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检查感染病毒最好的方法

时间:2023-03-21 理论教育 版权反馈
【摘要】:病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。病毒离活体后在室温下很易死亡,故采得检材应尽快送检。污染检材,如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素、链霉素或庆大毒素等,以免杂菌污染细胞或鸡胚,而影响病毒分离。1.动物培养 动物实验是最原始的病毒分离培养方法。接种途径根据各病毒对组织的亲嗜性而定。细胞培养适于绝大多数病毒生长,是病毒实验室最常用技术。

病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。各种检查都要根据疾病的症状与体征采取适宜的标本送检。

(一)标本的采集原则

1.尽早采取在发病初期(急性期)的标本,较易检出病毒,越迟阳性率越低。

2.采取适宜的感染部位标本。如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咳痰;肠道感染采取粪便;脑内感染采取脑脊液;皮肤感染采取病灶组织;有病毒血症时采取血液。

3.冷藏速送。病毒离活体后在室温下很易死亡,故采得检材应尽快送检。若距离实验室较远,应将检材放入装有冰块或干冰的容器内送检。病变组织则应保存于50%的甘油缓冲盐水中。污染检材,如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素、链霉素或庆大毒素等,以免杂菌污染细胞或鸡胚,而影响病毒分离。

4.检测特异性抗体需要采取急性期与恢复期双份血清,第一份尽可能在发病后立即采取,第二份在发病后2~3周采取。

(二)病毒的分离培养和鉴定

1.动物培养 动物实验是最原始的病毒分离培养方法。常用小白鼠、田鼠、豚鼠、家兔及猴等。接种途径根据各病毒对组织的亲嗜性而定。

2.鸡胚培养 用受精孵化的活鸡胚培养病毒比用动物更加经济、简便。根据病毒的特性可分别接种在鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊、脑内或静脉内,如有病毒增殖,则鸡胚发生异常变化或羊水、尿囊液出现红细胞凝集现象,常用于流感病毒等检测。

3.细胞培养 用分散的活细胞培养称细胞培养。细胞培养适于绝大多数病毒生长,是病毒实验室最常用技术。所用细胞包括原代细胞如人胚肾细胞、兔肾细胞;二倍体细胞如WI-38细胞系;传代细胞培养如Hela、Hep-2、Vero细胞系等。

(三)病毒特异性抗体的检测

参见免疫学相关内容。

(四)病毒感染的快速检查

1.形态学检查 如光学显微镜下检测包涵体,电子显微镜下可直接检测病毒颗粒。

2.免疫学检查 检测病毒抗原或抗体,可用免疫标记技术,如免疫荧光(FIA)、放射免疫(RIA)、酶免疫(EIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA),也可用蛋白印记技术、反向间接凝集试验等。

3.病毒核酸检测 如核酸杂交、多聚酶链反应(PCR)等具有特异性强、敏感性高、快速的特点。

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