(一)正常人体形态学的研究技术和方法
1.人体标本制作技术 为了学习和研究正常人体的形态结构,需要把人的遗体制作成示教标本和陈列标本,人体标本首先要进行固定,常用的固定液为10%甲醛(福尔马林)溶液,经血管灌注后,把标本浸泡在10%的甲醛(福尔马林)溶液中长久保存。在标本上正确暴露各种器官、组织的形态结构,如神经、脉管、肌肉、内脏器官等,能使学习者正确掌握人体的形态结构;制作好的解剖标本,可作为临床应用,特别是为外科手术提供直观的参考依据;通过标本制作可以发现形态结构的异常,如血管、神经的变异和器官畸形等。
2.光学显微镜技术 利用光学显微镜,可将物体放大到40~1 500倍,可以观察到细胞、组织的微细结构,观察各种不同的正常细胞形态结构,如细胞膜、细胞质、细胞核、细胞器等,研究病变状态下损伤和变异的组织、细胞形态结构。应用光学显微镜技术时,需要把组织制成薄片,以便光线透过,才能看到组织结构,最常用的薄片是石蜡切片,其制备程序需经过以下几个步骤。①取材、固定:将新鲜组织切成小块,放入10%的甲醛溶液中进行固定;②脱水、透明和包埋:组织块经乙醇脱水,二甲苯透明,包埋入石蜡中,使柔软的组织变成有一定硬度的组织蜡块;③切片、染色:用切片机将埋有组织的蜡块切成4~5μm的薄片,粘贴于载玻片上,经脱蜡后进行染色,最后用树胶加盖玻片封固,就可观察镜下的组织结构。常用的染色称苏木精-伊红染色(又称HE染色)。
3.苏木精-伊红染色(HE染色)技术 染色是用染料使组织切片染色,便于显微镜下观察,常用的染色称苏木精-伊红染色(又称HE染色),含有碱性助色基团的染料称碱性染料,常用的是苏木精,含有酸性助色基团的染料称酸性染料,常用的是伊红。苏木精与细胞核亲和力强,使细胞核着色,染成蓝紫色,称嗜碱性;伊红与细胞质、细胞基质、间质内的胶原纤维亲和力强,使其着色,染成粉红色,称嗜酸性。用HE对组织切片进行染色,使细胞核浆对比分明、色彩鲜艳、层次丰富。
4.电子显微镜技术 电子显微镜虽与光镜不同,但基本原理相似。电镜是以电子发射器代替光源,以电子束代替光线,以电磁透镜代替光学透镜,最后将放大的物像投射到荧光屏上进行观察。常用的电镜有透射电镜和扫描电镜。
(二)异常人体形态学(病理学)的研究方法
1.活体组织检查 简称活检,即用手术的方法(包括切取、钳取、细针吸取和摘取等)获取患者病变部位的组织,制成切片,在光学显微镜下观察,做出病理诊断。这是目前临床上最常用的检查方法。其意义在于对疾病的诊断、治疗和预后都具有积极的指导作用。特别是对良、恶性肿瘤的判断,活检是一种可靠的诊断方法。
2.尸体解剖检查 简称尸检,即对死者的遗体进行病理解剖,通过具体的、系统的观察和研究脏器的病理变化,以查明死亡原因。此方法特别对临床疑难病症诊疗水平的提高,医学资料的积累,传染病的及时发现,以及教学科研教学标本的收集等都具积极作用。因此是病理学的主要研究方法之一。
3.细胞学检查 即通过采取病变处组织表面脱落的细胞、穿刺、抽取的细胞或混悬于各种体液(胸腔积液、腹水、尿、痰等)中的细胞制成涂片,染色后进行镜下检查,做出细胞学诊断。细胞学检查多用于肿瘤筛查,此法设备简单,操作简便,患者痛苦少而易于接受,但要确诊,须进一步复查,并做活检证实。
4.动物实验和相关技术 用人工方法在动物身上复制各种疾病模型,并通过某种疾病的复制过程,用病原学、生理生化学、免疫形态学、细胞分子生物学和遗传学等实验方法,以研究疾病的病因学、发病学、病理变化及疾病的转归,或治疗性干预(如药物应用)后机体功能、代谢、形态等的转变,为临床防治疾病提供依据。
5.组织细胞及相关技术 包括组织和细胞培养、免疫组织化学等。
(1)组织培养和细胞培养:将某种组织或单细胞用适宜的培养基在体外培养,可以研究在各种病因作用下不同细胞、组织病变的发生和发展与疾病的关系。近年来通过体外培养建立了不少人体和动物细胞系(株),特别是肿瘤细胞系(株),这对肿瘤和其他疾病的细胞生物学特征和分子水平的研究起到积极的作用。
(2)免疫组织化学:是一种把免疫学原理及技术应用于研究组织细胞形态的技术。其原理是利用已知的抗体或抗原,通过特异性结合反应来检测病损组织细胞中未知的抗原或抗体,从而进行病理诊断和鉴别诊断,以及阐明发病的免疫学机制。该技术的应用,在病理学研究方面发挥了非常重要的作用,极大地推动了免疫病理学研究的发展,并使人们对人类疾病的认识发生了根本性改变。
6.临床观察和病例分析 在不影响和损害身心健康的前提下,进行临床观察和必要的实验,可获得宝贵的临床资料。这对探讨疾病的规律与机制,寻求行之有效的防治措施是非常重要的。临床病理讨论是病理联系临床的很好学习方法。
思考题
1.试说出人体九大系统的名称。
2.异常人体形态学(病理学)的研究方法有哪些?
3.人体如何组成?
(张岳灿 马时荣)
免责声明:以上内容源自网络,版权归原作者所有,如有侵犯您的原创版权请告知,我们将尽快删除相关内容。