【摘要】：Western免疫印迹技术是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的一种技术。Western免疫印迹技术的基本操作步骤包括收集蛋白样品、电泳、转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、蛋白检测和膜的重复利用。用免疫印迹技术可定性、定量地检测出待检样品中含量很低的特定病原体的抗原成分。用单克隆抗体作为第一抗体进行免疫印迹，还可以对毒株做分型研究。
Western免疫印迹技术（Westernblot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的一种技术。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或放射性核素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
Western免疫印迹技术的基本操作步骤包括收集蛋白样品、电泳、转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、蛋白检测和膜的重复利用。
免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。用免疫印迹技术可定性、定量地检测出待检样品中含量很低的特定病原体的抗原成分。对于一些能感染细胞而细胞病变不易观察的病原体的检测也很有用。用单克隆抗体作为第一抗体进行免疫印迹，还可以对毒株做分型研究。
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