和细胞质细微结构着色均好。
（3）推荐该液作为常规脱钙液使用。
（4）组织脱钙后不需要碱性液中和，并流水冲洗，脱钙组织直接移到90%乙醇中。
【缺点】
（1）脱钙较慢，紧急情况下不宜使用。
（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
（五）甲酸－甲醛液
【试剂】 甲酸10ml，10%甲醛90ml。
【方法】 厚度0．5cm的骨组织脱钙时间需要3～7d。
【优点】
（1）脱钙同时可以对组织固定。
（2）对细胞核染色比较好。
（3）推荐用于小块组织和牙齿脱钙。
【缺点】
（1）脱钙比较慢，不推荐作为常规标本脱钙使用。
（2）不推荐作为致密皮质骨脱钙使用。
（3）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少18h。
（六）三氯醋酸液
【试剂】 三氯醋酸5．0g，10%甲醛95ml。
【方法】 厚度0．5cm的骨组织块脱钙时间需要5～8d。
【优点】
（1）对细胞核染色好。
（2）脱钙之后不需要水洗，酸乙醇可以去除。
【缺点】
（1）脱钙作用较慢，仅仅推荐用做骨的细针脱钙。
（2）不推荐作为致密皮质骨脱钙使用。
以上6种溶液属于酸性溶液。
（七）EDTA脱钙液
这是螯合脱钙法脱钙剂。
【试剂】 EDTA 5．5g，10%中性甲醛100ml。
【方法】 EDTA是一种良好的脱钙液螯合剂，它对组织破坏极小，不产生气泡，不影响染色，如果加温至37℃，可以加快脱钙速度。厚度0．5cm的骨组织块脱钙时间需要7～21d。
【优点】
（1）经EDTA脱钙的组织染色结果好。
（2）对组织的结构损害小。
（3）用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
【缺点】
（1）脱钙速度相当慢，不适合常规标本脱钙使用，常用于实验研究。
（2）脱钙后组织会稍微变硬。
免责声明：以上内容源自网络，版权归原作者所有，如有侵犯您的原创版权请告知，我们将尽快删除相关内容。
