【目的】 观察低渗盐溶液对红细胞的影响,理解血浆渗透压的相对稳定对维持细胞正常形态和功能的重要性。
【原理】 在临床或生理实验中使用的各种溶液,其渗透压与血浆渗透压相等的称为等渗溶液,如0.9%NaCl溶液;其渗透压高于或低于血浆渗透压的溶液称为高渗溶液或低渗溶液。红细胞在等渗溶液中其形态和大小可保持不变。若将红细胞置于渗透压递减的一系列低渗盐溶液中,红细胞逐渐涨大甚至破裂而发生溶血。正常红细胞膜对低渗盐溶液具有一定的抵抗力,这种抵抗力的大小可作为红细胞渗透脆性的指标。对低渗盐溶液抵抗力小,表示渗透脆性高,红细胞容易破裂;反之,表示脆性低。正常人的红细胞一般在0.45%NaCl溶液中开始溶血,在0.35%NaCl溶液中完全溶血。
【材料】 家兔抗凝血,试管架,小试管10支,2ml吸管3支,吸球,记号笔,2ml注射器,1%NaCl溶液,蒸馏水。
【方法】
1.制备不同浓度的低渗盐溶液 取干燥洁净的小试管10支,编号排列在试管架上,按表5-1所示,分别向试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水并混匀,配制成0.90%~0.25%的10种不同浓度的NaCl低渗溶液。
表5-1 低渗NaCl溶液的配制及浓度
2.采血与加血 用干燥的2ml注射器从兔耳缘静脉取血1ml,立即依次向10支试管内各加1滴血液,轻轻颠倒混匀,切勿用力振荡,室温下静置半小时,然后根据混合液的色调进行观察,做出合理的判断。
【观察项目】
1.观察试管内上层液体颜色及试管底沉积物的量,以此判断红细胞有无破坏及破坏程度。将出现以下三种情况:
(1)如果试管内上层液体为无色透明,试管底沉积物多,说明红细胞完全没有溶解。
(2)如果试管内上层液体出现透明红色,试管底沉积物减少,说明部分红细胞破裂,即不完全溶血。此时红细胞的脆性为最大脆性(最小抵抗力)。
(3)如果试管内液体完全变成透明红色,管底无沉积物,说明红细胞全部破裂,即完全溶血。此时红细胞的脆性为最小脆性(最大抵抗力)。
2.记录红细胞脆性范围,即最大脆性时的溶液浓度和最小脆性时的溶液浓度。
【注意事项】
1.小试管必须清洁干燥。
2.不同浓度的低渗NaCl溶液的配制应准确。
3.在光线明亮处进行观察。
4.各管加血量应相同,加血时持针角度应一致。
5.血液滴入试管后,立即轻轻混匀,避免血液凝固和假象溶血。
思考题
1.为什么同一个体不同红细胞的渗透脆性不同?
2.输液时为何要输等渗溶液?
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