研究和观察细菌个体,必须对细菌进行培养、分离和纯化,然后方可对某种细菌进行研究观察。一般从自然界分离细菌过程包括采样、培养、分离、纯化和增殖,然后可进行细菌各种特性研究。
【培养液】
细菌培养液按状态有液体、固体、半固体培养液,按性质有合成培养液,天然培养液,细胞培养液和动物模型,按功能有鉴别培养液、选择培养液和种子培养液。
【培养方法】
1.接种
(1)接种工具:白金针,白金耳(环),微量吸管、毛细吸管均为常用接种工具。
(2)接种方法:转种,将培养物转种到新的培养液上,目的是为了增菌、保存菌种,检验等;分离,划线接种,稀释接种,涂抹接种,倾注接种等。
2.培养
(1)有氧培养:一般利用平板和斜面,适用于需氧菌和兼性厌氧菌。
(2)厌氧培养:利用隔绝空气或驱除空气的方法实现无氧环境,实验室多用二氧化碳培养箱,工业上常用厌氧罐进行培养。
【检测方法】
1.镜检观察形态
(1)直接镜检:取得含菌标本或专门培养的细菌培养物,可直接用白金耳或针蘸取少许标本置于玻片上,于光学显微镜下观察,主要是观察有无细菌存在,不太容易观察到。
(2)染色检查:利用革兰染色或其他染色方法,把经过适当处理过的含菌标本置于玻片上涂抹开、固定、染色,然后在光学显微镜下观察细菌染色性质和细菌形态。
2.镜检活菌计数
(1)直接计数法:镜下计数法,比浊法,平板计数法,测重量法、电子计数法。
(2)间接计数法:细菌菌体组分含量测定法,包括测定DNA含量、蛋白质含量、ATP含量;测定培养液营养成分消耗量,测定代谢产物含量等。
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