动物手术的基本方法

（一）剪毛、切口和止血

对哺乳动物行皮肤切口之前，需将切口部位及其周围的毛剪去。剪毛应使用剪毛剪或粗剪刀，不可用组织剪及眼科剪。持剪姿势同一般手术剪。剪毛时，应将剪毛剪的凸面贴近皮肤，依次剪毛，注意勿剪及皮肤。剪下的毛应放入盛有水的烧杯内，以免到处飞扬，污染环境。做切口前，应注意切口的大小和解剖结构，一般以少切断神经和血管为原则，同时应尽可能地使切口与各层组织的纤维方向一致。切口的大小，便于手术操作为宜。方法是先用左手拇指和示指、中指将预定切口上端两侧的皮肤固定，右手持手术刀，用执弓式或执笔式，以适当的力量，一次全线切开皮肤和皮下组织，直至肌层。

在手术过程中必须随时注意止血，以免造成手术野血肉模糊，难以分辨血管和神经，延误手术时间。止血的方法有：①组织渗血，可用温热盐水纱布压迫、明胶海绵覆盖或电凝等方法；②较大血管出血，应用止血钳夹住出血点及其周围少许组织，结扎止血；③骨组织出血，先擦干创面，再及时用骨蜡填充堵塞止血；④肌肉的血管丰富，肌肉组织出血时要与肌组织一同结扎。为避免肌肉组织出血，在分离肌肉时，若肌纤维走向与切口一致，应钝性分离；若肌纤维走向与切口不一致，则应采取两端结扎中间切断的方法。干纱布只用于吸血和压迫止血，不可用来揩擦组织，以免组织损伤和刚已形成的血凝块脱落。实验中，应将创口暂时闭合，或用温热生理盐水纱布盖好，以免组织干燥。

（二）神经和血管的分离方法

神经和血管都是易损伤的组织，因此在分离过程中要细心、轻柔，切不可用有齿镊子进行剥离，也不可用止血钳或镊子夹持，以免损伤其结构与功能。分离时应掌握先神经后血管、先细后粗的原则。分离较大的神经和血管时，应先用蚊式止血钳将其周围的结缔组织稍加分离，然后用大小适宜的止血钳沿分离处插入，顺神经或血管的走向逐步扩大，直至将神经血管分离出来。在分离细小的神经或血管时，要用眼科镊或玻璃分针小心操作，须特别注意保持局部的自然解剖位置，不要把结构关系弄乱（如兔颈部的解剖结构，图1－21）。例如在分离兔颈部的神经时，应先分离减压神经，其次是交感神经，最后是迷走神经。如需切断血管分支，应采用两端结扎中间剪断的方法。分离完毕后，在神经或血管的下方穿以浸透生理盐水的丝线，供刺激时提起或结扎之用。然后，盖上一块盐水纱布，防止组织干燥。

图1－21　兔颈部血管、神经的分布

（三）气管插管术

在哺乳动物急性实验中，为保证呼吸道通畅，一般均需做气管插管术。其操作步骤为：

1．动物麻醉后，将其仰卧位固定后，用剪刀紧贴颈部皮肤依次将手术所需用部位的毛剪去。不可用手提起毛，以免剪破皮肤。

2．沿颈部下颌至锁骨上缘正中线做一长4～6cm的皮肤切口，分离皮下筋膜，暴露胸骨舌骨肌。注意：手术刀的用力要均匀，不可因用力过大、过猛而切断气管表面的肌肉组织。

3．用止血钳插入左右两侧胸骨舌骨肌之间，做钝性分离，将两条肌肉向两外侧缘牵拉并固定，以便充分暴露气管。用弯形止血钳将气管与背侧面的结缔组织分开，游离气管约5cm，在其下面穿线备用（穿线时应注意将气管与大血管和神经分开）。

4．用手术刀或手术剪在甲状软骨下方3或4软骨环上，横向切开气管前壁，用尖剪刀向气管的头端做一小纵向切口，使整个切口呈倒“T”字形。气管上的切口不宜大于气管直径的l／3，需防止血液流入气管内。

5．如气管内有血液或分泌物，应先用棉球揩净，再用组织镊夹住气管切口的一角，将气管插管在切口处向胸腔方向插入气管腔内，用备用线结扎插管，并固定于侧管分叉处，以免“Y”形插管滑脱。如气管内有较多分泌物或血液，应先清除，再行插管，插管后如动物突然出现呼吸急促，常提示气道不畅，应及时进行处理。

