【目的】 学习多信号记录技术,观察刺激坐骨神经频率改变时,骨骼肌肌膜动作电位、骨骼肌收缩形式和张力的变化。观察分析神经-肌肉接头兴奋传递、骨骼肌肌膜动作电位与骨骼肌收缩的特点及相互关系。加强对多个知识点的综合运用能力,强化组员间的协作。
【原理】 刺激坐骨神经引起其中支配腓肠肌的神经纤维兴奋,通过神经-肌肉接头处的传递引起腓肠肌兴奋(动作电位),再通过兴奋收缩耦联过程引起腓肠肌机械性收缩。
【材料】 蟾蜍或蛙;蛙类手术器械,任氏液,腓肠肌固定屏蔽盒,微调固定器,棉花,甘油,张力换能器和计算机生物信号采集处理仪等。
【方法】
1.制备蛙(蟾蜍)离体坐骨神经腓肠肌标本,浸入任氏液备用。
2.装置连接。将离体坐骨神经腓肠肌标本固定在屏蔽盒中,腓肠肌的跟腱结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上,坐骨神经放在刺激电极上,保持神经与刺激电极接触良好,棉花引导电极放置在腓肠肌上,接触良好(图4-22)。
图4-22 骨骼肌兴奋时的电活动与收缩的关系实验装置
3.仪器参数设置
(1)RM6240系统:点击“实验”菜单,选择“肌肉神经”中的“肌肉兴奋-收缩时相关系”项目。仪器参数见表4-1。定时刺激、双刺激,采用最大刺激幅度,刺激波宽0.1ms,刺激频率1~500Hz,刺激时间0.1~0.3s,重复1次,系统工作界面见图4-23。
表4-1 RM6240系统仪器参数
图4-23 RM6240系统骨骼肌兴奋时的电活动与收缩的关系界面
(2)MedLab系统:在“实验/常用生理学实验”中选择“骨骼肌兴奋时的电活动与收缩的关系”进入该实验记录状态。
【观察项目】
1.启动刺激,连续记录。观察不同刺激间隔情况下腓肠肌的收缩曲线、动作电位波形和刺激标记三者之间的时间关系,计算刺激间隔等于500ms时动作电位起点到肌肉收缩起点的时差。
2.测量腓肠肌不完全强直收缩和完全强直收缩时的刺激波间隔。
3.测量第二个动作电位消失时的波间隔。
4.观察兴奋收缩去耦联现象:用浸泡甘油的棉花包裹腓肠肌,每隔30s用单刺激刺激标本一次。记录出现有动作电位无腓肠肌收缩的时间。
【注意事项】
1.本实验相对难度较大,小组成员间应加强合作,并充分考虑实验中可能出现的问题,共同商议解决措施。
2.余同本章实验二、三。
思考题
1.结合本实验分析肌肉收缩的潜伏期形成的原因有哪些?
2.甘油引起兴奋收缩去耦联的机制是什么?
(李伟东 卢 波)
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