枯草杆菌黑色变种芽孢

【生物特性】

枯草杆菌黑色变种（bacillus substilis ver niger，ATCC　9372）芽孢属于枯草杆菌种群中的一个变种，其主要生物学特性与普通枯草杆菌相同，但亦有其独特之处。

1.形态特征　在显微镜下可以见到，枯草杆菌黑色变种为短粗壮杆菌，呈单个或链状排列，革兰染色为阳性杆菌。经过专门芽孢染色，在镜下可见到其芽孢位于菌体中央，不膨出菌体。

2.培养特征　在普通营养培养液上生长良好，适宜生长温度为30～37℃。在普通营养肉汤内培养24h后可见到肉汤液面上及试管壁上形成菌膜并可见到絮状沉淀，而肉汤深层澄清透明，但轻轻摇动即现浑浊；在营养琼脂培养液上培养24h生长出红棕色、边缘不整齐、表面粗糙湿润的菌落（S形菌落表面光滑呈浅棕色），最初菌落呈棕色逐渐变成红棕色，随着培养时间延长菌落中心逐渐出现黑色溶解性色素，可溶于培养液内使其变黑色。在固体培养液上培养48h后，逐渐有芽孢形成，培养3～5d细菌芽孢形成率逐渐达到90%以上。

3.生化特征　表现出典型的枯草杆菌生化特性，为兼性需氧菌。V-P反应阳性，枸橼酸盐反应阳性，可还原硝酸盐、液化明胶，分解葡萄糖，聚β羟基丁酸盐颗粒阴性。

4.抗力特征　枯草杆菌黑色变种芽孢对100℃流通蒸汽能耐受4min；对干热的抗力，在（160±2）℃，染菌量为5×105～5×106 cfu／片等条件下，存活时间≥3.9min，杀灭时间≤19min，D值1.3～1.9min。对600mg／L有效氯的优氯净可耐受20min，4　000mg／L过氧乙酸能耐受1min，50g／L甲醛可耐受60min。对环氧乙烷的抗力，在用药量为（600±30）mg／L，作用温度为（54±1）℃，相对湿度为60%±10%，每个菌片上染菌量为5×105～5×106cfu／片等条件下，存活时间≥7.8min，杀灭时间≤58min，D值2.6～5.8min。

【指示剂】

1.菌片　将5×105～5×106cfu／片定量污染在特定中型滤纸上，干燥后装入无菌透气性纸袋内，加外包装即可。经干热和环氧乙烷抗力测定，必须符合规定标准。

2.自含式生物指示剂管　在一个透明耐热的塑料管内，装入1片菌片至管底部；将1支装有恢复培养液的玻璃瓶装入塑料管内，加盖并在盖上留有透气孔，盖内加有滤膜，可防止微生物投入。

【用途】

（1）用于检测紫外线消毒效果。

（2）检测干热消毒效果。

（3）检测醛类消毒剂和环氧乙烷消毒效果。

（4）检测其他化学消毒剂杀菌效果。