（四）动脉插管术

1．颈总动脉插管术

（1）动物麻醉后固定于手术台上。

（2）选择手术视野、剪毛：在家兔下颌至锁骨处的范围内，紧贴动物颈部皮肤（不可提起动物毛），小心地剪去动物毛，并用生理盐水纱布清理手术范围。

（3）切开颈部皮肤：第一、第二术者右手持组织镊轻轻提起两侧皮肤，沿离下颌下3cm至锁骨上lcm处的手术视野内剪开皮肤3～4cm的小口。随后用止血钳贴紧皮下向下钝性分离皮下筋膜。注意及时止血、结扎出血点。

（4）分离颈部皮下筋膜：用止血钳钳夹左、右侧缘皮肤切口向外牵拉，以便充分暴露手术视野。用蚊式止血钳或剪刀钝性分离皮下筋膜，或在筋膜上无大血管的情况下剪开皮下筋膜，暴露肌肉层组织结构。注意剪开或切开的皮下筋膜，应与皮肤切口大小一致。

（5）分离肌肉层组织：当剪开皮下筋膜后，迅速用直型止血钳夹住皮下筋膜，并与皮肤固定在一起向外牵拉，充分暴露肌肉层组织特征。此时不要盲目地进行各种手术操作，应仔细地寻找颈部组织解剖学的特殊结构。在气管的表面有2条肌肉组织的走向。一条与气管走向一致、紧贴且覆盖于气管表面上的胸骨舌骨肌，另一条肌肉即是向侧面斜行的胸锁乳突肌。在这2条肌肉组织的汇集点上插入弯止血钳，以上下左右的分离方式分离肌肉组织，即可清晰地暴露出深部组织内的颈动脉血管鞘结构。

（6）游离颈总动脉血管：细心分离血管鞘膜，游离与颈动脉伴行的各种神经纤维。在靠近锁骨端，分离出3～4cm长度的颈总动脉血管，并在其下面穿入2根手术线备用。当确定游离的颈总动脉有足够的长度时结扎远心端的血管，待血管内血液充分充盈后，在近心端先用动脉夹夹住颈总动脉血管，以便实施插入导管。

（7）颈总动脉插管：一般选择左颈总动脉，靠近颈总动脉血管的远心端血管处用医用眼科直剪成45°剪开血管直径的1／3（注意：血管切口面一定要呈斜向近心端的斜切面，不能呈垂直面）。用弯形眼科组织镊的弯钩插入到血管腔内，轻轻挑起血管。此时可见到颈总动脉的血管腔呈现一小“三角口”，迅速沿着此切口准确地插入血管导管1～1．5cm后，在近心端结扎、固定血管、放开动脉夹。利用远心端的结扎线再次结扎插管导管，记录血压信号。

2．股动脉插管术

（1）动物麻醉后固定于手术台上。

（2）选择手术视野、剪毛：在上述动物的后肢股三角处，紧贴动物皮肤剪去局部毛，并用生理盐水纱布清理手术范围。

（3）切开股部皮肤：第一、第二术者手持组织镊轻轻提起两侧皮肤，沿股三角内动脉搏动的走行方向剪开皮肤约4cm。如出现渗血或出血的情况需要及时止血。

（4）分离股部皮下筋膜：家兔的股部皮下筋膜较薄，只要用弯形止血钳采取不断撑开筋膜的方法1次或2次，即可暴露股三角肌肉层的解剖学特征。然而大鼠类动物，切开皮肤后会有一定的脂肪组织涌现，可用弯止血钳钳夹住已暴露的脂肪组织，用手术线结扎后剪去多余的脂肪组织。此时可以见到皮下筋膜组织，用眼科镊钝性分离筋膜，清晰暴露股三角解剖学结构后即可。

（5）游离股动脉血管：股三角指的是上面以腹股沟韧带为界，外侧面以缝匠肌的内侧缘为界，内侧面以长收肌的内侧缘为界，所形成的一个三角形的区域。在此区域内由外向内分别为股神经、股动脉、股静脉。然而，实际上我们只能见到的是股神经和股静脉。因为股动脉的位置是在中间偏后，恰恰被股神经和股静脉所遮盖。了解这些解剖学的特征是十分重要的，它可避免盲目地去寻找血管，同时只有确认了此部位的血管，才可进行血管导管插入操作。当寻找到股三角部位的血管后，要及时判断血管的类别。一般情况下判断动静脉血管的标准有两项：①动脉血管的颜色较为鲜红或淡红色，静脉血管的颜色为深红或紫红色；②动脉血管看似刚劲，有明显的搏动现象，而静脉血管看似单薄、无搏动感。对于小动物，利用眼科镊细心地分离股部血管鞘膜、分离血管间的结缔组织，游离股动脉表面的神经。对大动物则需要借助小号蚊式止血钳和配合眼科镊，分离股部血管鞘膜和分离血管间的结缔组织，游离股动脉表面的神经。在靠近血管远心端的区域分离出2～4cm长度的动脉血管，并在其下面穿入2根手术线备用。当确定游离的股动脉有足够的长度时结扎远心端的血管，待血管内血流充分充盈后再在近心端用动脉夹夹闭股动脉。

