抗核抗体谱检查正常值

1．概念 放射免疫技术分析是利用放射性核素作为示踪物来检测反应体系中的抗原抗体复合物的标记免疫技术。放射免疫分析的基本类型有放射免疫分析（RIA）、免疫放射分析（IRMA）和放射受体（或配基）分析（RRA）。

2．常用放射性核素 产生γ射线的125I、131I和51 Cr等，其中最常用的是125I；产生β射线的3 H、14 C和32 P等，其中最常用的是3 H。

用于蛋白标记的理想放射性核素应有以下特点：①比放射活性（单位化学量标记物的放射性强度）高，比放射性越强灵敏度越高；②半衰期较长；③不应产生较强电离辐射性的射线，以利于保持标记蛋白的活性；④易于测定、标记技术简便等。

目前使用最多的放射性核素是125I，其优点是：①化学性质活泼，易采用化学基团取代反应直接与蛋白质分子连接（标记）；②释放γ射线，易于测量；③半衰期（长达60d）、核素丰度（＞95%）及计数率方面均优于131I；④不释放电离辐射强的β射线，对标记蛋白的活性影响小。

3．放射免疫分析

（1）放射免疫分析（RIA）基本原理：利用有限定量的放射性核素标记标准抗原（Ag＊）与待测抗原（Ag）竞争性结合有限定量的诊断抗体，以测定待测抗原的性质和含量。

（2）RIA测定方法分三个基本步骤：①反应，将标本（未标记抗原）先与定量对应诊断抗体混合反应，然后加入定量放射性核素标记标准抗原（Ag＊）进行竞争抑制反应。②分离，将标记抗原和抗体特异结合的复合物（B）和未结合的游离标记抗原（F）分离，常用分离方法有特异性的第二抗体法、或非特异性的聚乙二醇沉淀法、硫酸铵盐析法、活性炭吸附法等。③测定：用计数仪测定沉淀物（Ag＊－Ab，即结合态Ag＊）的放射性强度［单位：每分钟计数（cpm）］作为B值，测定离心后的上清液（游离态Ag＊）放射性强度作为F值，计算反应参数B／F值或结合率B／（B＋F）值，查剂量－反应标准曲线可计算待测抗原浓度。由于B值与待测抗原浓度成反比，F值与待测抗原浓度成正比，因此B／F或B／（B＋F）值与待测抗原浓度成反比。

绘制剂量－反应曲线：将未标记标准抗原作系列稀释，然后每支稀释管中均加入定量放射性核素标记标准抗原（Ag＊）和定量对应诊断抗体混合进行竞争抑制反应；反应后如上法分别分离、测定并计算每一标准抗原稀释度的B／F值。以B／F值为纵坐标，以标准抗原浓度为横坐标，绘出标准剂量－反应曲线。

4．免疫放射分析（IRMA） 基本原理与方法：用过量放射性核素标记抗体（Ab＊）与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应，再加入固相标准抗原吸附除去游离标记抗体，离心沉淀后，通过测定上清液（含待测Ag－Ab＊）的放射性强度，因放射性强度与待测抗原呈正比关系，可推算出样品中待测抗原含量。