临床常用免疫学检测

（一）血清免疫球蛋白检测

1．免疫球蛋白G检测

【参考值】　成人血清IgG：7．0～16．6g／L。

【临床意义】

（1）生理性变化：胎儿出生前可从母体获得IgG，在孕期22～28周间，胎儿血IgG浓度与母体血IgG浓度相等，出生后母体IgG逐渐减少，到第3、4个月胎儿血IgG降至最低，随后胎儿逐渐开始合成IgG，血清IgG逐渐增加，到16岁前达到成人水平。

（2）病理性变化

①IgG增高：IgG增高是再次免疫应答的标志。常见于各种慢性感染、慢性肝病、胶原血管病、淋巴瘤以及自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关节炎等；单纯性IgG增高主要见于免疫增殖性疾病，如IgG型分泌型多发性骨髓瘤（MM）等。

②IgG降低：见于各种先天性和获得性体液免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、重链病、轻链病、肾病综合征、病毒感染及服用免疫抑制剂的患者。还可见于代谢性疾病，如甲亢和肌营养不良也可有血IgG浓度降低。

2．免疫球蛋白A检测

【参考值】　成人血清IgA为0．7～3．5g／L；SIgA为唾液平均为0．3g／L，泪液为30～80g／L，初乳平均为5．06g／L，粪便平均为1．3g／L。

【临床意义】

（1）生理性变化：儿童的IgA水平比成人低，且随年龄的增加而增加，到16岁前达到成人水平。

（2）病理性变化

①IgA增高：见于IgA型MM、SLE、类风湿关节炎、肝硬化、湿疹和肾脏疾病等；在中毒性肝损伤时，IgA浓度与炎症程度相关。

②IgA降低：见于反复呼吸道感染、非IgA型MM、重链病、轻链病、原发性和继发性免疫缺陷病、自身免疫性疾病和代谢性疾病（如甲亢、肌营养不良）等。

3．免疫球蛋白M检测

【参考值】　成人血清IgM：0．5～2．6g／L。

【临床意义】

（1）生理性变化：从孕20周起，胎儿自身可合成大量IgM，胎儿和新生儿IgM浓度是成人水平的10%，随年龄的增加而增高，8～16岁前达到成人水平。

（2）病理性变化

①IgM增高：见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节炎、SLE等。由于IgM是初次免疫应答中的Ig，因此单纯IgM增加常提示为病原体引起的原发性感染。宫内感染可能引起IgM浓度急剧升高，若脐血中IgM＞0．2g／L时，表示有宫内感染。此外，在原发性巨球蛋白血症时，IgM呈单克隆性明显增高。

②IgM降低：见于IgG型重链病、IgA型MM、先天性免疫缺陷症、免疫抑制疗法后、淋巴系统肿瘤、肾病综合症及代谢性疾病（如甲亢、肌营养不良）等。

4．免疫球蛋白E检测

【参考值】　成人血清IgE：0．1～0．9mg／L（ELISA法）。

【临床意义】

（1）生理性变化：婴儿脐血IgE水平很低，出生后随年龄增长而逐渐升高，12岁时达到成人水平。

（2）病理性变化

①IgE增高：见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类风湿关节炎、特异性皮炎、过敏性哮喘、过敏性鼻炎、间质性肺炎、荨麻疹、嗜酸性粒细胞增多症、疱疹样皮炎、寄生虫感染、支气管肺曲菌病等疾病。

②IgE降低：见于先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩张症等。

（二）肿瘤标记物检测

1．甲胎蛋白测定

【参考值】　放射免疫法（RIA）、化学发光免疫测定（CLIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）：血清＜25μg／L。

【临床意义】

（1）原发性肝细胞癌患者血清AFP增高，阳性率为67．8%～74．4%。约50%的患者AFP＞300μg／L，但约有18%的原发性肝癌患者AFP不升高。

（2）生殖腺胚胎肿瘤（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等）、胃癌或胰腺癌时，血中AFP含量也可升高。

（3）病毒性肝炎、肝硬化时AFP有不同程度的升高，通常＜300μg／L。

（4）妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg／L，分娩后3周恢复正常。胎儿神经管畸形、双胎、先兆流产等均会使孕妇血液和羊水中AFP升高。

