医院内空气消毒效果监测

医院内空气微生物学监测应用日趋广泛，必要性愈来愈突出。医院内空气微生物监测主要是针对医院感染控制而了解空气污染程度和致病菌分布，还针对空气洁净效果的掌握。医院空气监测的重点部门是手术室、供应室、ICU、SICU、血透室、器官移植病房、烧伤病房、门诊、治疗室、洁净实验室、无菌室等有关区域内空气都是空气污染监测和空气消毒效果监测。

【采样时机】

1.常规监测　定期、定部位、定时间做目标内空气样品采集，进行微生物学检验。

2.病原学调查　在医院发生空气传播医院内感染流行时进行病原学调查，及时采集疫点内空气样品做病原学检验。

【采样方法】

1.仪器采样法　医院内空气监测精确的采样方法仍是仪器采样法，特别是对空气中微生物粒子的监测数据比较接近实际。目前，国内医院空气微生物监测中比较适合的空气采样器有“JWL型空气采样器、LWC-1型采样器和Anderson采样器等，现以JWL－ⅡB型空气微生物监测仪为例介绍空气微生物仪器法采样实施步骤。

（1）采样平板制作：取该仪器专用平皿彻底洗涤干净、晾干包装灭菌后备用，倒入熔化冷却至45～50℃灭过菌的营养琼脂培养液4.5ml，冷却凝固之后置于37℃温箱内培养24h，选无菌生长的平皿使用。

（2）采样：打开气罩、去掉端盖、装上采样皿再拧上端盖；选好采样位标、接通电源、定时、启动采样开关进行采样；采样结束、关闭电源、取出采样皿置于37℃温箱内培养24～48h、观察结果并记录培养皿上菌落形成单位（cfu）。计算：

cfu／L＝平皿菌落数（N）／流量×

采样时间（min）或cfu／m3＝平皿菌落数（N）×1　000／流量×

采样时间（min）

仪器法采样适合于各种场所和各种微生物，结果比较符合实际。采样位点可参考自然沉降法的采样点，采样高度可用三脚架升降，一般不低于1m。

2.自然沉降法

（1）采样平板制作：用灭菌后的普通营养琼脂培养液和沙氏营养琼脂培养液熔化后冷却至45～50℃，倒入9cm直径的无菌平皿内，每个平皿倒18～20ml，盖好；在室温下冷却凝固后，反转放于37℃温箱内培养24h，选出无菌生长的平板作为采样用。

（2）采样点选择：＜30m2的房间为3点，选房间的对角线内中外位置；30m2以上房间内设5点，在房间内4角和中央各1个点；更大的房间如大病房、门诊大厅、生产车间等场所，在相应的方位上适当增加采样点；空气采样要求采样点的采样皿放置高度距离地面1m，靠墙边的采样点要距离墙壁30cm以上但不超过1m。

（3）采样皿布放方法：将采样皿按位置编号或注明之后，在房间由内向外按顺序将采样皿打开放到采样点上，把平皿盖放在侧边，切勿将盖反转。

（4）暴露时间：采样暴露时间应根据测定环境内空气洁净度要求和测定目的而定。在生物洁净室和百级洁净手术室、洁净病房内可连续暴露24h或更长，以便得到更准确的结果。普通场所暴露时间可在5～30min选择，一般以15min为宜；污染比较严重的场所暴露5min即可。

（5）培养和结果计算：采样暴露时间结束之后，将平皿盖盖好，反转放于37℃温箱内培养24～48h；沙氏培养液采样皿放于30℃培养24～72h，记录下各培养皿上菌落形成单位（cfu），代入计算公式计算。自然沉降法原始计算公式为：

每立方米空气中含菌量＝5　000N／AT

此公式提出基本上属于经验公式，它规定5min沉降在100cm2面积上细菌颗粒总数，约等于10L空气中所含的菌数。为了使此公式适用于不同大小的采样面积和不同的采样时间，将10L换算成1　000L（m3），奥氏公式改良成：

每立方米空气含菌量＝50　000N／AT

式中N代表平皿内沉降的平均菌落数，A和T分别代表采样皿面积（cm2）和采样时间（min）。但值得注意的是由于空气中微生物颗粒的沉降受环境条件、颗粒大小、粒数中值直径等多种因素的影响，所以一些洁净环境内不仅菌数含量少、而且粒数中值直径小、小的颗粒捕获不到，用上述公式计算的结果要比实际含菌量明显偏低，这已被大量的实验结果所证明。所以，使用自然沉降法必须注意：此方法不适合于洁净室和洁净病房内采样；作为一般室内空气采样包括空气消毒方法考核误差亦比较大。

根据《消毒技术规范》规定，≤30m2房间内设3个点，＞30m2房间内设5个点。但根据新出版的一些专业著作记载，经过大量研究证明，自然沉降法采样受诸多因素影响，除粒子大小、密度、形状等因素之外，采样时间和采样点是重要因素，而且证明采样点少、采样时间短，所测定的结果误差会增大。自然沉降法不适合100级洁净度条件下监测。

（杨华明　王长德）

参考文献

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5　杨华明，等.压力蒸汽消毒效果监测方法的正确使用.中华医院感染学杂志，1997，7（2）：124

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7　辛桂英，等.132℃压力蒸汽灭菌化学指示卡效能测试.中国消毒学杂志，1997，14（1）：13

8　Philip M，et al.Performance of various steam sterilization indicators under optimum and suboptimum exposure conditions.AJIC，2005，33（5）：S55