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网状纤维染色

时间:2023-03-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:再加入5ml乙液,此时溶液突然变为黑色,再滴加氨水至清亮为止。补加4滴氨水,用蒸馏水补足50ml。平时保存于4℃冰箱,用前取出恢复到室温。

主要采用Gomori银染法。

【试剂配制】

1.Gomori银氨液

(1)甲液:硝酸银10.2g,蒸馏水100ml。

(2)乙液:氢氧化钠3.1g,蒸馏水100ml。

(3)方法:取甲液5ml,滴加氨水至溶解清亮为止。再加入5ml乙液,此时溶液突然变为黑色,再滴加氨水至清亮为止。补加4滴氨水,用蒸馏水补足50ml。平时保存于4℃冰箱,用前取出恢复到室温。

2.0.5%高锰酸钾液 高锰酸钾0.5g,蒸馏水95ml,3%硫酸5ml。

3.2%草酸液 草酸2.0g,蒸馏水100ml。

4.2%硫酸铁铵水溶液 硫酸铁铵2.0g,蒸馏水100ml。

5.10%中性甲醛液 甲醛(40%)10ml,蒸馏水90ml。

【染色程序】

(1)组织块固定于10%中性甲醛液中,常规脱水、石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)0.5%高锰酸钾液氧化5min。

(4)稍水洗。

(5)2%草酸液漂白1~2min。

(6)稍水洗。

(7)2%硫酸铁铵水溶液媒染5min。

(8)稍水洗,再用蒸馏水作用3~5min。

(9)滴入Gomori银氨液作用3~5min。

(10)蒸馏水稍洗。

(11)10%中性甲醛液还原1~5min。

(12)流水冲洗5~10min。

(13)以0.2%氯化金调色1~2min。

(14)蒸馏水洗。

(15)固定于5%硫代硫酸钠2min。

(16)HE复染,常规脱水、透明,中性树胶封固。

【染色结果】 网状纤维呈黑色,胶原纤维呈黄至黄棕色,胞核呈蓝色。

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