2．癌胚抗原测定

【参考值】　RIA、CLIA、ELISA：血清＜5μg／L。

【临床意义】

（1）CEA升高主要见于胰腺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等患者。

（2）动态观察一般病情好转时，CEA浓度下降，病情加重时可升高。

（3）结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、肺气肿及支气管哮喘等也常见CEA轻度升高。

（4）96%～97%非吸烟健康人血清CEA浓度＜2．5ng／ml，大量吸烟者中有20%～40%的人CEA＞2．5ng／ml，少数人＞5．0ng／ml。

3．前列腺特异抗原测定

【参考值】　RIA、CLIA、ELISA：血清t－PSA＜4．0μg／L，f－PSA＜0．8μg／L，f－PSA／t－PSA比值＞0．25。

【临床意义】

（1）前列腺癌时60%～90%患者血清t－PSA水平明显升高；当行外科切除术后，90%患者血清t－PSA水平明显降低。

（2）若前列腺癌切除术后t－PSA浓度无明显降低或再次升高，提示肿瘤转移或复发。

（3）前列腺增生、前列腺炎等良性疾患，约有14%的患者血清t－PSA轻度升高（一般4．0～10．0μg／L），此时应注意鉴别。

（4）当t－PSA处于4．0～10．0μg／L时，f－PSA／t－PSA比值对诊断更有价值，若f－PSA／t－PSA比值＜0．1提示前列腺癌。

（5）肛门指诊、前列腺按摩、膀胱镜等检查及前列腺手术会引起前列腺组织释放PSA而引起血清浓度升高，建议在上述检查前或检查后数日、手术后数周进行PSA检查。

4．癌抗原50测定

【参考值】　免疫放射度量分析（IRMA）、CLIA：血清＜2．0万U／L。

【临床意义】

（1）增高见于87%的胰腺癌，80%的胆（道）囊癌，73%的原发性肝癌，50%的卵巢癌，20%的结肠癌、乳腺癌、子宫癌等。

（2）动态观察其水平变化对癌肿瘤疗效及预后判断、复发监测颇具价值。

（3）对鉴别良性和恶性胸、腹水有价值。

（4）在慢性肝病、胰腺炎、胆管病时，CA50也升高。

5．癌抗原72－4测定

【参考值】　CLIA、RIA、ELISA：血清＜6．7μg／L。

【临床意义】

（1）增高见于67%的卵巢癌、47%的大肠癌、45%的胃癌、40%的乳腺癌、42%的胰腺癌。

（2）CA72－4与CA125联合检测，可提高卵巢癌的检出率。

（3）CA72－4与CEA联合检测，可以提高诊断胃癌的敏感性和特异性。但是，正常人和良性胃肠道疾病的阳性率分别为3．5%和6．7%。

6．糖链抗原19－9测定

【参考值】　RIA、CLIA、ELISA：血清CA19－9＜3．7万U／L。

【临床意义】　胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病时血中CA19－9的水平可明显升高。

（1）目前认为，CA19－9是胰腺癌的首选肿瘤标志物，胰腺癌早期，当特异性为95%时，敏感性可达80%～90%，若与CEA同时测定，敏感性还可进一步提高。

（2）有5%～10%的人不表达Lewis类抗原，因此部分胰腺癌病人CA19－9的血清浓度不升高。

（3）诊断胆囊癌和胆管癌的阳性率为85%左右，胃癌、结肠癌为40%，直肠癌为30%～50%；但无早期诊断价值，对早期病人的敏感度仅为30%。

（4）连续检测对病情进展、手术疗效、预后估计及复发诊断有重要价值。

（5）急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性肝炎、肝硬化等，血清CA19－9也可出现不同程度的升高。

（6）若结合CEA检测，对胃癌诊断符合率可达85%。

7．癌抗原125测定

【参考值】　RIA、CLIA、ELISA：血清＜3．5万U／L。

【临床意义】

（1）CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中，不存在于黏液型卵巢癌中。卵巢上皮癌病人的CA125浓度可明显升高，早期诊断和复发诊断的敏感性可达50%～90%，故对诊断卵巢癌有较大临床价值，尤其对观察治疗效果和判断复发较为灵敏。

（2）盆腔肿瘤的鉴别：CA125可用于鉴别卵巢包块，特别适用于绝经后妇女。

（3）宫颈癌、乳腺癌、胰腺癌、胆道癌、肝癌、胃癌、结肠癌、肺癌等也有一定的阳性反应。

（4）3%～6%的良性卵巢瘤、子宫肌瘤病人血清CA125有时也会明显升高，但多数不超过10万U／L。

（5）肝硬化失代偿期血清CA125明显升高。

（6）生理状态下，如早孕期（3个月）CA125也可升高。

（三）自身抗体检测

1．类风湿因子的检测（RF）

【临床意义】　类风湿性疾病时，RF的阳性率可高达70%～90%，类风湿关节炎的阳性率为70%。IgG型与患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状有关，IgM型与IgA型的效价与病情有关，与骨质破坏有关。其他自身免疫性疾病，如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征、SLE、自身免疫性溶血、慢性活动性肝炎等也见RF阳性。某些感染性疾病，如传染性单核细胞增多症、结核病、感染性心内膜炎等也多呈现阳性反应。故本试验的特异性不高，应予鉴别诊断。

