血液凝固实验结果分析

【实验目的】

以血液凝固时间作为指标，熟悉血液凝固的影响因素，加深对生理止血过程的理解。

【实验原理】

血液凝固是一个酶的有限水解激活过程，在此过程中有多种凝血因子参与。根据凝血过程启动时激活因子来源不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。

【实验对象】

家兔。

【实验用品】

20%氨基甲酸乙酯溶液，肝素（8U／ml），2%草酸钾溶液，生理盐水，液状石蜡，肺组织液（取大鼠肺剪碎，洗净血液，浸泡于3～4倍量的生理盐水中，过滤收集的滤液即成肺组织液，存冰箱中备用），兔手术台，常规手术器械，动脉夹，动脉插管（或细塑料导管），注射器，试管8支，小烧杯2个，试管架，竹签1束（或细试管刷），秒表。

【实验步骤】

1．麻醉和固定　耳缘静脉注射氨基甲酸乙酯溶液，按5ml／kg的量，将兔麻醉，仰卧固定于兔手台上。

2．颈部手术　正中切开颈部，分离左侧颈总动脉，远心端用线结扎阻断血流，近心端夹上动脉夹。在靠近左总动脉远心端斜向近心端剪一小切口，插入动脉插管（或细塑料导管），结扎导管以备取血。

【观察项目】

1．取兔动脉血10ml，注入两个小烧杯内，一杯静置，另一杯用带有橡皮刷的玻棒或竹签（也可用小号试管刷）轻轻搅拌，数分钟后，玻棒或竹签上结成红色血团。用水冲洗，观察纤维蛋白形状。然后比较两杯的凝血情况。

2．打开动脉夹，准备好的每支试管中滴入兔血2ml，即刻开始计时，每隔15s倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状不再流动为止，记录所经历的时间。6、7、8号试管加入血液后，用拇指盖住试管口将试管颠倒两次，使血液与药物混合。观察血液是否发生凝固及发生凝固的时间，把结果纪录于表2－2中。

表2－2　不同因素对血液凝固的影响

3．如果加肝素和草酸钾的试管不出现血凝，可再向两管内分别加入0．025mol／L的CaCl2溶液2～3滴，观察血液是否发生凝固？

【注意事项】

1．采血的过程尽量要快，以减少计时的误差。对比实验的采血时间要紧接着进行。

2．判断凝血的标准要力求一致。一般以倾斜试管达45°时，试管内血液不见流动为准。

3．每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。

【思考题】

1．肝素和草酸钾皆能抗凝，其机制一样吗？为什么？

2．如何加速或延缓血液凝固？试阐明机制。

3．分析上述各因素影响凝固时间的机制。

4．正常人体内血液为什么不发生凝固？

5．如何认识纤维蛋白原在凝血过程中的作用？

（刘海云　蔡少华）