(一)葡萄球菌属
1.生物学性状 本属菌是球形或略呈椭圆形、排列成葡萄串状的革兰阳性球菌,无鞭毛和芽胞,有些细菌能形成荚膜。需氧或兼性厌氧,营养要求不高,多数菌株耐盐性强。普通琼脂平板培养可产生金黄色、白色、柠檬色脂溶性色素,根据此特点将葡萄球菌分为金黄色、白色和柠檬色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落周围有明显的透明溶血环(β溶血环)。葡萄球菌含蛋白抗原和多糖抗原,葡萄球菌A蛋白(SPA)存在于葡萄球菌的表面,具有抗吞噬作用,可与人类IgG的Fc段非特异性结合,利用此特性可开展简易、快速的协同凝集试验。本菌生化活性强,能分解多种糖类、蛋白质和氨基酸,触酶阳性,致病菌株可分解甘露醇和产生血浆凝固酶,葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞菌。
2.微生物学检验 标本革兰染色镜检可作初步报告。血液经增菌后接种于血琼脂;脓汁、尿道分泌物、脑脊液可直接接种血琼脂;粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇平板。可疑菌落进行鉴定,金黄色葡萄球菌可溶血、血浆凝固酶、甘露醇和耐热核酸酶试验阳性、对新生霉素敏感,凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要指标;凝固酶阴性的葡萄球菌鉴别采用新生霉素敏感试验,敏感者为表皮葡萄球菌,耐药者多为腐生葡萄球菌;可用幼猫试验检测肠毒素。
3.临床意义 金黄色、表皮和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。①金黄色葡萄球菌感染以急性、化脓性为特征,常引起疖、痈、外科伤口、创伤的局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、败血症等全身性感染,还可引起葡萄球菌性肠炎;由疖、痈继发的败血症,其细菌多为金黄色葡萄球菌。主要致病物质有血浆凝固酶、溶血毒素、杀白细胞素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。此外,其产生的肠毒素可引起食物中毒。②表皮葡萄球菌近年来已成为医院感染的重要病原菌。③腐生葡萄球菌是导致尿路感染的常见病原菌之一。
(二)链球菌属
链球菌根据溶血现象分为甲型(α)溶血性链球菌(又称草绿色链球菌)、乙型(β)溶血性链球菌(又称溶血性链球菌)和丙型(γ)链球菌(又称不溶血性链球菌)三类,亦可根据链球菌细胞壁抗原分成A、B、C、D……等20个群。对人致病的主要是A群链球菌(也称化脓性链球菌),多数呈现乙型溶血,致病力最强为乙型溶血链球菌。
1.生物学性状 链球菌是圆形或卵圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌,无鞭毛、无芽胞。肺炎链球菌呈矛头状,成双排列,可形成荚膜。多数菌株兼性厌氧,少数为专性厌氧。营养要求较高,培养基中需加入血液或血清等物质。在液体培养基中呈沉淀生长(但肺炎链球菌为浑浊生长),血平板上形成灰白色、圆形、凸起、光滑的细小菌落,周围出现α、β、γ溶血环。肺炎链球菌为α溶血环,可形成灰色扁平、中心凹陷(因菌落发酵所致)菌落,且培养时间长可产生自溶酶。生化反应触酶阴性,能分解葡萄糖产酸不产气,对其他糖类的分解因不同菌株而异,链球菌属与葡萄球菌属的主要鉴别试验是触酶试验。本菌抵抗力不强。
2.微生物学检验 标本直接涂片革兰染色镜检可作初步报告,血液标本先增菌培养,肺炎链球菌呈均匀浑浊,有绿色荧光;脓液、咽拭可接种血琼脂平板并涂片染色镜检,5%~10%CO2环境下生长良好,可疑菌落做进一步鉴定。①A群链球菌:杆菌肽试验阳性。②B群链球菌:CAMP试验阳性,可水解马尿酸钠。③D群链球菌:七叶苷试验阳性。④肺炎链球菌:胆汁溶解试验、菊糖发酵试验和Optochin(奥普托欣)敏感试验阳性(与甲型溶血性链球菌相鉴别);荚膜肿胀试验和快速乳胶凝集试验阳性;动物(小白鼠)试验阳性。