（6）股动脉插管：在靠近远心端血管结扎线处，用医用眼科直剪成45°剪开血管直径的1／3，血管切口应斜向近心端，呈倒“V”形的斜切面，不能呈垂直面。用弯形眼科镊的弯钩或特制的血管探针准确地插入到血管腔内并轻轻挑起血管，此时可见到动脉血管切口呈现一小“三角口”，迅速沿着此切口准确地插入血管1．5～2．5cm（小动物）或2～4cm（大动物），在近心端结扎、固定血管导管、放开动脉夹。

3．肺动脉插管术　肺动脉插管常用于检测肺动脉压、肺动脉楔压，同时可了解肺血管舒缩活动，是生理实验常用的技术。

首先调试计算机生物信号记录分析系统，连接压力换能器，校零位、定标，将肺动脉插管套在三通上，固定三通与压力传感器上，向压力传感腔内注入液状石蜡及肺动脉导管内注入肝素，排尽各部位的气泡。将肝素塞接在三通上，以便随时冲导管，防止血液栓塞导管。

取健康大白鼠一只，体重250g左右，用20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦）溶液按1ml／100g体重，腹腔注射麻醉，将麻醉好的仰卧位固定于实验板上。在颈部正中剪毛，切开皮肤，分离右侧颈外静脉2～3cm在血管下穿两条线备用，一条线结扎远心端，靠结扎近心端用眼科剪剪开血管（注意剪刀与血管保持45°，以防剪断血管），用眼科镊提起血管壁，将充满肝素的导管插入血管，通过显示器观察导管所到部位（图1－22），直至进入肺动脉，用另一条线固定血管和导管，完成肺动脉插管。

图1－22　心房、心室、肺动脉压力曲线（单位mmHg）

肺动脉插管时要注意：①静脉管壁薄，分离颈外静脉时动作要轻柔。②做静脉切口时，不宜过大，接近血管直径的1／2即可，切勿切断静脉，给插管带来麻烦。③当导管进入血管，在推进的过程中，注意曲线的变化，以此定位导管位置。④当导管进入肺动脉后，要牢固结扎血管和导管，以防出血和导管脱出。

（五）静脉插管术

1．颈静脉插管术

（1）动物麻醉后固定于手术台上。

（2）准备手术视野：在家兔下颌至锁骨处剪去动物被毛，用浸泡过生理盐水的布清理手术视野。

（3）切开颈部皮肤：手术者可用组织镊轻轻提起两侧皮肤，沿离下颌3cm至锁骨上1cm处剪开皮肤约1cm的小口后用止血钳紧贴皮下，向上钝性分离皮下筋膜3～4cm，再用医用直剪刀剪开皮肤。用同样的方法向下分离皮下筋膜，剪开皮肤3～4cm。手术中注意及时止血和结扎出血点。

（4）暴露颈总静脉：颈外静脉较浅，位于颈部皮下。当完成切开颈部正中皮肤组织后，只要轻轻提起左侧缘皮肤，用手指从皮肤外将一侧部分组织外转翻起即可在胸锁乳突肌外缘处清晰见到粗而明显的颈总静脉。沿血管走向用蚊式止血钳钝性分离皮下筋膜，暴露颈总静脉3～5cm，穿2根手术线备用。在靠近锁骨端用动脉夹夹闭颈总静脉的近心端，待血管内血液充分充盈后结扎颈总静脉的远心端。

（5）颈总静脉插管：靠近血管远心端处，用眼科直剪成45°剪开血管直径的1／3，用弯形眼科镊的弯钩插入到血管内轻轻挑起血管，此时可见到颈总静脉血管腔，插入静脉插管1．5～2cm。

