流感嗜血杆菌

（一）主要特征

流感嗜血杆菌（hemophilns influenzae）是人类呼吸道的正常菌群之一。所致感染主要累及上呼吸道及支气管肺系统，并可发生脑膜炎、败血症、结合膜炎、女性生殖道感染等侵袭性感染。

流感嗜血杆菌是革兰阴性小杆菌（着色困难），是嗜血杆菌属的一种，大小为1.5μm× 0.3～0.4μm，两端钝圆。从病灶中新分离的菌株呈球杆状或双球状，有时可呈短链。无动力、无芽孢，为需氧或兼性厌氧。最适生长温度为37℃，pH　7.6～7.8，在普通琼脂上不生长，最适宜巧克力琼脂平板（因生长需要Ⅹ、Ⅴ两种因子）。经37℃培养18～24h后，菌落微小，直径0.5～0.8mm，圆形、光滑、湿润、边缘整齐呈露滴状，48h后菌落可达1.5mm，为灰白色菌落。与金黄色葡萄球菌一起培养时，靠近葡萄球菌菌落的流感杆菌菌落较大，远离葡萄球菌的菌落较小，这种现象称为“卫星现象（satellite phenomenon）。在液体培养液中，有荚膜的菌株呈均匀浑浊生长，而无荚膜的菌株呈颗粒状沉淀生长。典型的流感杆菌不溶血，能产生自溶酶，可被胆汁溶解。

（二）细菌学检查

【标本采集】

根据不同感染，分别采取血液、脑脊液、鼻咽分泌物、痰液、脓汁等标本。采集标本时要注意：

（1）尽量在疾病的早期采集标本，应立即送检。

（2）鼻咽拭子应在取标本前以肉汤湿润，取样后，送往实验室过程中防止干燥。标本送至实验室应立即接种。

（3）对心内膜炎、菌血症、败血症患者采取血液标本，最好在发热期间。

（4）痰标本应先用无菌生理盐水洗3次，然后将痰块打碎制成悬液。若痰块太硬，可加入等量10g／L的胰蛋白酶，于37℃水浴0.5～1h，将痰块消化后再接种。

【检验程序】

详见图31-8。

图31-8　流感嗜血杆菌检验程序

【检验方法】

1.直接涂片检查　痰、脓汁、鼻咽分泌物可直接涂片，脑脊液可离心后取沉淀物涂片、革兰染色后镜检。也可做荚膜肿胀试验，测定其血清型。

2.分离培养　血液、脑脊液可先接种营养肉汤增菌后，再行分离培养。其他标本可直接划线接种于巧克力琼脂平板或兔血琼脂平板。

3.血清学试验　有直接荧光素标记抗体法、荚膜肿胀试验、沉淀试验等。

【菌种鉴定】

（1）巧克力琼脂平板生长旺盛，为无色透明湿润的菌落。

（2）兔血琼脂平板上菌落细小露滴状，在斜射光线上呈特殊闪光色彩；卫星现象阳性；血清肉汤及普通琼脂平板不生长；革兰阴性小杆菌或呈多形态性；Ⅹ、Ⅴ因子需求试验。