2．抗核抗体测定（ANA）　经典的ANA是指针对真核细胞核成分的自身抗体的总称。抗核抗体的荧光模型主要包括：①核均质型：与抗ds－DNA、抗组蛋白和核小体抗体有关；②核膜型：主要有抗核孔复合物和抗板层素两种抗体；③颗粒型：与抗U1－RNP、抗Sm、抗SS－A、抗SS－B等抗体有关；④核点型：少核点型即p80盘曲蛋白抗体；⑤多核点型即Sp100抗体；⑥着丝点型：与抗着丝点抗体有关；⑦核仁型：与针对核糖体、U3－RNP、RNA聚合酶的抗体、抗Scl－70抗体、PM－Scl抗体、抗原纤维蛋白抗体有关；⑧细胞周期相关蛋白与增殖细胞核抗原有关；⑨胞质抗体：与抗线粒体抗体、抗高尔基体抗体、抗溶酶体抗体、抗肌动蛋白抗体、抗Jo－1抗体等有关。

3．可提取性核抗原抗体谱测定　可提取的核抗原（ENA）由多种相对分子质量不同的多肽构成，即双链DNA、Sm、核糖体、Scl－70（Sclerosis－70）、Jo－1、SS－B（Siogren－B）、SS－A（Siogren－A）和RNP等。利用免疫印迹试验可以对这些抗原的自身（抗ENA）抗体进行检测，用来反映某些自身免疫病的状况。

不同的抗核抗体对应的Hep－2细胞的荧光核型特点及临床意义见表6－34。

表6－34　不同的抗核抗体对应的Hep－2细胞的荧光核型特点及临床意义

（续　表）

注：SLE，系统性红斑狼疮；DIL，药物性狼疮；MCTD，混合性结缔组织病；PSS，进行性系统性硬化症；Scl，硬皮病；PM，多发性肌炎；SS，干燥综合征；PBC，原发性胆汁性肝硬化；DM，皮肌炎；RA，类风湿关节炎

4．抗DNA抗体测定（ds－DNA，ss－DNA）

【结果判定】　短膜虫动基体均质性着色，核浆成弱均质性着色为阳性。

【临床意义】

（1）抗ds－DNA抗体阳性：见于活动期SLE，阳性率70%～90%。本试验特异性较高，但敏感性较低。目前认为，能结合补体的抗ds－DNA抗体在SLE特别是并发狼疮性肾炎患者的发病机制中起重要作用。其他风湿病中抗ds－DNA也可阳性。

（2）抗ss－DNA抗体阳性：见于SLE（阳性率70%～95%），尤其是合并有狼疮性肾炎。还可见于一些重叠结缔组织病、药物诱导的狼疮和慢性活动行肝炎等，但不具特异性。

5．抗Jo－1抗体检测

【结果判定】　Hep－2细胞胞质有斑点状荧光颗粒，细胞核的核浆也显示明显的斑点状颗粒。分裂期细胞在染色质周围呈散在的细颗粒。

【临床意义】　Jo－1抗体对肌炎伴间质性肺纤维化有高度特异性，抗体的效价与疾病的活动性相关。多发性肌炎、Jo－1抗体阳性及HLA－DR／－DRw52标志称为“Jo－1综合征”。

6．抗肾小球基底膜抗体检测

【结果判定】　抗GBM抗体阳性时，有三种荧光图形：在所有肾小球基底膜处显示非常尖锐、线状或花瓣状着染；颗粒状着染；斑点状着染。

【临床意义】　抗肾小球基底膜抗体是抗基底膜抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括Good－Pastue综合征、急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎。抗肾小球基底膜抗体还见于药物诱导的间质性肾炎，但它在发病中的作用不明。抗肾小球基底膜抗体阳性的患者约有50%病变局限于肾脏，另外50%有肾脏和肺部病变，仅有肺部病变者非常少见。

