铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)是非发酵菌科假单胞菌属中的主要种别,是临床上引起各种感染的主要致病菌之一。是肺部感染的首要病原菌,泌尿道感染中居第3位,手术切口感染与菌血症中居第4位。
铜绿假单胞菌为革兰阴性杆菌,菌体常呈多形性,有球杆状、长丝状,成对或成短链排列,菌体长短不一、一般为(1.5~3.0)μm× 0.5μm。菌体一端有一根鞭毛,运动活泼,菌体周围有性菌毛,无芽孢无荚膜。其属专性需氧菌,部分能兼性厌氧生长。生长温度20~24℃,最适为35℃,但在4℃不生长,可与荧光假单胞菌鉴别。普通培养液生长良好。经18~24h培养,形成圆形大小不一、边缘不整齐,扁平、隆起、光滑、湿润之菌落,琼脂被染成绿色或黄绿色,临床分离株有部分不产生色素。在血琼脂平板上经18~24h培养,可形成扁平、湿润、有金属光泽,有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落,菌落周围有透明溶血环。在肉汤中经37℃18~24h培养,液面上可生长出菌膜,液体深部微浑或透明,菌液上层为蓝绿色。
【标本采集】
1.人体标本 患者的血液、脑脊液、胸(腹)水、关节囊液、脓液、分泌物、尿、粪便、痰液、十二指肠引流液。
2.医院环境标本 如空气、水、地面、门把手、医疗器械或生活用品等。
【检验程序】
详见图31-7。
图31-7 铜绿假单胞菌检验程序
【分离培养】
分离培养脑脊液等无污染的标本可直接接种在血琼脂平板进行分离培养;血液以及医院环境等采集的标本可先增菌后进行分离培养;可能污染机会多的标本应使用选择性培养液如SS、麦康凯琼脂平板进行分离培养。
【菌种鉴定】
该菌鉴定较易,识别菌落特征、色素、气味,结合涂片染色结果,氧化酶试验阳性,一般可作出初步鉴定。也可采用非发酵菌试剂盒,根据生化反应结果编码后做出最后鉴定。并可依照血清学进行分型。
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