皮肤试验是在皮肤上做检测来测试变应原的试验。临床常用的对湿疹的诊治有帮助的皮肤试验有斑贴试验、皮内试验、体外试验、皮肤划痕试验、划痕试验、寒冷试验、被动转移试验等。
(一)斑贴试验
斑贴试验是用于诊断机体迟发型变态反应的试验,应用于临床已经有100多年的历史了。它是检测变应原的经典方法,已得到了临床医生的认可。对于湿疹,斑贴试验常用于检测接触性湿疹患者的变应原。现斑贴试验临床最常用的有封闭性斑贴试验和开放性斑贴试验。
1.封闭性斑贴试验 是一种用来测定机体迟发型变态反应的诊断性试验。但与免疫有关的湿疹主要是Ⅰ型变态反应(速发性变态反应),湿疹患者封闭性斑贴试验阳性提示慢性湿疹应注意速发型变态反应的迟发性反应,至少某些物质可从速发型变态反应发展为迟发型变态反应。
封闭性斑贴试验的具体做法是:将斑试抗原分别置于斑试器铝制小盒内,将斑试器贴于背部脊柱两侧或前臂内侧(均无皮损处),然后分别于24小时,48小时,72小时观察结果,之后去除斑试器。判断标准如下。
“-”敷贴部位无任何改变;
“±”敷贴部位仅有轻度红斑,可伴有瘙痒;
“+”敷贴部位有红斑、浸润,可有小丘疹;
“”敷贴部位有红斑、浸润、小水疱;
“”敷贴部位有红斑、浸润、大水疱为甚或坏死;
2.开放性斑贴试验 是诊断接触性湿疹的主要方法。接触性湿疹分为免疫性、非免疫性和机制不明者3种。非免疫性的斑贴试验一般在完全正常的皮肤上进行,将受试物置于1cm× 1cm大小的皮肤上,通常选用上背部皮肤。免疫性的斑贴试验一般在有皮损的皮肤上进行较易引出,将0.1ml受试液、乳剂或软膏置于皮肤上,15分钟后将受试物轻轻擦去。通常开放性斑贴试验15~30分钟即可观察结果,但非免疫性机制介导的接触性湿疹发生反应较慢,一般需观察至1~2小时。如出现红斑、风团、水肿即为阳性。
要注意做斑贴试验时不宜在皮肤病急性发作期做,受试物的浓度应由低浓度到高浓度,不可直接用高浓度的原发性刺激物做试验。受试前2周和受试期间服糖皮质激素、受试前3天和受试期间服用抗组胺类药物均可出现假阴性。试验过程中应注意区分刺激反应与过敏反应,其具体区分可见表1。
表1 变态反应与刺激性反应鉴别表
3.皮内试验 是根据Ⅰ型变态反应和Ⅳ型变态反应的原理,测定患者变应原的试验,较其他试验的灵敏性高,是变态反应性疾病常用的诊断方法之一。操作部位一般为上臂外侧或背部皮肤,将适当浓度的受试液分别注入受试部位,量大约为0.1ml,以出现约4mm的皮丘为准,每个皮丘的横向间隔3~5cm,纵向间隔约3cm,15~30分钟后观察一次结果,然后于24、48、72小时再次观察结果。皮内试验引起的反应分为即刻反应及迟发反应。15~30分钟内有风团发生,即为即刻反应阳性。几小时或2天后出现反应,如有浸润、结节即为迟发性反应阳性。
此试验需小心迟发性反应,一般在皮试后数小时至1~2天后出现,具体表现为局部水肿、充血等,甚或出现坏死。迟发性反应一般说明患者的反应较为强烈,因此,需嘱患者皮试后继续观察1~2天,此期间应避免皮试部位的过度摩擦和洗搓。若试验结果为阴性应注意假阴性的可能,如受试液备置不准确等均可影响试验结果。由于皮内试验变应原已注入体内,有一定的风险性,故适用于标准化变应原的检测。其变应原引起的反应可以是变态反应,也可以是非免疫机制引发的反应,相当于变应原在体内引起的激发反应。对于高度敏感的患者此试验有一定的危险性,试验前应准备好急救物品,如肾上腺素等,也可用危险性相对小的划痕试验代替。
4.皮肤划痕试验 是根据Ⅰ型变态反应的原理,检测与免疫有关的速发型变态反应患者的变应原。试验一般选在前臂内侧健康皮肤,常规消毒后,用无菌针头在受试部位划0.5~1cm的划痕,以不出血为度。然后将受试液滴于划痕上,并轻擦之。若有几种物质同时进行,在两条划痕间应间隔4cm左右的距离,并用生理盐水设置对照组。一般15~30分钟后观察结果,对于反应过于强烈者,应立即擦去受试物。结果分析如下。
“±”风团微有红晕,直径小于0.5cm。
“+”风团有明显的红晕,直经约0.5cm。
风团有显著红晕,但无伪足。直径0.5~1.0cm。
风团有显著红晕及伪足,直经1cm或更大。
本试验应在疾病痊愈两周后进行,不适用于皮肤划痕症阳性的患者。因有一定的危险性,试验前也应准备好抢救必需品。
5.点刺试验 是检测变应原的一种方法,操作部位一般选在两前臂屈侧皮肤进行。将皮肤消毒后,将含有不同变应原的抗原液滴一滴(约针尖大小)于前臂皮肤,并在旁边做标记抗原液名称。在此过程应设置不含抗原液的阴性对照组及含有组胺液的阳性对照组,然后将一次性的含有尖头的(仅能刺破皮肤)点刺针垂直刺入每一滴液体中,仅刺破皮肤表皮,以不出血为度,然后迅速退出针头,这时会有少量受试液进入皮肤,如果反应正常,则在5分钟内将受试液拭去,若反应激烈,则立即擦去受试物,20~30分钟后观察结果,阳性结果判断标准如下。
变应原风团反应与阴性对照相同为(-);
风团反应范围=阳性对照反应的1/4为(+);
风团反应范围=阳性对照反应的1/2为
风团反应范围=阳性对照者为
风团反应范围=阳性对照2倍者为
本试验主要用于检测IgE介导的速发性变态反应,尤其适用于标准化抗原。
6.皮肤划痕症试验 常用来诊断皮肤划痕症型的湿疹。在患者皮肤表面用钝器以适当压力划过,由于患者对外来较弱的刺激即可引起较强的生理性反应,可能出现以下三联反应:①划后3~15秒,在划过处出现红色线条;②15~45秒后,在红色线条两侧出现红晕;③划后1~3分钟,划过处出现隆起、苍白色风团状线条。
本试验阳性率与所施压力成正比,用力越大,出现阳性几率越大。若压力过小,可能出现“假阴性”。因此,在做皮肤划痕症时,施压标准需统一。国外使用笔式划痕器,并规定须在前臂内侧测试,以4 900g/cm2为标准压强,若风团宽度大于2mm即为阳性。
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