7．抗胃壁细胞抗体检测（PCA）

【结果判定】　小鼠胃壁细胞胞质内呈细小颗粒状着染。

【临床意义】　恶性贫血患者90%为PCA阳性。慢性萎缩性胃炎患者为100%PCA阳性。PCA的阳性率与胃黏膜病变的进展程度相关，但抗体效价与病变进展程度不相关，也不与治疗效果平行。PCA也见于许多胃黏膜萎缩、某些缺铁性贫血、十二指肠溃疡、甲状腺疾病、原发性艾迪生病和青少年型糖尿病患者等。大约1／3的甲状腺炎患者有抗胃壁细胞抗体。

8．抗甲状腺球蛋白抗体测定（TG）

【结果判定】　人或灵长类动物的甲状腺冷冻切片甲状腺腺泡内呈细小波浪状着染。

【临床意义】　抗TG阳性见于90%～95%的桥本甲状腺、52%～58%的甲抗和35%的甲状腺癌。重症肌无力、肝脏病、风湿性血管病、糖尿病也可出现阳性。此外，有些正常人，特别是妇女，抗TG阳性率随年龄而增加，40岁以上妇女检出率可达18%。

9．抗甲状腺微粒体抗体（抗TM）

【参考值】　人或灵长类动物的甲状腺冷冻切片甲状腺腺泡上皮细胞胞质斑点状着染，核阴性。

【临床意义】　抗TM（应该保持一致）阳性检出率：桥本甲状腺炎为50%～100%；甲状腺功能减低症为88．9%；甲状腺肿瘤为13．1%；单纯性甲状腺肿为8．6%；亚急性甲状腺炎为17．2%～25%；SLE为15．4%～44．7%；其他风湿病为30%。正常人也有8．4%的阳性率。抗TG与抗TM同时检测，可以提高检出的阳性率。

10．抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）

【结果判定】　cANCA：中性粒细胞胞浆内有荧光颗粒，细胞核阴性。

pANCA：中性粒细胞核周出现荧光着染，细胞核阴性。

【临床意义】　cANCA主要见于韦格纳肉芽肿（WG）。活动性WG患者在病变尚未影响到呼吸系统时cANCA敏感度是65%，当病人已出现呼吸系统、肾脏损伤时其敏感度达90%以上。其他cANCA阳性的疾病还有坏死性血管炎、微小多动脉炎、结节性多发性动脉炎等。

快速进行性血管炎性肾炎、多动脉炎、Chur－Strauss综合征、自身免疫性肝炎中pANCA的阳性率达70%～80%。pANCA主要于多发性微动脉炎相关。pANCA还见于风湿性和胶原性血管炎、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、原发性胆汁性肝硬化等。

11．心磷脂抗体测定（ACA）

【参考值】　ELISA法检测阴性，P／N≥2．1为阳性。

【临床意义】　ACA在SLE患者中阳性检出率高，达70%～80%，SLE患者中枢神经系统血栓形成与阳性ACA显著相关。血清及脑脊液中ACA的检测有助于神经精神性狼疮患者的临床诊断。高水平的ACA是急性脑血管病的预后不良的信号。ACLA在RA病人的阳性率可达33%～49%，是了解疾病进展的实验室指标。约70%未经治疗的ACA阳性病人可发生自发性流产和宫内死胎，尤其是IgM型ACA可作为自发性流产的前瞻性指标。ACA阳性者血小板减少发生率均明显高于阴性者，以IgG型抗体多见，并与血小板减少程度有关。

（四）感染免疫检测

1．血清抗链球菌溶血素“O”试验（抗O或ASO）

【参考值】　乳胶凝集法（LAT）：阴性。

【临床意义】　阳性表示病人近期内有A群溶血性链球菌感染，常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、风湿性心肌炎、急性肾小球肾炎、急性上呼吸道感染、皮肤和软组织的感染等。

