六胺银法或法试剂配制

主要采用六胺银法或PASM（Periodic　Acid－Silver　Methenamine）法。

【试剂配制】

1．0．5%高碘酸水溶液　配法同前。

2．1%偏重亚硫酸钠液　偏重亚硫酸钠1．0g，蒸馏水100ml，保存于4℃冰箱内，使用前取出恢复至室温。

3．8%铬酸水溶液　铬酸8．0g，蒸馏水100ml。

4．Gomori六胺银储备液

（1）试剂：5%硝酸银液5ml，3%六次甲基四胺100ml。

（2）方法：将5%硝酸银液慢慢加入3%六次甲基四胺水溶液中，随即形成乳白色沉淀，在摇动中沉淀即溶解变清。澄清液盛于棕色小口砂塞瓶内，置于4℃冰箱内保存待用。

5．5%四硼酸钠水溶液　四硼酸钠5．0g，蒸馏水100ml。

6．六胺银工作液

（1）试剂：Gomori六胺银储备液10ml，蒸馏水25ml，5%四硼酸钠水溶液2ml。

（2）方法：将四硼酸钠液加入蒸馏水中，然后加入Gomori六胺银储备液，混合均匀后即可使用。

7．0．2%氯化金水溶液

【染色程序】

（1）组织块宜固定于Bouin液，也可固定于10%中性甲醛液中，常规脱水、石蜡包埋和切片。

（2）常规脱蜡至水。

（3）0．5%高碘酸氧化15min。

（4）流水冲洗5min，蒸馏水洗。

（5）8%铬酸氧化30min。

（6）流水稍洗。

（7）1%偏重亚硫酸钠液处理1min（除去铬酸）。

（8）流水冲洗5min，再用蒸馏水洗3次。

（9）切片放入预热至55～60℃的六胺银工作液中，于60℃恒温箱内作用30～60min，直至切片在黄棕色的背景中呈现黑色反应，取出切片，蒸馏水洗后镜下观察至基底膜出现黑色的银沉淀为准。如果着色深度不够，可用蒸馏水冲洗后放回六胺银工作液中继续染色。染色中切勿使用金属容器或接触金属器械。

（10）蒸馏水洗3～4次。

（11）0．2%氯化金水溶液调色1～2min。

（12）蒸馏水洗3次。

（13）3%硫代硫酸钠液处理3min。

（14）自来水冲洗5min。

（15）HE浅染（作为对比染色）。

（16）各级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

【染色结果】　基底膜、网状纤维、Ⅳ型胶原、弹力纤维、真菌呈黑色。细胞核呈蓝色，细胞质呈红色。