3.临床意义 A群、B群及肺炎链球菌是链球菌属的3种重要致病菌。①A群链球菌:可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎、脑膜炎及变态反应性疾病(如急性肾小球肾炎、风湿热等),产毒株还可引起猩红热。主要致病物质为多种外毒素和侵袭性酶,如链球菌溶素O和S、M蛋白、脂磷壁酸、链激酶、链道酶、透明质酸酶等。②B群链球菌(也称无乳链球菌):是新生儿败血症和脑膜炎的常见菌,对成人主要引起肾盂肾炎、子宫内膜炎等。③肺炎链球菌:是大叶性肺炎、支气管炎的病原菌,还可引起中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎等。主要致病物质为荚膜、溶血素和神经氨酸酶。④甲型溶血性链球菌:可引起亚急性细菌性心内膜炎。
(三)奈瑟菌属
1.生物学性状 奈瑟菌属为革兰染色阴性双球菌,无芽胞,无鞭毛,有菌毛,专性需氧,氧化酶阳性。对人致病的是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。
奈瑟菌呈球形或肾形,成对排列,形似咖啡豆的革兰阴性球菌,通常位于中性粒细胞内,而在慢性淋病时常位于细胞外,新分离株有荚膜和菌毛。本属细菌能产生自溶酶,营养要求高,须在含有血液、血清等培养基才能生长,常用巧克力琼脂、血液琼脂和卵黄双抗琼脂,专性需氧,5%~10%CO2可促进生长(淋球菌初次分离必需),生化反应能力弱,触酶和氧化酶试验阳性,对糖分解能力不同。对寒冷、干燥、热和化学消毒剂的抵抗力弱。
2.微生物学检验 采集标本后应立即送检,或用预温平板进行床边接种后立即培养。革兰染色镜检如发现中性粒细胞内革兰阴性双球菌可作初步诊断。分离脑膜炎奈瑟菌血液或脑脊液标本先增菌再接种巧克力平板,淋球菌采样后须立即接种于预温的含有两种以上抗生素(万古霉素和多黏菌素等)的营养培养基上(如巧克力平板),可疑菌落做革兰染色镜检和进一步鉴定。①脑膜炎奈瑟菌:氧化酶和触酶试验阳性;分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气;荚膜多糖抗原直接凝集试验和快速乳胶凝集试验阳性。②淋球菌:氧化酶阳性;仅分解葡萄糖产酸;核酸检测技术检测淋病奈瑟菌,可快速诊断;仅发酵葡萄糖而不发酵麦芽糖可与脑膜炎奈瑟菌相鉴别。
3.临床意义
(1)脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌。在人体的定植部位一般为鼻咽部。
(2)淋病奈瑟菌是淋病的病原菌,主要通过性接触直接传播,污染的物品有一定的传播作用,常见单纯性淋病、盆腔炎、口咽部和肛门直肠淋病、播散性淋病,母体患淋菌性阴道炎或子宫颈炎时,婴儿出生时可致淋菌性结膜炎。
(四)肠球菌属
肠球菌呈单个、成对或短链状排列的革兰阳性球菌,需氧或兼性厌氧,对营养要求较高,高盐(6.5%NaCl)、高碱(pH 9.6)、40%胆汁培养基上和10~45℃环境下生长,并对许多抗菌药物表现为固有耐药,在40%胆汁培养基中能分解七叶苷,氧化酶和触酶试验阴性,多数菌种能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺(PYR)。
合理采取相应标本,革兰染色镜检进行初步检查。分离培养后,挑取可疑菌落,进行镜检、触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5% NaCl耐受试验,可鉴定到属。如鉴定到种还需进行必要的生化试验。对具有临床意义的肠球菌应进行体外药敏试验。
肠球菌是革兰阳性菌中仅次于葡萄球菌属的重要医院感染病原菌,常引起尿路感染。
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