2．肥达反应（WR）

【参考值】　直接凝集法：伤寒H＜1∶160；O＜1∶80；副伤寒甲、乙和丙＜1∶80。

【临床意义】　单份血清抗体效价O＞1∶80及H＞1∶160者有诊断意义；若动态观察，持续超过参考值或较原效价升高4倍以上更有价值。

（1）O、H均升高：提示伤寒可能性大，多数患者在病程第2周出现阳性。

（2）O不高、H升高：可能是预防接种或是非特异性回忆反应。

（3）O升高、H不高：则可能是感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。

3．流行性脑脊髓膜炎病原体免疫测定

【参考值】　抗体测定：间接血凝试验和ELISA法阴性。

抗原测定：对流免疫电泳法、乳胶凝集试验、RIA和ELISA阴性。

【临床意义】　感染1周后，抗体逐渐增高，2个月后逐渐下降；接受疫苗接种者高抗体效价可持续1年以上。

4．布氏杆菌凝集试验

【参考值】　间接血凝法阴性或滴度＜1∶25。

【临床意义】　凝集效价明显升高或动态上升有助于布氏杆菌病的诊断。

5．结核分枝杆菌抗体和DNA测定

【参考值】　胶体金或ELISA法检测抗体阴性；PCR法检测DNA阴性。

【临床意义】　抗体阳性表示有结核分枝杆菌感染；DNA检测特异性更强，灵敏度更高。

6．幽门螺杆菌抗体测定

【参考值】　金标免疫斑点法为阴性。

【临床意义】　阳性见于胃、十二指肠幽门螺杆菌感染，如胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等。

7．TORCH试验

【参考值】　IgM、IgG型抗体均为阴性。

【临床意义】　如果被检者两种抗体均无，应视为易感者，可注射疫苗保护。有IgM抗体出现均应做妇产科咨询后决定是否治疗性流产或继续妊娠。仅有IgG抗体应注意观察其滴度变化，如果滴度低且无变化为既往感染。若测定急性期和恢复期双份血清，抗体滴度明显升高4倍或以上，则具有诊断近期风疹感染的意义。

8．流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定

【参考值】　ELISA和微量间接免疫荧光法阴性。

【临床意义】　当恢复期血清抗体滴度比急性期≥4倍时，有辅助诊断意义，可用于临床回顾性诊断。

9．严重急性呼吸综合征（SARS）病毒抗体及RNA测定

【参考值】　ELISA和IFA法检测抗体阴性；RT－PCR检测RNA阴性。

【临床意义】　抗体阳性结果表明曾感染过SARS－CoV，由阴性到阳性的血清转化，或者急性期到恢复期抗体效价增高4倍以上，表明有近期感染；PCR阳性可表示标本中有SARSCoV的遗传物质（RNA）。

10．人获得性免疫缺陷病毒（HIV）抗体及RNA测定

【参考值】

（1）筛选试验：ELISA法和快速蛋白印迹法（rapid western blotting，RWB）均为阴性。

（2）确诊试验：蛋白印迹试验（Western blotting，WB）和RT－PCR法RNA均阴性。

【临床意义】　筛选试验灵敏度高，但特异性不高，故有假阳性，所以筛选试验阳性时应用确诊试验证实。确诊试验阳性，特别是RT－PCR法检测HIV－RNA阳性，对肯定诊断和早期诊断颇有价值。

11．支原体的血清学检测

【参考值】　补体结合试验：效价＜1∶64；间接血凝试验：阴性。

【临床意义】　单份血清效价＞1∶64～1∶128者或双份血清有4倍以上增长者，有诊断意义。间接血凝试验的敏感性高于补体结合试验，感染发病后7天出现阳性。

12．梅毒螺旋体抗体测定

【参考值】　检测非特异性抗体的定性试验：快速血浆反应素试验（rapid plasma regain test，RPR）阴性；不加热血清反应素试验（unheated serum regain test，USR）阴性；性病研究实验室试验（venereal disease research laboratory test，VDRL）阴性；检测梅毒螺旋体的特异性抗体的确诊试验：梅毒螺旋体血凝试验（treponema pallidum hemagglutination assay，TPHA）和荧光螺旋体抗体吸收试验（fluorescent treponemal antibody－absorption test，FTA－ABS）均阴性。

【临床意义】　梅毒螺旋体反应素试验敏感性高；定性试验阳性的情况下，必须进行确诊试验，若阳性可确诊梅毒。

13．淋球菌血清学测定及DNA测定

【参考值】　协同凝集试验阴性；PCR定量试验阴性。

【临床意义】　协同凝集试验特异性强、敏感性高且操作简便；PCR可做确诊试验。

14．C－反应蛋白检测

【参考值】　＜2．87mg／L（速率散射比浊法）。

【临床意义】　CRP是急性时相反应极灵敏的指标。

（1）CRP升高：见于化脓性感染、组织坏死（心肌梗死、严重创伤、大手术、烧伤等）、恶性肿瘤、结缔组织病、器官移植急性排斥等。

（2）鉴别细菌性或非细菌性感染：前者CRP升高，后者不升高。

（3）鉴别风湿热活动期和稳定期：前者升高，后者不升高。

（4）鉴别器质性和功能性疾病：前者升高，后者不升高。但是，孕妇含量较高。