（6）静脉插管固定：导管插入静脉血管后，先在近心端结扎血管导管，然后在静脉插管上打结固定，放开动脉夹。

2．股静脉插管术

（1）动物麻醉后固定手术台上。

（2）选择手术视野：在动物股三角处的范围内，紧贴局部皮肤剪去毛，并用生理盐水纱布清理手术范围。

（3）切开股部皮肤：用手指触压动物股部，触感其动脉搏动后，手持组织镊轻轻提起两侧皮肤沿股三角内动脉搏动的走向剪开皮肤约4cm，并注意及时结扎出血点。

（4）分离股部皮下筋膜：家兔及犬的股部皮下筋膜较薄，只要用弯形止血钳采取不断撑开筋膜的方法，即可暴露股三角解剖学的特征。然而大鼠类动物切开皮肤后会有一定的脂肪组织涌现，可用弯形止血钳夹住已暴露的脂肪组织，采用手术线结扎方法剪去多余的脂肪组织。此时可以见到皮下筋膜组织，用眼科镊钝性分离筋膜，清晰暴露股三角解剖学特征后即可。

（5）游离股静脉血管：在股三角内由外向内依次为股神经、股动脉、股静脉。对于小动物而言，利用眼科镊细心地分离股部血管鞘膜、分离血管间的结缔组织，游离股静脉表面的神经。对大动物则需要借助小号蚊式止血钳和配合眼科镊分离股部血管鞘膜和分离血管间的结缔组织，游离股静脉表面的神经。直至在靠近远心端的区域，分离出2～4cm长的静脉血管，并在其下面穿入两根手术线备用。当确定游离的股静脉有足够的长度时，用动脉夹夹住近心端的血管，待静脉血管内血液充分充盈后再结扎远心端血管。

（6）股静脉插管：在靠近远心端血管处，用医用眼科直剪成45°剪开血管直径的1／3。注意血管切口一定要呈斜切面，不能呈垂直面。用弯形眼科组织镊的弯钩或特制的血管探针准确地插入血管腔内，并轻轻挑起血管。此时可见到静脉血管切口呈现一小“三角口”，迅速沿此切口准确地插入血管导管1．5～2．5cm，在近心端结扎、固定血管导管。再利用远心端的结扎线再次结扎插管导管。

（六）输尿管插管术

1．动物麻醉后固定于手术台上。

2．剪去耻骨联合以上腹部的部分被毛。

3．在耻骨联合上缘约0．5cm处，沿（腹）白线切开腹壁约0．5cm小口，止血钳夹住切口边缘并提起。用手术刀柄上下划动腹壁数次（分离腹腔脏器），然后向上、向下切开腹壁层组织3～4cm。

4．寻找膀胱，如膀胱充盈，打开腹腔后，膀胱自动膨出腹腔，可用50ml的注射器将尿液抽出，将其向上翻移至腹外，辨清楚输尿管进入膀胱背侧的部位（即膀胱三角）后，细心地用玻璃分针分离出一侧输尿管。

5．在输尿管靠近膀胱处用丝线系一松结备用，离此约2cm处的输尿管正下方穿1根线，用眼科剪剪开输尿管（约输尿管管径的1／2），用镊子夹住切口的一角，向肾脏方向插入输尿管导管（事先充满生理盐水），用丝线在切口处前后结扎固定，防止导管滑脱，平放输尿导管，直到见导管出口处有尿液慢慢流出。

6．手术完毕后，用温热（38℃左右）生理盐水纱布覆盖腹部切口，以保持腹腔的温度。如果需要长时间收集尿样本，则应关闭腹腔。可用皮肤钳夹住腹腔切口关闭腹腔或者采用缝合方式关闭腹腔。

（七）膀胱插管术

同上述输尿管插管法，切开腹壁将膀胱轻移至腹壁上。先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用棉线结扎膀胱颈部，以阻断它与尿道的通路，然后在膀胱尖处选择血管较少处剪一纵形小切口，插入膀胱插管（可用一滴管代替，插管内先灌满温热生理盐水），插管口最好正对着输尿管在膀胱的入口处，但不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管。将切口边缘用线固定在管壁上。膀胱插管的另一端用导管连接至记滴器记滴。此时，可看到尿液从插管中缓慢逐滴流出。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖在腹部的膀胱与脏器上，以保持温度。

（八）胆总管插管术

于剑突下2cm在正中线做皮肤切口（长6～8cm），沿腹中线切开腹壁及腹膜，找到十二指肠大乳头胆总管汇入十二指肠的入口，小心的分离胆总管，结扎十二指肠端，靠近结扎端向肝脏方向做一斜切口，插入充满生理盐水的细塑料管（插入端剪成斜面），用留置的线结扎固定。

