血清学水平的检测

血清学水平检测指的是通过采集血液标本进行TM测定，其突出的优点是可以反复采样及反复检测，较组织细胞TM只能通过病理切片的特殊染色来完成，血清学检测更适合临床确定诊断和跟踪观察的需要。

血清学水平检测还通过B淋巴细胞杂交瘤技术的应用，制备出多种抗肿瘤的单克隆抗体（McAbs），所以，凡McAbs所针对的抗原（均为肿瘤相关抗原），都可用此法得到检测。但这些McAbs检测试剂的敏感性和特异性还都不十分理想。不过，临床实践提示，只要合理应用，并与其他诊断手段所得的资料进行综合分析，对于确定诊断、观察治疗效果与监测肿瘤复发和转移，能够起到辅助作用，尤其在判断复发中，可较影像学检查提前半年至一年，甚至一年半。

传统的血清学检测方法为酶免疫测定（EIA）（后来改进为酶联免疫分析，ELISA）和放射免疫测定（RIA）方法，二者都是利用抗体和抗原的特异性结合的特点进行测定，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应的抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将抗原或抗体用可以微量检测的标志物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标志，则与标本中相应的抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物本身，而测定复合物中的标志物，通过标志物的放大作用进一步提高免疫技术的敏感性。这就是免疫组化技术（immunohistochemical telchnique）。这一技术还可用于组织切片或其他标本中抗原或抗体的定位。因为所用标志物不同而出现不同的命名，如以荧光素为标志物的检测就叫荧光免疫测定（FIA）。

EIA的敏感度与RIA相仿，但信噪比的范围远远不及后者，这是RIA的突出优点。RIA却因受到放射性核素半衰期的限制，标志物应用时间短，操作者还需有严密的防护措施，这就影响了RIA的使用，而酶标志物的保存期可长达2年以上，所以一般检测单位都采用EIA。但RIA的上述突出优点，至今有的单位仍保留使用。

放射免疫学的范围内，在酶免疫检测的基础上，出现发光免疫分析法。这是将发光分析和免疫反应结合而建立的一种新的超微量分析技术，根据发光反应的不同体系和标志物、标记方法，可分为：①化学发光反应分析（CLIA）：以化学发光物标记抗原或抗体，免疫反应后直接引发化学发光反应进行检测；②化学发光酶免疫反应（CLEIA）：用参与某一发光反应的酶标记抗原或抗体，免疫反应后加入发光试验，测定发光体系的发光强度，以测定抗原或抗体；③生物发光免疫检测（BLIA）：利用生物发光物质或参与生物发光反应的辅助因子标记抗原或抗体，免疫反应后用生物发光反应进行检测；④电化学发光反应分析（ECLIA）：是一种在电极表面由电化学引发的化学反应，包括电化学和发光两个过程。

FIA曾经是一种先进的技术。开始时使用经荧光素标记后的抗体与组织细胞进行反应，可在荧光显微镜下检查抗原表达的部位；后来通过流式细胞仪（fluow cytometry）进行细胞周期时相和倍体分析；再后来，与单克隆抗体结合，可对细胞的表型进行分析，以得到有关抗原在单个细胞上量的表达信息。一种名为细胞微球试验（CBA）的新流式细胞检测技术，可利用包裹了特定抗体的荧光微球去捕获各种体液内的脱落细胞、细胞分泌或裂解所释放的细胞因子和可溶性蛋白，通过流式细胞仪确定，利用此法可为白血病、淋巴瘤等多种疾病的诊断提供快速、灵敏的检测。

放射免疫显像（RII）是以放射性核素标记抗肿瘤单克隆抗体，将此标记抗体注入患者体内，用示踪系统获取与抗体结合后的肿瘤细胞分布情况，这一技术还被用于手术中，以此跟踪指导切除部位的范围，从而出现了放射免疫导向手术（RIGS）的新技术。

自20世纪90年代以来，国际上许多公司不断推出各种自动化的免疫分析系统，在抗原-抗体的基本原理下，运用了各种先进技术，有微粒子荧光偏振、化学发光、电化学发光以及时间分辨荧光等。这些设备简易、方便，稳定，减少操作中的人为误差。

目前，在国内主要有3类全自动免疫化学分析系统（化学发光免疫分析系统、荧光免疫分析系统和电化学发光免疫分析系统），广泛地应用于临床，对血清肿瘤标志物检测具有快速、准确、半定量等功能。可检测的TM有：AFP、CEA、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、fPSA等血清及血浆标本的检测，是临床上应用最广的检测手段。