脐血的采集

所谓脐血（或称脐带血），是指婴儿娩出断脐后，残留在脐带和胎盘绒毛血管内胎儿体外部分的血，故也称胎盘脐带血。20世纪70年代，科学家们发现人脐带血中含有大量的造血干细胞。1988年，第一例脐带血代替骨髓移植治疗范科尼（Fanconi）贫血儿童获得成功，患儿至今健在。这一例手术的成功拉开了科学家们对“第三代细胞疗法”的研究序幕。研究表明，脐带血与骨髓造血干细胞的相对含量基本一致，但前者的组分似乎更有利于促进造血系统的再生。

【目的】通过采集脐血，分离后低温保存，在需要的情况下，经静脉输入至受者体内并植入骨髓，帮助患者重建造血功能，达到治疗或辅助治疗相关疾病的目的。

【优点】

1.脐带血中含有丰富的造血多能干细胞和祖细胞，其有利于造血重建的各大相关组分产率均接近或高于骨髓。但由于同一份脐血采集量有限，其中富含的造血干细胞数量仅可供体重40mg以下的儿童应用。

2.脐血造血干细胞具有高度的自我更新及增殖分化能力。与骨髓相比，可在体外长期维持造血功能。

3.免疫表型不成熟，免疫细胞的抗原性弱。脐带血中淋巴细胞大多为幼弱型T细胞，功能不成熟。HLA配型不合的供受者之间的移植，相对于同类骨髓移植，发生移植物抗宿主病（GVHD）的概率低且症状轻。

4.脐带血造血干细胞能够长期低温保存，可作为自体移植储备之用。

5.脐带血采集不会对供者造成任何痛苦或不良影响，其来源丰富，可通过建立脐血库寻找HLA相合的供体。

【操作方法】脐血采集法有半闭合式（玻璃瓶采血法）、密闭式、开放式和导管法4种。目前多采用密闭式，也即一次性无菌塑料采血袋采血法。其主要步骤为：

1.婴儿娩出后，立即用两把止血钳在距脐轮2～3cm处夹住脐带，用无菌剪刀在两钳间近脐轮端剪断脐带，将脐带放入消毒巾上。

2.无菌取出采血袋，将靠近针头的采血胶管处打一环形松结，从采血针上取下护针套管，在已消毒的脐带上做脐静脉穿刺。脐带中脐动静脉呈品字形排列，脐静脉管腔较大，外观管壁较薄，浅显可见，常有静脉窦扩张处，无波动。脐动脉较细，呈螺丝状，有明显的波动。

3.将乳胶管上的红色夹子放松，使血液由重力作用流入采血袋。

4.不时摇动采血袋，使胎盘血与保存液充分混合。

5.采血完毕后立即在采血袋与血袋连接处卡上一个卡子，拔出采血针，将采血管上的环形松结拉紧。

6.在上述卡子后面打一紧结或用封口机结扎，以提供足够的血样管段，供配血及其他检验用。整个过程可在胎盘娩出前或娩出后进行，两者之间采集量无显著差异。

【处理和冷冻保存】使用新鲜脐血做Allo-HSCT的时机极不容易掌握，即使有可能，应注意在ABO血型主要或主次要均不合的情况下，也需对脐血去除红细胞。

一般情况下，需将脐血深低温保存，为减少冷冻保存标本的体积及避免以后可能的无关受者出现供受者ABO血型主要或主次要不合的情况，需对脐血细胞进行单个核细胞（MNC）的分离。因脐血量少，多不足200ml，不适于使用血细胞分离机，故常采用二步离心法或羟乙基淀粉二次沉淀法分离MNC。

保存：不论使用程序降温仪或-80℃冰箱法，最后均应由-80℃环境移入液氮-196℃保存，使之可长期备用。

【回输及护理】同外周血造血干细胞一节。在供受者HLA配型完全相合情况下，要求输往的脐血中MNC最低应＞2×107/kg，最好在5×107/kg以上。如供受者HLA配型1～2个位点不相合的情况，要求输注的脐血中MNC数量应进一步提高，以利于植入。

（柴燕燕　赵　洁　赵　芳）