（九）心导管插管术

心导管插管通常有两种方法，即右心导管插管术和左心导管插管术。经静脉插入导管至右心腔，称为右心导管插管术；经动脉逆行插入导管至左心腔，称为左心导管插管术。现对右心导管插管技术和左心导管插管技术分别予以介绍如下。

1．右心导管插管术　在家兔或大鼠下颌至锁骨上缘的范围内剪去动物被毛，用生理盐水纱布清理手术范围。距下颌2cm处至锁骨上1cm处，剪开2～3cm的皮肤切口并止血。提起皮肤切口，钝性分离浅筋膜、肌肉，在胸锁乳突肌外缘清晰可见颈外静脉（一般用右侧）。暴露右侧颈外静脉2～3cm。在靠近锁骨端用动脉夹夹闭近心端颈外静脉，在血管的远心端穿手术线，待血管内血液充盈后用棉线结扎颈总静脉的远心端。测量切口到心脏的距离，并在心导管上做好标记，作为插入导管长度的参考。靠近远心端已用棉线结扎血管处用眼科剪成45°剪开l／3血管，用弯形眼科组织镊的弯钩插入到血管内轻轻挑起血管，此时可见到静脉血管腔，迅速插入心导管约2．5cm后，在近心端结扎血管与导管，放开动脉夹。当将心导管插入到颈静脉后，继续平行地继续推送导管时遇到了阻力，此阻力是因接触锁骨所致，应将心导管提起成45°的角度，稍后退再继续插入导管至心导管上所做标记处，插管时出现一种“扑空”的感觉，表示心导管已进入到右心室。此时应借助显示器上图形的变化，证实心导管是否已进入右心室。在近心端处重新牢固结扎血管。在远心端处将结扎血管的棉线再结扎到导管上，起到加固的作用。

2．左心导管插管术　动物麻醉后固定于手术台上。颈部手术，找到颈动脉鞘并游离颈总动脉（一般用左颈总动脉）。右手持玻璃分针顺着血管走向钝性分离颈总动脉2～3cm，穿两根手术线备用，一根线结扎远心端，近心端用动脉夹夹住，另一根线打一松结备用。在靠近远心端血管结扎处用左手拇指及中指拉住远心端线头，示指从血管背后轻撬血管，右手持眼科剪与血管成45°剪开血管直径的1／3。测量切口到心脏的距离，在心导管上做一标记作为插入导管距离的参考依据。用弯形眼科组织镊的弯钩插入到血管腔内轻轻挑起血管，此时可见到颈总动脉血管腔。右手持心导管以其尖端斜面与动脉平行地向心方向插入动脉内，插入心导管约2cm后，用手轻轻捏住血管切口部位，放开动脉夹。操作者一手捏住血管切口处，另一手将心导管继续、平行地推送到预定部位。在计算机屏幕上可以看到平均动脉压的曲线图形变化。当心导管到达主动脉入口处时，即可触及脉搏搏动的感觉，继续推进心导管。若遇到较大阻力，切勿强行推入，以免损伤主动脉瓣，此时可将心导管略微提起少许成45°，再顺势向前推进，出现一种“扑空”的感觉，表示心导管已进入到心室部位，心导管进入心室，在计算机屏幕上出现心室压力波形。此时，在近心端重新牢固地结扎血管。在远心端将结扎血管的手术线再结扎到导管上，起到加固的作用。

（十）开颅术

在研究中枢神经系统的功能时，往往需打开颅骨，安置或埋藏各种电极、导管。颅骨开口及位置大小视实验需要而定。现以兔为例介绍开颅方法：动物麻醉后行气管插管术，固定兔于脑立体定位仪上。剪去头顶部的毛，沿矢状线切开头皮，分离皮下组织及肌肉，钝性分离骨膜，暴露前囟、人字缝和矢状缝。确定开颅位置，在其中心钻一小孔。调好颅骨钻头的钻进深度（兔一般为2～3cm），将钻头中心轴插入小孔，垂直向下压并旋转钻头。钻至内髓板时有突破感，此时应减轻力度，缓缓钻进，以免损伤硬脑膜及脑组织，当旋转至有明显突破感时则可打开颅骨。如需扩大颅骨开口，可用咬骨钳一点点咬去，不能大块撕扯，以免出血难止。咬除矢状静脉窦处的颅骨时尤需小心。一般应保留前囟、人字缝等骨性标志。如需剪除硬脑膜，可用弯针尖挑起，用眼科剪小心剪开，勿损伤皮层小血管。