（一）紫外线灯消毒效果监测
1．标本采集 生物指示菌为大肠埃希菌或枯草杆菌黑色变种芽胞。开启紫外线灯5min后，将8个染菌玻片平放于灭菌器皿中，水平放于适当距离照射，于4个不同间隔时间各取2个染菌玻片，分别投入2个盛有5ml洗脱液（1%吐温80，1%蛋白胨生理盐水）试管。
2．检测方法
（1）物理检测法：紫外线强度仪测定（ZY－07型）。
（2）生物检测法：将取得的洗脱液做平板倾注，每个染菌玻片接种2个，放37℃培养48h做活菌计数。
3．参考范围
（1）物理检测法：普通30W直管型紫外线灯，新灯管≥100μW／cm2为合格，旧灯管＞70μW／cm2为合格；30W高强度紫外线新灯的辐射强度≥180μW／cm2为合格。
（2）生物检测法：消毒后照射的物品或空气中的自然菌减少90%以上；人工染菌杀灭率应达到99．9%以上。
4．临床意义 评价紫外线灯管消毒效果是否合格。
（二）高压灭菌器灭菌效果的监测
1．标本采集 有菌片、悬液及生物指示剂等，指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953），根据不同情况进行采样。
2．检测方法
（1）培养法：将高压灭菌后的菌片、悬液，接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基，将未处理阳性对照菌片做相同接种，两者均置55～60℃培养。
（2）仪器测试法（高压灭菌检测仪）：将2个嗜热脂肪杆菌芽胞菌指示菌分别置于标准试验包中心部位，经一个灭菌周期后，放入检测仪进行测定。
3．参考范围
（1）培养法：阳性对照应在24h内有菌生长。监测样品如连续观察5d全部无菌生长，可报告生物指示剂培养阴性，消毒灭菌合格。
（2）仪器测试法：阳性结果表明灭菌失败，阴性表明灭菌过程合格。
4．临床意义 每次灭菌柜要进行灭菌工艺监测、化学监测和每月生物监测，只有当灭菌工艺符合要求、化学指示剂变色达到标准、生物指示剂培养阴性时，才能证明压力蒸汽灭菌合格。
（三）环氧乙烷（EO）灭菌效果监测
1．标本采集 有菌片、悬液及生物指示剂等，指示菌株为枯草杆菌黑色变种芽胞，根据不同情况进行采样。
2．检测方法
（1）菌片与悬液测试法：将指示菌片装放在物品中，待灭菌完毕后取出，并接种于0．5%葡萄糖肉汤培养液，将未处理阳性对照菌片做相同接种，两者均置37℃培养。
（2）仪器测试法（EO监测仪）：将枯草杆菌黑色变种芽胞指示管分别置于标准试验包中心部位，经一个灭菌周期后，放入检测仪进行测定。
3．参考范围
（1）菌片与悬液测试法：阳性对照应24h内有菌生长。监测样品如连续观察消毒5d，灭菌7d全部无菌生长，可报告生物指示剂培养阴性，消毒灭菌合格。
（2）仪器测试法：阳性结果表明灭菌失败，阴性结果表明灭菌合格。
4．临床意义 每次消毒进行化学指示剂监测，每月进行生物指示剂监测，只有当消毒工艺符合要求，化学指示剂变色达标，生物指示剂培养阴性时为消毒灭菌合格。
（四）一次性医疗用品微生物监测
1．标本采集 对各种一次性医疗用品采用随机抽样方法，进行微生物监测。
2．检测方法 接种样本或接种样本洗脱液、采样棉拭子后的需氧－厌氧菌培养管、真菌培养管、阳性对照管与阴性对照管分别放入30～35℃与20～25℃恒温培养箱内、连续培养5～7d做细菌与真菌培养，逐日观察培养结果。
3．参考范围 接种样本或样本洗脱液、采样棉拭子（不包括阳性对照管）的需氧－厌氧菌培养管及真菌培养管中有任何一管呈浑浊，并确认有菌生长时，应用同批样本进行复测。复测中，除阳性对照管外，其他各管均无菌生长，仍可判为合格，否则应判供试品不合格。
（1）进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜的医疗用品必须无菌。
（2）接触黏膜的医疗用品，细菌菌落总数应为≤20cfu／g或100cm2；不得检出致病微生物。
（3）接触皮肤的医疗用品，细菌菌落总数应≤200cfu／g或100cm2；不得检出致病性微生物。
灭菌包装符合要求，无破损、漏气、异物、异味、各种标志齐全，若用环氧乙烷消毒灭菌其残留量＜10μg／g。
4．临床意义 检测一次性使用医疗用品消毒后残存细菌或真菌状况，防止消毒灭菌不过关与保存不严密，减少感染的发生。
（五）内镜消毒灭菌效果检测
1．标本采集 监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2h内检测。
2．检测方法 将送检液用旋涡充分震荡，取0．5ml，采用平板倾注法，于35℃培养48h后计数。
3．参考范围 消毒后的内镜合格标准为：细菌总数≤20cfu／件，不能检出致病菌，HBsAg阴性为合格。
灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。
4．临床意义 防止内镜检查过程中医源性传播疾病，保障病人的健康安全。
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