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超微结构细胞学

时间:2023-03-19 理论教育 版权反馈
【摘要】:如肺泡Ⅱ型细胞癌细胞质内的板层结构、神经内分泌癌细胞质内的神经内分泌颗粒等。细胞表面外形是研究细胞最直观的形态,有些情况下观察细胞表面就能确认细胞类型,如间皮细胞的微绒毛、支气管黏膜细胞的纤毛等在外观上的特点就可以确认。有学者将微绒毛、中间丝和细胞质内新腔称为间皮瘤三联征。而腺癌微绒毛粗而短,胞质内有分泌颗粒,细胞外腺腔形成为腺癌特征。

电镜用于细胞学的报告早在20世纪后期就已经出现,但这种技术受条件的限制仅用于研究课题,临床应用并不普及。在电镜技术及其设备逐渐增加,同时离心或沉降式液基技术大量应用的今天,将液基细胞标本的沉淀物作为电镜材料,经戊二醛固定液做扫描电镜或透射电镜切片观察。对于细胞类型的鉴别、核内染色质的判断以及细胞器的变化等方面有很重要的意义。

液基细胞技术离心后其沉淀细胞量丰富,为细胞电镜切片的制作提供了材料。一些在细胞学上不能肯定诊断的病例,但若有电镜看到关键性的证据,一切也就迎刃而解了。如肺泡Ⅱ型细胞癌细胞质内的板层结构、神经内分泌癌细胞质内的神经内分泌颗粒等。

电镜扫描常被用来观察细胞悬液的细胞,如浆膜腔积液、尿液、纤维支气管镜刷取细胞、穿刺细胞等标本。这些标本的细胞量丰富并且采自病变发生处,具有定位明确,能反映是构成病变的细胞成分,这一点对电镜检查是必不可少的环节,有利于获取成功。

细胞表面外形是研究细胞最直观的形态,有些情况下观察细胞表面就能确认细胞类型,如间皮细胞的微绒毛、支气管黏膜细胞的纤毛等在外观上的特点就可以确认。不仅如此,同一类型的正常细胞与癌细胞在外观上也有不同的变化,利用这些变化就可以区分是否癌细胞。间皮瘤细胞表面及瘤细胞内腔面有细长的微绒毛,胞质内有丰富的张力微丝及糖原颗粒,有双层或断续的基底膜,瘤细胞间有较多的桥粒。有学者将微绒毛、中间丝和细胞质内新腔称为间皮瘤三联征。而腺癌微绒毛粗而短,胞质内有分泌颗粒,细胞外腺腔形成为腺癌特征。(图7-14,图7-15)

图7-14 胸腔积液标本

平铺状或单个分布(B),细胞胞质量丰富,与电镜扫描的间皮细胞(A)相同。Pap×400

图7-15 电镜扫描下胸腔积液标本中的各类型恶性间皮瘤细胞

杨梅样(A)、煎蛋样(B)与椰蓉曲饼样(C)外观,显示从分化不良类型、梭形细胞型到上皮样型间皮瘤形态

透射电镜是用来观察细胞内在超微结构和细胞之间关系的检查方法,每种细胞均有其特殊之处,这些特殊的表现能用来确定细胞类型,在鉴别诊断上具有“一锤定音”的作用,除了在细胞悬液上的应用外,近年来已在穿刺标本中得到应用并发挥着重要作用(图7-16~图7-18)。

图7-16 恶性间皮瘤细胞学所见(B,Pap×400):恶性扁平样分化不良间皮细胞;透射电镜所见(A,铅铀双染×2200):恶性间皮细胞之间的表面有细长微绒毛

图7-17 外周T细胞性恶性淋巴瘤的穿刺细胞学所见(A)与穿刺标本透射电镜所见(B)核多形性一致

Pap×400;铅铀双染×2200

图7-18 胸腔积液标本中的腺癌细胞学所见:成团的腺癌细胞(A);透射电镜所见:胞质内的黏液池(B)

Pap×200;铅铀双染×2200

细胞学液基电镜标本的制备步骤如下。

(1)取材:各种液基标本迅速低温离心5000转/10min,去上清液。

(2)前固定:4%戊二醛(1/15M磷酸缓冲液配制,pH=7.2)4℃固定1~2h。

(3)漂洗:用缓冲液漂洗2~3次,每次15min。

(4)后固定:1%的锇酸固定1~2h。

(5)漂洗:用缓冲液漂洗2~3次,每次15min。

(6)脱水:50%、70%、80%,、90%、100%Ⅰ、100%Ⅱ梯度脱水,每次15min。

(7)浸透包埋:用Epon812配方。

(8)超薄切片。

(9)电子染色:铅铀双重染色。

(10)电镜观察:透射电镜观察、拍片。

综上所述,当前液基细胞学在中国的发展趋势,是要充分利用其品质优良的涂片和制片过程中的便利条件开拓新的应用领域,要开展呼吸系统细胞学标本的液基标本的诊断,从而积累更多的非妇科标本的诊断经验。同时为细胞学介入新的技术和方法,以弥补细胞学诊断的局限性和不足,使细胞学与组织学一样具有更完整的证据,在诊断方面发挥其优势。以使我国的细胞学专业与国际接轨,更好地为患者提供优质诊断服务。

参考文献

[1] Ganjei-Azar P,Nadji M.Color Atlas of Immunocytochemistry in Diagnostic Cytology.Springer,2006:4-5.

[2] Muin S.A.Tuffaha,Phenotypic and Genotypic Diagnosis of Malignancies.Wiley,2008:25-26.

[3] Samama B,Plas-Roser S,Schaeffer C,et al.HPV DNA detection by in situ hybridization with catalyzed signal amplification on thin-layer cervical smears.J Histochem Cytochem,2002Oct,50(10):1417-1420.

[4] Guber A,Greif J,Rona R,et al.Computerized analysis of cytology and fluorescence in situ hybridization(FISH)in induced sputum for lung cancer detection.Cancer Cytopathol,2010 Oct25,118(5):269-277.

[5] 陈余清,李殿明,蔡映云,等.纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值.中华结核和呼吸杂志,2005,28(4):225-229.

[6] 夏雪梅,陈余清,刘超,等.支气管肺泡灌洗液中survivin基因检测在肺癌诊断及评估化疗疗效和预后中的意义.实用医学杂志,2009,25(4):552-554.

[7] Edmund S.Cibas,第17届国际细胞学大会会议资料,2010年5月.

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