环氧乙烷灭菌生物指示剂存放在哪

【工艺监测】

1.设备检查

（1）硬件设施：在每次灭菌前，操作人员必须认真检查消毒设备的完好性，仔细检查门锁和密封圈外观性能，观察各种管道的通畅性，供气系统性能等设备基本性能。

（2）设定程序：检查常规设定的程序参数，按经过试验所确定的灭菌有关参数进行必要的检查，特别观察环氧乙烷浓度设定值，相对湿度、温度、压力、时间等关键参数的设定值，结束排气情况等，每次灭菌都应进行常规检查。

2.灭菌包装　检查待灭菌的每个包装，包括包装材料是否符合环氧乙烷灭菌要求；检查灭菌包内化学指示器材和包外胶带；检查灭菌包摆放位置和装量。

【生物监测】

环氧乙烷灭菌效果生物监测技术是伴随其消毒方法的产生和发展而研究出的灭菌保障措施之一、通过生物监测技术可客观和直接反映出环氧乙烷实际灭菌效果。作为环氧乙烷灭菌效果生物监测标准最先是由美国药典记载并设定了具体指标，在美国药典第21版全面记述用枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽孢作为环氧乙烷灭菌效果生物指示剂的完整抗力参数。

1.生物指示剂

（1）指标菌种：环氧乙烷灭菌效果监测生物指示菌种为国际通用标准菌株，即枯草杆菌黑色变种（ATCC　9372）芽孢。制作生物指示剂需要取该标准菌株，经过分离、纯化、增菌培养、接种专门配制的营养琼脂培养液表面，培养形成细菌芽孢之后，经过一系列标准化处理，制作成菌片；也可以制作成包含菌片和培养液为一体的自含式生物指示剂菌管。作为某杀菌因子评价生物指示剂必须使用活的细菌芽孢制成，其抗力要求必须大或等于各种致病微生物。通过生物指示剂来证明被灭菌物品内外各种微生物是否被全部杀灭，从而判断灭菌是否合格，因此生物指示剂是判定灭菌效果的直接指标。

（2）抗力参数：环氧乙烷灭菌效果监测生物指示剂抗力参数是由美国医疗器械使用促进会（AAMI）正式颁布，中国《消毒技术规范》引入规范，得到国内外认可。在这些文件中，对该生物指示剂的制备、使用和结果判定都作出明确规范。①每个菌片染菌量为5× 105～5×106个枯草杆菌黑色变种芽孢，即描述为（5×105～5×106）cfu／片；②该生物指示剂抗力标准是在环氧乙烷用量为（600± 30）mg／L，相对湿度60%±10%，54℃条件下，每个菌片存活时间≥7.8min，杀灭时间≤58min，D10值2.6～5.8min。

2.监测方法

（1）布放指示剂：取枯草杆菌黑色变种芽孢菌片或自含式指示菌管，一式2份；在标准包实验条件下，将指示剂放于20ml注射器套管内，再将注射器芯放回原位，不带针头和针套，然后放入试验包内中层中央。该试验包是由4条清洁晾干的全棉布手术巾，将每条手术巾折成3折（层），再对折，将折好的4条手术巾重叠在一起，外用2条清洁棉布巾或无纺布巾包裹，再用指示胶带贴封即成为标准测试包。也可在正常灭菌条件下进行生物监测，这是将菌片或指示管放入灭菌包内中心位置。同时将阳性对照置于柜外相同环境内。

（2）灭菌处理：将标准包或放指示剂的物品包放于灭菌物品中央部位，一般是放到灭菌柜内较难灭菌的位置，靠近柜门处。其他灭菌物品按规定摆放，使达到装载量的80%～90%。按常规设定参数启动灭菌程序，到灭菌结束并排气完毕，取出灭菌试验包。

（3）接种培养：在具有100级洁净条件下打开灭菌包，取出菌片，每片菌片接种1支营养肉汤管，连同阳性对照管一并置于37℃培养1周；自含式指示管可直接从试验包内取出，夹碎指示管内玻璃瓶，使安瓿内培养液流出浸泡菌片，培养48h；每日观察记录结果。

（4）结果判定：试验组菌片全部无菌生长，阳性对照生长正常，判定为灭菌合格。若试验组与阳性对照组均有菌生长，判定为灭菌不合格；若试验组与阳性对照组都不长菌，则监测失败。

（5）布样点数和监测频率：放多少监测点要视灭菌器容积大小而定，原则要求布点数能包括最难灭菌部位。医院使用的小型环氧乙烷灭菌器容积多数在300L以下，布放1个点即灭菌物品包中央即可。工业用环氧乙烷灭菌柜监测点数可根据容积大小确定，如5m3以下灭菌柜布放10个点；5～10m3灭菌柜按照每增加1m3就增加1个点；10m3以上容积的灭菌柜，每增加2m3就增加1个点。

关于监测频率尚没有硬性规定，AAMI和美国议员协会（AHA）都要求每次灭菌都应放生物指示剂监测包，也有要求灭菌器内装有移植物应常规放生物指示剂，以便培养记录在案。中国《医院感染管理规范》要求环氧乙烷灭菌器应每月进行1次生物监测。

【化学监测】

1.化学指示剂　环氧乙烷灭菌效果监测化学指示剂国内都有商品进入市场，主要有化学指示卡、化学指示胶带和包外指示标签。这些指示剂上印制的指示色块是由某些能与环氧乙烷气体反应后产生颜色变化的化合物和其他辅助成分组成的配方，制成的印墨印制而成。目前，多数企业生产的环氧乙烷消毒效果化学指示剂印墨是利用环氧乙烷能与镁盐反应生成碱性物质即氢氧化镁，再辅以显色指示剂，变成肉眼可见的颜色反应。

（1）显色技术要求：所有化学指示剂色块都是在规定的灭菌参数条件下，色块变成指示终点色；而这种终点色的设定是依据生物指示剂抗力变化规律作为参考标准。该类指示剂色块（条）变色条件是环氧乙烷使用浓度为（600±30）mg／L，相对湿度为50%～70%，作用温度为30℃±1℃条件下，变成终点色的时间为＞5min和＜30min。

（2）种类：环氧乙烷灭菌化学指示剂种类有化学指示卡，化学指示胶带和指示标签和指示条。指示卡是将印墨印制在硬纸条的一段，呈圆形或长条形色块，一般不设标准色（应当有标准色以方便判断的科学性）；指示胶带是将印墨在特殊单面蘸胶纸上印制成条纹状；指示标签或指示条是在环氧乙烷专用纸塑包装袋的纸质面外面印制指示色标。

2.使用方法

（1）指示剂用途：指示卡作为包内使用，每包必放；指示胶带作为包外贴封，起到灭菌与否的标志；带有知识色条或标签的纸塑包装袋内不必再放指示卡。

（2）使用：将装有指示卡的灭菌包或带色条的纸塑包装袋，按常规放于灭菌器内，依照设定程序启动灭菌器，完成灭菌周期之后，可以观察结果。

3.结果判定　纸塑包装袋可直接观察到指示色条颜色变化，灭菌包内指示卡则要在使用时打开灭菌包观察并记录结果。环氧乙烷指示剂色块或色条的颜色，化学指示胶带色条是由淡黄色变成橙色判定为合格；包内化学指示卡和纸塑包装外色块是由红色变成蓝色，判定为合格。通过化学监测，了解环氧乙烷气体在灭菌过程中穿透情况及其分布均匀性和环氧乙烷作用剂量，间接判定消毒效果。指示胶带作为包外监测，指示卡作为包中心的监测。